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多糖浓缩方法有哪些

发布时间:2024-01-12 23:28:46

1. 多糖提取中水提法的具体步骤

水对植物组织的穿透力强,提取效率高,在生产上使用安全、经济。用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取采用热水浸提法,该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物,或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质,沉淀提纯多糖。但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同,它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离。还可按不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离,其中,以乙醇沉淀最为普遍,但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高,此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出,有两种方法:一为酶解,二位弱碱溶解。
纯手打,望采纳。

2. 多糖提取方法有哪些

溶剂提取法
溶剂提取法是从植物中提取多糖的常用方法,溶剂提取法首先要考虑的因素是选择溶剂,一般应遵循相似相溶的原则,即极性强的有效成分选择极性强的溶剂,极性弱的成分选择极性弱的溶剂。多糖是极性大分子化合物,应选择水、醇等极性强的溶剂。在所有溶剂中,水是典型的强极性溶剂,对植物组织的穿透力
强,提取效率高,在生产上使用安全。它能用于各种植物多糖,被广泛应用。用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法,该法所得多糖提液可直接或离心除去肢高不溶物;或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质,用高浓度乙醇沉淀提纯多糖;但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同,它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离;还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离;其中,以乙醇沉淀最为普遍。刘青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,热水提取控制条件为:温度为20~100℃,水与紫
菜的液固质量比为50:1,提取时间30~180min,经多次
试验最终得率为2.05%。周峙苗得到热水浸提羊栖菜
多糖的最佳因素:浸提温度为煮沸(102℃),ph为3.0,
浸提时间为3h,液固质量比为40:1。李战对三种紫球
藻的提取工艺研究表明,三种紫球藻的最佳提取工艺
各不相同。铜绿紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度
5%,乙醇用量为3倍体积,醇沉时间为1.5h。氯仿与正
丁醇的比例4:1,样液与sevag试剂的比例1:2,作用时
间为15min。淡色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度
75%,乙醇用量为2倍体积,醇沉时间为1h,氯仿与正
丁醇的比例3:1,样液与sevag试剂的比例1:2,作用时
间为45min。血色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度
50%。乙醇用量为1倍体积,醇沉时间为0.5h,氯历陵尺仿与
正丁醇的比例4:1,样液与sevag试剂的比例2:1,作用
时间为45min。
酸碱提取法
有些多糖适合用稀酸或碱溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸碱提取法有其特殊性,因多糖类的不
同而异。只在一些特定的植物多糖提取中占有优势,而
且即使有优势,在操作上还应严格控制酸碱度。因为
某些多糖在酸性或者碱性较强时,可能引起多糖中糖
苷键的断裂。另外,稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅
速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。赵宇等对海篙
子多糖的提取方法研究发现,从硫酸根含量及粗多糖
产率看酸提方法好于水提方法。具体方法为:100g海
篙子干粉,加入1000ml 0.1mo1/l hcl溶液提取。室温
搅拌1h后过滤,重复操作三遍,合并滤液;滤液减压浓
缩至总体积的1/5,再加入95%乙醇至乙醇浓度达
30%,沉淀,离心除去沉淀中的褐藻酸,继续向上清液
中加入乙醇至乙醇浓度达7%。室温放置过夜使沉淀
完全,离心,沉淀干燥得海篙子粗多糖,多次试验算得
平均产率为3.35%。
孟宪元等在茜草多糖提取研究中发现酸提相对
多于水提,以稀酸提取茜草多糖,产品纯度较高。具体
方法如下茜草根粗粉1000g 5%hcl浸泡、离心、取上
清液加入etoh并调节至浓度为7%,静置,2500rpm
离心,收集棕色沉淀物,95%etoh洗涤3次,用45%
hcl溶解。加1%活性炭脱色,真空抽滤,滤液4℃过
夜,弃去容器底部少许沉淀物。溶液置透析袋内,逆水
法透析3d,冷冻干燥,得白色粉末状多糖约10g。
hayashi katsuhiko发明了一种从绿色藻类中提取酸汪耐
性多糖的方法,而这种多糖用常规的热水法是无法得到的。具体过程为:将干燥的绿藻粉末制成悬浮液,热
水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分
离,取粘稠的固状物,加入碱水,在ph≥10的条件下
再进行搅拌提取,碱水提取液在搅拌的同时加入酸水
调节ph值为3.0~4.0,静置沉降后离心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一
项生物技术,在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取
条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的
释放或提取。此外,使用酶还可分解提取液中淀粉、果
胶、蛋白质等的产物,常用的酶有蛋白酶,纤维素酶,果
胶酶等。孟江研究不同酶对大枣渣多搪提取效果的
影响,根据多糖得率、多糖含量及蛋白质含量进行综合
评分得到最适合的酶为复合酶2(先胰蛋白酶提取,后
木瓜蛋白酶提取),接下来依次是木瓜蛋白酶、复合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(ph=7.0)、胃蛋白酶(ph=2.0)。复合酶2作用条件温
和,多糖得率及含量较高,且蛋白含量较低,实为一种
理想的酶提取剂。通过进一步正交实验考察得出最佳
工艺:先用胰蛋白酶3%,40倍体积在ph=7.0,65℃温
浸1.5h后,再加木瓜蛋白酶2.5%,在ph=7.0,50℃水
温浸1h,过滤残渣加40倍体积水,迅速升温至80℃,
然后温浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法还有超滤法,超声波强
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技术在不断
改进和创新,但对于同一种方法和技术又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在选取提取分离方法的同
时,应当根据目标多糖的特点、物理化学性质,综合比

3. 粗多糖提纯的方法有哪些

一、多糖的提取
1 热水浸提法
其步骤为:原料→粉碎→脱脂→粗提(2-3次)→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥
2 微波辅助提取法
3超声波辅助法与常规提取法相比,具有提取时间短、产率高、无需加热等优点[17].
4 索氏提取法:(索氏提取器中,石油醚)
5 醇提法:(乙醇)
醇提法方法简单,易于操作,但提取率较低,乙醇使用量大,不宜大规模提取使用.
6 其它方法:
多糖的提取方法还有稀碱液浸提法、稀酸液浸提法、酶法等.但由于稀酸、稀碱条件下,易使多糖发生糖苷键的断裂,部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少,因培好厅而很多试验中避免采用稀碱液浸提法和稀酸液浸提法.
二、多糖的纯化
多糖中杂质除去方法 粗多糖中往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖等杂质,必须分别除去.
1 除蛋白质常用的方法有
1) 沙维积法(Sevag法):
2) 三氟三氯乙烷法
3) 三氯醋酸法
4) 酶解法:在样品溶液中加入蛋白质水解酶,如胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶等,使样品中的蛋白质降解.通常将其与Sevag法综合使用除蛋白质效果较好.
5 )盐酸法:取样品浓缩液,用2mol/L盐酸调节其PH至3,放置过夜,在3000r/min条件下离心,弃去沉淀,即脱去蛋白质.
6) 其它方法:可以加入5%ZnSO4溶液和饱和Ba(OH)2溶液,振荡后离心去蛋白.此法除蛋白不够彻底,可结合Sevag法使用.还可在提取液中加入50%的TCA溶液至沉淀完全,在4000r/min的条件下离心10min,收集上清液,即为除蛋白液.
还有人使袜兄用4:1的氯仿-乙醇溶液除蛋白,将混合液清摇,再静置,取上清液.此过程需重复多次方可除尽蛋白.
除去蛋白质的样品用紫外分光光度计检验,观察在280mm处是否有吸收,如果无吸收则表明蛋白质已经除尽.
2 除色素
1)活性炭
2)弱碱性树脂:对于植物来源的多糖,可能含有酚型化合物而颜色较深,这类色素大多呈负性离子,不能用活性炭吸收剂脱色,可用弱碱性树脂DEAE纤维素或DuoliteA-7来吸附色素.
3)氧化脱色:若糖和色素时结合的,易被DEAE纤维素吸附,不能被水洗脱,这类色素可进行氧化脱色:以浓氨水或NaOH液调至PH8.0左右,50℃以下滴加H2O2至浅黄色,保温2小时.
4)乙醚和无水乙醇洗涤:依次用丙酮、无水乙醚和无水乙醇洗涤多糖,即可得到较为纯净的多糖.此法较为简单,便于操作,多配隐糖损失也较小.
5)用4:1的氯仿-正丁醇除色素.操作简单,多糖有一定损失.
6)发酵来源的多糖颜色一般较浅,色素含量较少,一般可不除色素.
3 除低聚糖等小分子杂质
1)采用逆向流水透析法.即准备好一桶蒸馏水,用一根导管将水通入透析袋的烧杯底部,另用一根导管将水引出,根据水量控制流速,使水缓慢流动48小时.这样得到的就是多糖的半精品.
2)利用溶液浓度扩散效应,将分子量小的物质如无机盐、低聚糖等从透析袋渗透到袋外的蒸馏水中,不断换水即可保持浓度差,从而除尽小分子杂质.具体的做法是根据多糖溶液的体积截取相应长度的透析袋,用透析夹夹住一端,灌入多糖液,离液面2-3cm处夹紧透析袋,置于一大烧杯中,注入蒸馏水至完全浸没透析袋后,用磁力搅拌器慢速搅拌,每12小时换一次水,重复3-4次.

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