简单说9个字“出得来”、“分得开”、“跑得快”
出得来:所要检测的物质要能被检测到。要针对物质的特性要考虑检测器的选用及参数设定,以及流动洗脱力的强弱。
分得开:所有的检测组份要能完全分离,之间不相互干扰。要考虑流动相溶剂的选择;比例的优化;流动相PH的控制,是否要加离子对试剂;色谱柱的选型等凡是影响色谱分离因素都要考虑到。以进行优化。
跑得快:在满足可检测性与完全分离的条件下,进一步优化各项条件,以达到快速检测,降低分析运行时间,提高检测效率。
你所说的“10——90,
5——35,60——100,45——95等”应该是指的梯度洗脱吧?
如何进行液相分析方法开发
一、方法验证简介
分析方法开发与验证是一个整体,在实际工作中,一般是先开发分析方法,经过适当的优化以后再做方法验证。所谓方法验证是指为了保证分析检测结果准确、可靠,必须对所采用的分析方法的准确性、科学性和可行性进行验证,以证明分析方法符合分析测试的目的和要求。方法验证在质量控制上有重要的作用和意义,在建立产品质量标准时,分析方法需经验证;在产品生产工艺变更、配方的组分变更、原分析方法进行修订时,则质量标准分析方法也需进行验证。
二、方法验证内容包括
专属性、线性、范围、准确度、精密度、检出限、定量限、耐用性等。
三、方法验证成熟仪器项目
色谱类仪器:气相色谱/质谱联用仪GC/GC-MS、液相色谱/质谱联用仪LC/LC-MS、三重四级杆串联液质仪UPLC-MS-MS;
元素类仪器:电感耦合等离子发射光谱/质谱联用仪ICP-OES、电感耦合等离子发射光谱/质谱联用仪ICP-MS、离子色谱仪IC、原子吸收光谱仪AAS、原子荧光光谱仪AFS。
四、方法验证成熟分析项目
鉴别试验、杂质定量检查或限度检查、微量助剂(如增塑剂、抗氧剂等助剂)的测定、有效成分含量测定、溶剂残留、元素测定、离子测定等。
❸ 如何建立好药物含量的高效液相色谱分析方法
1,首先必须去进行配制药物溶液前处理的工作。找出该药物的溶解性,探索出该药物的有效溶剂,使该药物能在该溶剂中充分溶解,这是药物溶液配制的前处理必然途径,也是进行高效液相色谱含量分析的首要条件。
2,然后就是根据该药物配制溶液的前处理方法,配制好适当浓度的药物溶液,利用该药物溶液,在紫外-可见分光光度计上进行紫外扫描,找到该药物的最大吸收波长,确立适合的高效液相色谱分析的检测波长。因为它是进行高效液相色谱含量分析的基本条件
3,再是色谱柱的选择:根据药物的极性来选择合适极性的色谱柱类型
4,再是流动相的确立。配制一系列的流动相,考察合适的流动相。
5,再是准确度考察。通过精密度、重复性和重现性的考察来衡量仪器的准确度
6,接着是线性关系考察。配制不同浓度的一系列溶液,进行其溶液的色谱扫描。根据所得的不同浓度下的药物峰面积作为纵坐标(Y轴)、以溶液浓度为横坐标(X轴)进行线性回归,得到其线性图,考察其线性程度,即线性相关系数R=?。考察的目的就是:为了我们在做含量分析时,选择一个合适的浓度进行检测,不至于你配制的待测溶液浓度范围不在线性范围之内,造成测量结果的错误。
7,再是最低检测浓度和检测限的考察。目的是为了考察这种方法的实用性,是否符合痕量分析的要求。
8,再是回收率考察。目的是考察方法的准确性。
9,再是稳定性考察。目的是考察试验方法的时间性,指导我们在分析检测时,建立合适的溶液配制到进样的时间段,保证实验结果的准确性。
10,最后是专属性考察。