高中生物分离方法有哪些

A. 高中生物，什么情况下用平板划线分离法，什么情况下用稀释涂布分离法

一、平板划线分离法
由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落.
二、稀释倒平板法
先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …）,然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落.如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的.随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养.稀释涂布法：
优点：可以计数,可以观察菌落特征.
缺点：吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延.
一般用于平板培养基的回收率计数!
稀释混合平板法：
优点：可以计数,吸收量为1ml,较方便.
优点：不能观察菌落特征.
一般用于菌落总数的计数!
平板划线法：
优点：可以观察菌落特征,对混合菌进行分离!
缺点：不能计数
一般用于从菌种的分纯!涂布法使用较多,但有时不均匀 稀释倒平板法操作相对麻烦,不适合好氧和对热敏感的细菌培养 应用范围：涂布法适用于 好氧菌 稀释倒平板法适用于厌氧,兼性厌氧 我找的,看看有用没?

B. 高中生物，涂布分离法是指什么，什么情况下使用

学生问题：选修1《微生物的应用》教学中，什么时候用平板划线分离法？什么时候用稀释涂布法？
1．平板划线分离法
把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，没空陵经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。

优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离。
缺点：不能计数，一般用于从菌种的分离纯化。
例如：筛选大肠杆菌菌种。
2．稀释涂布平板法
将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂枯戚布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的亏腔菌落。
优点：可以计数，可以观察菌落特征。
缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。一般用于平板培养基的回收率计数。
例如：测定纯净水中大肠杆菌的含量。

C. 高中生物实验哪些用到差速离心法，哪些用到梯度离心法。

1、差速离心法：

分离不同密度的结构的实验用到差速离心法，如线粒体、叶绿体等。差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。

2、梯度离心法：

分离核酸、蛋白质、核糖体亚基的实验用到梯度离心法。密度梯度液的制备用梯度混合器，形成由管口到管底逐步升高的密度梯度。

(3)高中生物分离方法有哪些扩展阅读

差速离心法原理：

物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为（弧度数/秒）时，可得： F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r （1） 上述表明：被离心物质所受到的离心力与该物质的质量、体积、密度、离心角速度以及旋转半径呈正比关系。

离心力越大，被离心物质沉降得越快。 在离心过程中，被离心物质还要克服浮力和摩擦力的阻碍作用。

梯度离心法原理：

不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

D. 分离纯化微生物的方法有哪些各方法适用分离什么菌种

主要有：划线法、倒平板法、涂布法，根据分离的菌种选择不同的培养基。

稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用，不需要特殊的仪器设备，分离纯化效果好。

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离。

分离技术

主要是稀释和选择培养，稀释是在液体中或在固体表面上高度稀释微生物群体，使单位体积或单位面积仅存留一个单细胞，并使此单细胞增殖为一个新的群体。最常用的为平板划线法。

如果所要分离的微生物在混杂的微生物群体中数量极少或者增殖过慢而难以稀释分离时，需要结合使用选择培养法，即选用仅适合于所要分离的微生物生长繁殖的特殊培养条件来培养混杂菌体，改变群体中各类微生物的比例，以达到分离的目的。为保证分离到的微生物是纯培养，分离时必须用。

以上内容参考：网络-微生物分离纯化

E. 高中生物里面，什么用到了差速离心法什么用到了梯度离心法

差速离心法（离心法）：交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。
梯度离心法（浓度梯度)：细胞内的物质具有一定的浓度，把细胞放入清水中，细胞吸水涨破。除去细胞内的其他物质，得到细胞膜。
密度梯度区带离心法（简称区带离心法），是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡，在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。此法的优点是：①分离效果好，可一次获得较纯颗粒；②适应范围广，能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒，又能分离有一定浮力密度差的颗粒；③颗粒不会挤压变形，能保持颗粒活性，并防止已形成的区带由于对流而引起混合。此法的缺点是：①离心时间较长；②需要制备惰性梯度介质溶液；③操作严格，不易掌握。

F. 物质的分离方法有很多种，分别是什么，有什么特点

物质的分离方法大多数都是在萃取、膜分离、过滤、层析、盐析等分离方法的分支。
1、萃取
萃取，又称溶剂萃取或液液萃取，亦称抽提，是利用系统中组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作。即，是利用物质在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使溶质物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中的方法。
萃取是有机化学实验室中用来提纯和纯化化合物的手段之一。通过萃取，能从固体或液体混合物中提取出所需要的物质。
2、膜分离方法
一种利用薄膜的半渗透性而分离溶液混合物的化学分离方法，能从气态或液态混合物中分离出某些组分。
所用的膜既可以是具有一定规格的微孔，有如分子筛，让小分子通过微孔，而大分子则截流，从而使混合物得以分离；也可以是无微孔的高分子膜，混合物中的一些组分首先溶解在膜表面，然后扩散通过膜层，最后在另一侧蒸发，从而达到分离的目的。
3、过滤
在推动力或者其他外力作用下悬浮液（或含固体颗粒发热气体）中的液体（或气体）透过介质，固体颗粒及其他物质被过滤介质截留，从而使固体及其他物质与液体（或气体）分离的操作。
4、层析
利用各组分物理性质的不同，将多组分混合物进行分离及测定的方法。有吸附层析、分配层析两种。一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析。层析利用物质在固定相与流动相之间不同的分配比例，达到分离目的的技术。
层析对生物大分子如蛋白质和核酸等复杂的有机物的混合物的分离分析有极高的分辨力。
5、盐析
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。
向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐，可以使蛋白质性质发生改变而凝聚，进而从溶液中析出，这种作用叫作变性，性质改变，是化学反应，无法复原。

G. 分离细胞器的方法高中生物

1、分离细胞器的方法为差速离心或密度梯度离心.
2、
线粒体：结构包括线粒体内膜、外膜（上分布有基粒）、线粒体基质.线粒体内膜和线粒体基质中含有氧.
叶绿体：结构包括叶绿体外被、类囊体和基质3部分组成,外被上分布着光合作用需要的色素,类囊体和基质上有光合作用需要的酶,含有少量的DNA和RNA.
内质网：功能是合成分泌蛋白质.
高尔基体：功能是将内质网合成的蛋白质进行加工、对比分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外.
溶酶体：内部含有多种酸性水解酶,功能是溶解或消化,为细胞内的消化器官.
液泡：内有细胞液,其中含有糖类、无机盐、色素和蛋白质等物质.
核糖体：成分包括蛋白质和核糖体RNA（rRNA）,功能是：核糖体是合成蛋白质的地方.
中心体：分布在动物细胞和某些低等植物细胞,由两个互相垂直的中心粒及周围物质组成,与细胞的有丝分裂有关.

H. 微生物分离方法

微生物分离法是获得微生物纯培养物的一种分离方法。通过这个方法可实现一种微生物的培养，或获得一个细胞的后代。其具体方法有：

1、稀释倒平皿法。将待分离的材料作一系列稀释，取不同稀释度适量涂布于固体培养基平板上或与已熔化的固体培养基一起倾注入平板内，经过培养即有一个微生物细胞繁殖来的单个菌落。

2、划线法。先将已熔化的固体培养基制成平板，待凝后，取分离材料在上面划线，可作平行划线、扇形划线或其他形状的连续划线，使菌样逐渐减少，最后得到单个孤立的菌落。

(8)高中生物分离方法有哪些扩展阅读：

微生物分离技术的应用措施：

1、减少毒性氧物质的毒害作用：由于常规培养方法使用的高浓度营养基质不利于微生物生长，适当降低营养基质的浓度可以减弱这种不利影响。发现低浓度基质的培养基培养出的细菌在数量和种类上均多于高浓度基质的培养基，但营养浓度过低时会使培养出的微生物数量反而下降。

2、维持微生物间的相互作用：在培养基中加入微生物相互作用的信号分子就可简单模拟微生物间的相互作用，满足微生物生长繁殖的要求。

3、供应新型的电子供体和受体：不同微生物的代谢过程不同，因此对反应的底物要求也不尽相同。供应微生物需要的特有底物有助于新陈代谢反应的进行及微生物的正常生长。大量的研究表明，将新颖的电子供体和受体应用到微生物培养中，能够发现未知的生理型微生物。

4、分散微生物细胞：自然界中很多微生物聚集生长，形成“絮体”和“颗粒”等，致使其内部的微生物不易被培养。对“絮体”和“颗粒”进行适度的超声处理，将细胞分散再进行培养，可以使更多的微生物接触培养基而得到培养。

5、延长培养时间：对“寡营养菌”的培养，可适当延长培养时间，使其能长至肉眼可见的尺度。当然培养时间不能无限增长，因为培养时间越长，对培养环境的无菌要求就越高[4]。

6、利用琼脂替代物：琼脂对某些微生物具有毒性作用，采用无害且凝结作用较好的替代物质作为培养基固化剂，可以增加微生物的可培养性。

I. 分离色素的方法高中生物

分离色素的方法为：用丙酮先提取出色素，后用滤纸根据浓度不同静止分离。

分离方法简述：

色素主要分为天然色素和人工色素两种，天然色素常用的天然色素有胭脂树红、胭脂虫红、叶绿素、姜黄素和叶红素等；而从化工合成制得的色素称为“合成色素”。

把试样点在滤纸的滤液细线位置上，当流动相溶剂在滤纸的厅销毛细管的作用下，连续不断地沿着滤纸前进通过滤液细线芦伏薯时，试样中各组份便随着流动相溶剂向前移动，并在流动相和固定相溶剂之间连续一次又一次的分配。

结果分配比比较大的物质移动速度较快，移陪者动距离较远；分配比较小的物质移动较慢，移动距离较近，试样中各组分分别聚集在滤纸的不同的位置上，从而达到分离的目的。

J. 高中生物里面，什么用到了差速离心法什么用到了梯度离心法

观察线粒体、叶绿体、蛋白质的结构时用到了差速离心法。

利用同位素标记法观察DNA时用到了毁虚梯度离心法。

密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的；差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离。

密度梯度离心只用一个离心转速，而差速离心用两个甚至更多的转速。密度梯度离心的物质是密度有一定差异的，而差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。

(10)高中生物分离方法有哪些扩展阅读：

使用密度梯度离心法时，注意离心前将样品小心铺放在密度梯度溶液表面，离心形成区带。离心后不同大小、不同形状、有一定沉降系数差异的颗粒在备余闷密度梯度液中形成若干条界面清楚的不连续区带。再通过虹吸、穿刺或切割离心管的方法将不同区带中的颗粒分开收集，得到所需的物质。

注意事项：

1、梯度介仿弯质应具备足够大的溶解度，以形成所需的密度梯度范围。

2、梯度介质不会与样品中的组分发生反应。

3、梯度介质也不会引起样品中组分的凝集、变性或失活。

4、若离心时间过长由于颗粒的扩散作用，会使区带越来越宽。为此，应适当增大离心力、缩短离心时间，可以减少由于扩散而导致的区带扩宽现象。