⑴ 还原糖的测定
还原糖的测定方法有:直接滴定法、高锰酸钾滴定法和比色法。
直接滴定法:
在加热条件下,以次甲基蓝为指示剂,以已除去蛋白质的被测样品溶液,直接滴定已标定过的费林氏液,样品中的还原糖与斐林试剂中的酒石酸钾钠铜络合物反应,生成红色的氧化亚铜沉淀;
高锰酸钾滴定法:
样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
本法为国家标准方法(GB5009.7-85),适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。准确度和重现性均优于直接滴定法。
⑵ 还原糖测定方法
糖果—还原糖的测定—直接滴定法
2 原理
样品经除去蛋白质后,在加热条件下,直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液,以次甲基蓝作指示剂,根据样品液消耗体积,计算还原糖量。
3 试剂
3.1 碱性酒石酸铜甲液
称取15g硫酸铜(CuSO4•5H2O)及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000mL。
3.2 碱性酒石酸铜乙液
称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3.3 乙酸锌溶液
称取21.9g乙酸锌,加3mL冰乙酸,加水溶解并稀释至100mL。
3.4 亚铁氰化钾溶液(10.6+89.4)
称取10.6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100mL。
3.5 葡萄糖标准溶液(1mg/mL)
精密称取1.000g经过98~100℃干燥至恒量的纯葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸,并以水稀释至1000mL。此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。
3.6 盐酸
4 仪器
4.1 实验室常规仪器和设备
4.2 古氏坩埚或G4垂融坩埚
5 操作步骤
5.1 样品处理
将样品捣碎混匀待用,样品应避免暴露在空气和阳光下,并尽可能迅速地进行分析。
称取约2.5~5g样品,置于250mL容量瓶中,加50 mL水,摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液5mL及亚铁氰化钾溶液(10.6+89.4)5mL,加水至刻度,混匀。静置30min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。
5.2 标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液,控制在2min内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算每10mL(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。
5.3 样品溶液预测
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,控制在2min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加样品溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每两秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积。
5.4 样品溶液测定 1
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加比预测体积少1mL的样品溶液,使在2min内加热至沸,趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定,直至蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积。
6 结果计算
按下式计算糖果中还原糖的含量: 100100025021×××=VmmX
式中:X—样品中还原糖的含量(以葡萄糖计),%;
m1—10mL碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各5mL)相当于还原糖(以葡萄糖计)的质量,mg;
m2—样品质量,g;
V—测定时平均消耗样品溶液体积,mL。
7 精密度
同一样品两次平行测定值相对差不得超过15%。
⑶ 还原糖的测定方法
测定方法有很多,比较经典的是“直接滴定法”。主要步骤为试样制备、碱性酒石酸铜溶液的标定、试样溶液预测、试样溶液测定和分析结果计算。其中试样溶液是先预测后测定,共做了两次滴定。
试样溶液预测是用瓶口分配器移取碱性酒石酸铜甲液5.0mL和碱性酒石酸铜乙液5.0mL于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒~4粒,控制在2min内加热至沸,保持沸腾。
从opus电子滴定器中滴加试样溶液,先用滴定模式进行快速滴定,待溶液颜色变浅时,用半滴模式以半滴/秒的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录显示屏上的数值即为样品溶液消耗体积为V。
设置体积为V-1mL并按滴定键完成加液,控制在2min内加热至沸,再用半滴模式以半滴/秒的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录显示屏上的数值即为样品溶液消耗体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积。
⑷ 还原糖的测定方法
还原糖的测定方法如下:
⑸ 还原糖的测定方法
还原糖的测定方法如下:
检验还原糖的原理是:还原糖中的醛基(-CHO)在加热条件下能将Cu(OH)2中的铜离子还原成亚铜离子,从而生成砖红色的Cu2O沉淀物。
化学反应式:CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2--加热→CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O。
单糖和双糖中,除了蔗糖(二糖)外,都是还原性糖.三糖以上一般都是非还原性糖。
高中化学糖类很多,葡萄糖,果糖,蔗糖,麦芽糖,淀粉,纤维素等,高考常考的还原性有葡萄糖和麦芽糖,可以连在一起读:葡萄牙糖!葡萄牙糖!葡萄牙糖!就是葡萄糖和麦芽糖。
有机物鉴定中颜色变化
苏丹Ⅲ遇脂肪,颜色变化为橘黄。
砖红沉淀何时显?斐林试剂把糖①验。
蛋白质类双缩脲,紫色络合无处藏。
二苯胺DNA,染成蓝色才正常。
(注:①糖指可溶性还原糖)