基因消除的方法有哪些

㈠ 验证基因敲除

1、提取转基因小鼠的RNA，以反转录后的cDNA为模板进行基因A的PCR。
2、对照实验：提取非转基因（野生型）小鼠的RNA，以反转录后的cDNA为模板进行基因A的PCR。
3、如果对照组能通过PCR获得基因A或基因A的保守区，而实验组无结果，说明在转基因小鼠中发生了基因A的缺失。

㈡ 实验室做基因敲除一般用什么方法

实验室做基因敲除一般用什么方法
本质上没区别，质粒上应该选择更多一些，比如要敲除的基因内部如果有相同酶切位点的，直接用这个酶切后连接即得到此基因部分缺失的突变，在质粒上也很方便做点突变，厚百上的好多试剂盒都可以做好几个点的突变！厚百提供试剂、耗材等全面实验室用品及实验技术服务，科研整体服务。
基因敲除是将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术。去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等。广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除。常用同源重组的方法。敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。

㈢ 基因敲除方法的比较

基因敲除方法主要就是利用胚胎发育或建立体外模型两种，胚胎发育是比较成熟的方法。

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立，而最成熟的实验动物是小鼠，对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。

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㈣ 基因敲降的方法

基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因的插入突变和iRNA ，它们同样可以达到基因敲除的目的。

二.实现基因敲除的多种原理和方法：

1.利用基因同源重组进行基因敲除

基因敲除是80年代后半期应用DNA 同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。直到现在，运用基因同源重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法。

㈤ 基因敲除小鼠的原理和方法

基因敲除小鼠的原理是利用胚胎对基因进行改造，其方法就是胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养。

Cre/loxP重组酶系统，指的是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心，在新型基因打靶中获得广泛应用，是由Sternberg和Hamilton提出。

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㈥ 基因敲除，怎么做最简单

基因敲除没有什么最简单的方法，都是利用胚胎发育来进行基因敲除的。

基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性，是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。

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㈦ 基因敲出，基因沉默的方法有哪些

基因敲除是指利用各种手段使某个基因不再表达，常见的方法是在基因的转录区插入一段外源DNA序列，从而破坏该基因的表达；RNA干扰是指一类小RNA可以与目的基因配对结合，从而使正常的基因表达受到干扰；基因沉默是指位于有些基因座的基因其表达不活跃甚至不表达的现象。

㈧ 细菌的基因敲除怎么做

传统细菌基因敲除基于细菌中广泛存在RecBCD系统，外源DNA片段（主要是自杀质粒）通过电转化或接合方式进入受体菌与基因组同源片段进行重组，实现基因的插入突变与缺失突变。另一种为利用来源于λ噬菌体的重组系统提供的重组酶，实现电转入的DNA片段（PCR产物）与基因组同源片段的替换，该种技术目前仅能在大肠杆菌以及邻近种中实现。由于细菌存在多样化的限制修饰系统，CRISPR-Cas在细菌中并不好用。广州诺晶生物可实现广泛范围内的细菌的基因敲除，服务周期短，成功率高。