1、取患者的分泌物或者血液做细菌培养,看哪种细菌感染,并且对哪种药物敏感。根据药敏结果选择敏感抗生素,达到最理想的治疗效果,同时也不会因为盲目使用抗生素造成机体耐药的现象。
2、药敏试验在临床上常常会用到,从标本的采集、细菌培养到药物敏感圆迹毕试验,要求都是比较严格的,这个过程中一定要严格的注意外环境,防止受到污染影响结果橘芹。药敏试验主要用于反复感染治疗之后没有好转,甚至症状没有减轻,最终选择州瞎最敏感的药物杀灭细菌,达到临床的治疗效果。
‘贰’ 如何做药敏试验
用药敏实验进行药物敏感度的测定,以便准确有效的利用药物进行治疗。但由于药敏试验要求比较严格,条件比较高,仅仅在大中专院校或科研单位有条件的可以操作,一些养殖厂或一些门诊难有条件进行药敏试验的操作。针对这个问题,农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心经过几年的总结和实践,逐渐总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法。目前,临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法,稀释法(包括琼脂和肉汤稀释法),抗生素浓度梯度法(E-test法),和自动化仪器等。
纸片扩散法
该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增加,抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时,纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长,而抑菌范围外的菌株则可以生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈,不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同,抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度,并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。
稀释法
稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性,分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时,抗菌药物的浓度通常经过倍比(lg2)稀释,能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度(MIC),一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点(敏感、中介和耐药)的浓度,同时也应该包含质控参考菌株的MIC.
‘叁’ 怎样测试过敏
护肤品过敏测试可以把护肤品涂到耳后根来判断,或者是涂在手臂的内测。从耳后根来测试护肤品是否过敏:需要用棉签蘸取少量的护肤品涂在耳后根,静待一个小时,如果皮肤没有出现什么不适感,也没有什么不正常现象,那么说明这款护肤产品...1、皮内试验。在人体的皮内注射过敏原,然后再过一段时间观察皮肤的反应,根据皮肤的反应来判断是否对这种物质有过敏现象。在检测之前是需要保持皮肤的清洁与卫生的。
2、点刺试验,这是很常见的一个检测方式,先将点刺的皮试液滴在皮肤上面,然后用点刺针穿过滴液,刺入人体的皮内组织处,这种检查的方法非常的安全,皮损小。患者并不会承受较大的痛苦,但是费用会比较高。
3、斑贴试验。最主要是能够检测人体面部和手部等部位过敏原的有效方法,常见的过敏原有甲醛芳香混合物等等。这种检查的方法非常的简单方便。将抗原稀释液浸过的药膜直接放置在前臂屈侧,然后再观察皮肤的反应,一旦发现有过敏反应,那么就能够找到过敏原了。
怎样测试皮肤过敏就为大家介绍到这里。皮肤容易过敏的朋友们,尤其是在换季的时候是需要特别的注意个人的护理措施的,要注意保持室内的清洁,还应该要特别重视饮食,不要抽烟,也不要喝酒,应该要多吃水果蔬菜补充维生素,患者要保证充足睡眠时间,不要乱用化妆品,尤其是劣质性的化妆品不可以使用,以免导致人体出现其他类型的并发症。
‘肆’ 怎样做药敏试验
一、 纸片扩散法
该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增加,抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时,纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长,二抑菌范围外的菌株则可以生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈,不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同,抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度,并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。
二、稀释法
稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性,分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时,抗菌药物的浓度通常经过倍比(lg2)稀释,能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度(MIC),一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点(敏感、中介和耐药)的浓度,同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法 首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株,然后是结果判读。 2.2 肉汤稀释法
三、抗生素浓度梯度法
四、自动化仪器法
‘伍’ 药物敏感试验的药物敏感试验的方法
测定细菌对抗菌药物敏感性的试验称为药物敏感试验或简称药敏试验。由于养鸡业中抗菌药物的广泛使用,导致抗药菌株越来越多,盲目用药常常效果不佳。因此,进行药物敏感试验已成为正确使用抗菌药物的必要手段。药物敏感试验的方法有多种,如纸片扩散法、试管法、挖洞法等。其中,纸片扩散法简便易行,出结果快,是目前生产中最常见的方法,现将该种方法介绍如下:
(1)药敏纸片的准备
常用抗菌药敏纸片已有商品供应,一般可以买到,可直接利用。
(2)药敏培养基的制备
①普通肉汤琼脂:又称营养琼脂。蛋白胨10克、氯化钠(NaCl)15克、磷酸氢二钾(K2HPO4)1克、琼脂20克、牛轮岁逗肉浸出液1000毫升(可用牛肉浸膏10克浸于1000毫升蒸馏水代替)。
牛肉浸出液的配制方法:取瘦牛肉去掉脂肪、腱膜等,绞碎或切碎,按500克牛肉加1000毫升蒸馏水混合,置4℃冰箱内过夜,取出后加热到80~90℃,经1小时后,以数层纱布滤除肉渣并挤出肉水,再用脱脂棉过滤,量其体积并用蒸馏水补足1000毫升,分装后20分钟高压蒸汽灭菌,即制成牛肉浸出液。
将以上其他成分加入到牛肉浸出液中,加热溶解,冷却后调pH至7.6,煮沸10分钟,用滤纸过滤后分装,再以10.4万帕高压蒸汽灭菌25分钟,取出后冷却至55℃左右,在90毫升直径灭菌的平皿上倾注成4毫米厚的平板。做好的平雀乎板,密封包装后可在冰箱中保存2~3周。使用前应将平皿置37℃温箱中培养24小时,确认无菌后再用于试验。
②鲜血琼脂:将灭菌的营养琼脂加热融化,至45~50℃时加入无菌鲜血5%(每100毫升营养琼脂中加入鲜血5~6毫升)倾注平皿。无菌鲜血,用无菌手术取健康动物(绵羊或家兔等)的血液,加入盛有无菌5%柠檬酸钠溶液的容器中(血与5%柠檬酸钠的比例为9∶1)混匀,置冰箱中保存备用。
(3)试验方法
临床上分离到的细菌进行纯培养。用灭菌的接种环挑取被检菌的纯培养物划线或涂布于平板上,并尽可能使其密而均匀。用灭菌镊子将药敏纸片平放于平板上并轻压使其紧贴平板。直径9.0厘米的平皿可贴7张纸片,纸片间距不少于24毫米,纸片与平皿边缘距离不少于15毫米。贴好后将平板底部朝上置于37℃温箱中培养24小时,取出观察结果。
(4)结果判定
凡对被检菌有抑制力的抗菌药物,由于向周围扩散,抑制细菌的生长,故在纸片周围出现一个无细菌生长的圆圈,称为抑菌圈。抑菌圈越大,说明该菌对此种药物敏感度越高,反之越低。如果无抑菌圈,则说明该菌对此种药物具有耐药性。所以,判定结果时,以抑菌圈直径的大小来作为细菌对该药物敏感度高低的标准。
一般来说,抑菌圈直径70毫米以上为极度敏感,15~20毫米为高度敏感,10~15毫米为中度敏感,10毫米以下为低敏感,无抑菌腊卖圈为不敏感。对多黏菌素的作用,抑菌圈在10毫米以上者为高度敏感,6~9毫米为低度敏感。
经药敏试验后,应该选择极度敏感或高度敏感的药物进行治疗。
‘陆’ 药物敏感实验方法主要有什么,才用培养基为什么用肉汤
药敏试验的方法目前公认的只有三种:KB法、MIC法、E-test法,比较常用的是前两种。
药敏试验并不需要用肉汤,只需要将目标菌培养出菌苔之后,在生理盐水中研磨配置出一定麦氏单位的浓度菌液即可使用,有时候也可能会用肉汤进行增菌,在肉汤里的细菌麦氏单位达到一定程度也可以用来做药敏,但是很少这样做。
‘柒’ 皮试操作怎么做
皮试
皮试是皮肤(或皮内)敏感试验的简称。某些药物在临床使用过程中容易发生过敏反应,如青霉素、链霉素、细胞色素C等,常见的过敏反应包括皮疹、荨麻疹、皮炎、发热、血管神经性水肿、哮喘、过敏性休克等,其中以过敏性休克最为严重,甚至可导致死亡。
1定义
为了防止过敏反应的发生,特别是严重过敏反应的发生,规定一些容易发生过敏反应的药物在使用前需要做皮肤敏感试验,皮试阴性的药物可以给病人使用,皮试阳性的则禁止使用。这些需要做皮试的药物被称为皮试药物.皮肤试验是借助抗原、抗体在皮肤内或皮肤上的反应进行免疫学检测的方法。根据反应机制不同可分为两大类,一类为中合反应皮肤试验,可观察机体的体液免疫状态;另一类为超敏反应皮肤试验,用来检测机体的超敏反应和细胞免疫状态。锡克试验是衡量人体对白喉易感性或免疫程度的一种皮试。方法是注射一定量的白喉毒素于受试者前臂屈侧皮内。受试者如无免疫力,24~48小时,局部皮肤出现红肿,直径在1~2厘米者为阳性反应。相反,受试者如有免疫力,其血清中含有足量的抗毒素抗体,能中和注入的毒素,局部不出现红肿,为阴性反应。此试验除用来测定机体对白喉的易感性以外,还可检测白喉预防接种后是否产生免疫力。其实质是毒素、抗毒素的体内中和反应。I型变态反应(见变态反应)皮肤试验是变应原与特异性抗体IgE(免疫球蛋白E)在皮内进行的一种反应。引起I型变态反应的抗原,经注射或划痕后,可在10~20分钟内引起红肿反应,如青霉素皮试,异种动物血清皮试等。本试验阳性者表示对该抗原过敏
2准备工作
首先应当制备试验用抗原,如有合格商品可直接购买。可以作为变应原的物质种类繁多,例如动物皮毛、家禽羽毛、鸽粪、昆虫、螨类、真菌、花粉、杂草、物理粉尘和各种食品等都可能成为变应原。不同抗原的制备方法不同,但一般包括以下几个步骤:①收集原料;②粉碎与匀浆;③脱脂与提取;④过滤与分离;⑤分装保存。分装保存之前应对提取产物进行鉴定。首先必须经过无菌试验、急性毒性试验和热原检查,保证提取产物无明显的毒副作用;还要测定产物的蛋白含量,用凯氏定氮法或磷钨酸沉淀法标定出总氮单位或蛋白氮单位。变应原的范围很广,难以做得完全,所以查找变应原需依靠患者的病史和医师的经验以将可疑范围缩小,学样成功的机会就大得多。一般医院和卫生所都能做药物过敏试验,多在注射室完成;防疫部位在一些免疫接种之前有时也要做皮肤试敏;其余的均在变态反应科或检验科的专门实验室。实验室应有专人负责,除具备各种专用试验器材之外,还应备有意外抢救的药品及设施。试验部位应清洗干净,严格消毒,以免皮肤的不洁物引起非特异性反应或感染。当皮肤患湿疹、感染、皮炎或外伤时不宜进行皮肤试验。正在或近日服用免疫抑制剂或抗组胺药物者也不宜进行皮肤试验。
3类型及方法
皮肤试验的最常用部位是前臂曲侧,因此处皮肤较为光滑细腻,而且便于试验操作和结果观察。按正规作法,左右两臂一侧作试验,另一侧作对照。需要时也可选用上臂或背部皮肤。具体试验方法可分为皮内试验(intracutaneoustest)、挑刺试验(pricktest)和斑贴试验(patchtest)。
皮内试验
将试验抗原与对照液各0.02~0.03ml用皮试针头分别注入皮内(不是皮下),使局部产生一个圆形小丘。当同时试验多种抗原时,相互间至少间隔4cm,以免强烈反应时互相混淆结果。皮内试验的敏感性比其他皮肤试验高,所用抗原应适当稀释,以免出现严重反应;当高可疑性抗原出现阴性结果时,应逐渐加大抗原浓度进行重复试验。皮内试验是最常用的皮肤试验,应用范围也很广,几乎各类抗原及各型反应都可用皮内试验进行测定,只是不同类型的反应观察结果的时间和判定结果的标准不所不同。
挑刺试验
也称点刺试验或刺痕试验。将试验抗原与对照液分别滴于试验部位皮肤上,用针尖透过液滴或在皮肤上轻轻地挑刺一下,以刺破皮肤但以不出血为度;1min后拭(吸)去抗原溶液。同时试验多种抗原时,千万注意不要将不同的抗原液交叉混合,以免出现假阳性。挑刺试验主要用于型变态反应,该法虽比皮内试验法敏感性稍低,但假阳性较少,与临床及其他试验的相关性较强。划痕试验(scratchtest)是挑刺试验的一个变型,用三棱针或注射器针头在皮肤划一条或多条约1cm长的创痕。因为划痕的轻重与长短难于掌握一致,故不常用。
斑贴试验
将试验抗原直接贴敷于皮肤表面的方法。试验抗原为软膏时可直接涂沫在皮肤上;如为固体物时可用蒸馏水混合或浸湿后涂敷于皮肤上;如为水溶液则浸湿纱布后敷贴于皮肤上。所用抗原浓度以不刺激皮肤为原则,涂敷范围以0.5~1cm为宜。涂敷后盖以油纸或玻璃纸,用纱布或绷带固定;如有明显不适感可随时打开查看,并进行适当处理。斑贴试验主要是检测Ⅳ型变态反应,敏感程度虽然不太高,但假阳性较少,结果的可信度大。