① 什么是离心技术
离心机温度制冷
当转子高速旋转时,空气摩擦生热,转子温度会上升,试管中的样品温度也会升高。由于生物学样品对温度敏感。一般要求离心实验中温度保持4℃。没有电脑控制的智能化技术,是不可能做到±1℃的精度。因此,用制冷机对离心腔冷却,而达到冷却转子、冷却样品温度的目的。但测量旋转中的转子的实际温度极为困难,国内外都采用在离心腔底部离转子较近处理设温度传感器,间接测量转子温度。这里T样品=T腔+T补偿。T补偿又与转子的类别、转速及运行时间有关。
离心机无刷电机直接驱动
离心机是由电机带转子高速旋转的。过去的电机是带碳刷的直流电机,离心机运转时碳刷磨损,带来火花与噪声甚至振动,且有寿命,届时要更换碳刷万能再行运转。更严重的是碳刷的磨损带来碳粉尘的污染,不仅污染离心机,还会污染周围环境,这种污染对卫生行业是不合适的。
离心机显示数字技术
模拟技术典型的表现形式为拧旋钮选择操作参数(如转速、温度与时间等),以表盘的指针来显示数据。其缺点为:选择参数与数据的读数值受操作人与读数人的人为干扰多,控制精度差。而且每次操作都要这样,重复性差。有的离心机虽数字显示(如旋钮选值而数字显示),虽在读数上有改进,但取值原理未变仍属模拟技术;数字显示典型的表现形式为界面友好、键盘操作、数字化显示、可编程操作的全电脑控制,其核心为智能化控制,是由电脑来实现的。离心机操作所需要一切参数(如转速、温度、时间、加减速率档等),键盘操作输入,并以数字显示出来,因此选择操作参数与读取数误差极小。又由于是可编程操作,可把一组操作参数编成号码,可存取使用。
② 浙江省高中生物有哪几种离心方法 急 明天就考试了
差速离心法、密度梯度离心法、分析性超速离心法。
差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。
收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。
以蛋白质为例:
溶液中的蛋白质在受到强大的离心作用时,如果蛋白质溶液的密度大于溶剂的密度,蛋白质分子就会下沉。
在离心场中,蛋白质分子所受到的净离心力(离心力减去浮力)与溶剂的摩擦力平衡时,每单位离心场强度定值,这个定值即为沉降系数(sedimentation coefficient)。沉降速度用每单位时间内颗粒下沉的距离来表示。
③ 离心分离的三种方式
离心分离的三种方式:差速离心、差速区带离心和等密度梯度离心。
常用的方法有3种。
具体方法如下:
1、过滤式的离心机。
2、平板式离心,采用翻盖结构,外壳的上盖可以开启,在操作过程中起到密闭的作用,可以有效隔离有毒有害物质的外漏,便于日常清洁清洗。
3、全自动刮刀下卸料离心,能够实现自动化操作,减少人工成本,还具有对物料适应性强的特点,能处理各种粒度、固体浓度范围大的物料,并能实现全自动运行。
⑤ 化学里的离心法是什么
密度梯度离心法 - 定义
密度梯度离心法 density gradient centrifugation method
〔1〕亦称平衡密度梯度离心法。用超离心机对小分子物质溶液,长时间加一个离心力场达到沉降平衡,在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液,则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降,比溶剂密度小的部分就会上浮,最后在重力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子带状物。利用这种现象,测定核酸或蛋白质等的浮游密度,或根据其差别进行分析的一种沉降平衡法。自1958年米西尔逊(M.Meselson),斯塔尔(F.W.Stahl),维诺格拉德(J.Vinograd)成功地分离了〔15N〕DNA和〔14N〕 DNA以来,该法取得许多成果。为得到必要的浓度梯度,多采用浓氯化铯溶液,所以有时也使用氯化铯浓度梯度离心法这个名称,还可采用氯化铷、溴化铯等溶液。通常利用分析超离心机,但在将细胞颗粒成分进行分离等以纯化为目的的情况,利用密度差,使用分离超离心机,采用预先制备好的蔗糖等的密度梯度。〔2〕采用蔗糖等一些小分子溶液,预先在分离超离心机的样品地内制备出密度梯度,在其上面再加上一层少量的大分子溶液后,离心,大分子就形成层状而沉降。若含有沉降系数不同的许多成分,就会出现许多层。这种情况采用适当的编排号码,取出样品池内的溶液,然后进行研究。这是与〔1〕不同的一种沉降速度法,除了以相同的目的被用于通常的沉降速度法外,在能取出分离物这点上是有优越性的。因多采用蔗糖密度梯度,所以亦称为蔗糖密度梯度离心法。按同样原理,也可使用分析超离心机进行测定。
区带离心法 - 英文名称
区带离心法zonal centrifugation method
区带离心法 - 概念解析
与历来以移动界面法来测定沉降不同,而是用密度梯度离心法来观测高分子物的层状沉降。因此对密度梯度离心法都可称为区带离心法。但最近根据密度梯度离心法,对细胞颗粒等以大量分离提纯为目的,而发明了称为区带旋转体的特殊的分离用的转动机(rotor)。狭义的区带离心法就是指此法。
密度梯度离心法 - 定义
密度梯度离心法 density gradient centrifugation method
〔1〕亦称平衡密度梯度离心法。用超离心机对小分子物质溶液,长时间加一个离心力场达到沉降平衡,在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液,则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降,比溶剂密度小的部分就会上浮,最后在重力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子带状物。利用这种现象,测定核酸或蛋白质等的浮游密度,或根据其差别进行分析的一种沉降平衡法。自1958年米西尔逊(M.Meselson),斯塔尔(F.W.Stahl),维诺格拉德(J.Vinograd)成功地分离了〔15N〕DNA和〔14N〕 DNA以来,该法取得许多成果。为得到必要的浓度梯度,多采用浓氯化铯溶液,所以有时也使用氯化铯浓度梯度离心法这个名称,还可采用氯化铷、溴化铯等溶液。通常利用分析超离心机,但在将细胞颗粒成分进行分离等以纯化为目的的情况,利用密度差,使用分离超离心机,采用预先制备好的蔗糖等的密度梯度。〔2〕采用蔗糖等一些小分子溶液,预先在分离超离心机的样品地内制备出密度梯度,在其上面再加上一层少量的大分子溶液后,离心,大分子就形成层状而沉降。若含有沉降系数不同的许多成分,就会出现许多层。这种情况采用适当的编排号码,取出样品池内的溶液,然后进行研究。这是与〔1〕不同的一种沉降速度法,除了以相同的目的被用于通常的沉降速度法外,在能取出分离物这点上是有优越性的。因多采用蔗糖密度梯度,所以亦称为蔗糖密度梯度离心法。按同样原理,也可使用分析超离心机进行测定。
⑥ 高中生物里面,什么用到了差速离心法什么用到了梯度离心法
差速离心法(离心法):交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。
梯度离心法(浓度梯度):细胞内的物质具有一定的浓度,把细胞放入清水中,细胞吸水涨破。除去细胞内的其他物质,得到细胞膜。
密度梯度区带离心法(简称区带离心法),是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。此法的优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。此法的缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。
⑦ 生物学离心方法
1.差速离心(differential centrifugation)
依据实际物系特点(目的物和其他组分性质和相互作用等)、分离目的和分离所需程度,调整离心力和时间,使得不同组分得以分离。
2.区带离心(zonal centrifugation)
区带离心又分为:差速区带离心和平衡区带离心.
其中
差速区带离心:物质密度大于密度梯度最大密度
平衡区带离心:物质密度小于密度梯度最大密度
具体例子记得学分离工程的时候课本上好像有,记不太清了,希望能帮到你。
⑧ 高中生物里面,什么用到了差速离心法什么用到了梯度离心法
差速离心法(离心法):交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。
梯度离心法(浓度梯度):细胞内的物质具有一定的浓度,把细胞放入清水中,细胞吸水涨破。除去细胞内的其他物质,得到细胞膜。
密度梯度区带离心法(简称区带离心法),是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。此法的优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。此法的缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。
⑨ 差速离心法和密度梯度离心法的区别
一、密度梯度离心法和差速离心法的区别
1.
差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离,密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的。
2.
差速离心用两个甚至更多的转速,而密度梯度离心只用一个离心转速。
3.
差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大的组分,而密度梯度离心的物质是密度有一定差异的。
二、差速离心法
差速离心法是交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。
1.
沉降系数
使用离心法时,大分子沉降速度的量度,等于每单位离心场的速度。或
s=v/ω2r,s
是沉降系数,
ω
是离心转子的角速度(弧度
/
秒),
r
是到旋转中心的距离,
v
是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示,并且通常为
1
~
200×10-13
秒范围,
10-13
这个因子叫做沉降单位
S
,即
1S=10-13 秒,如血红蛋白的沉降系数约为
4×10
-13
秒或
4S
。大多数蛋白质和核酸的沉降系数在
4S
和
40S
之间,核糖体及其亚基在
30S
和
80S
之间,多核糖体在
100S
以上。
2.
差速离心法的优缺点
差速离心法的优点是样品的处理量较大,可用于大量样品的初分离。其缺点是分离复杂样品和要求分离纯度较高时,离心次数多,操作繁杂。由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀,容易引起中间损失,所以离心分辨力差。实际分离时由于离心时的对流、扩散和收取沉淀时的污染,对于一些沉降系数相差不大的组分无法进行完全的分离提纯。产品的纯度和回收率都达不到上述理论值。因此差速离心法主要用于大量样品的初步分离提纯。
三、密度梯度离心法
密度梯度离心法又称为区带离心法,是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。
1.
分类
(
1
)差速区带离心法:分离密度相差不大、重量和大小区分较大的样品。
将样品置于平缓的预先制好的密度梯度介质上,进行离心,较大的颗粒将比较小的颗粒更快地沉降。通过梯度介质,形成几个明显的区带(条带)。这种方法有时间限制,在任一区带到达管底之前必须停止离心。大小相同、密度不同的颗粒(如溶酶体、线粒体和过氧化物酶体)不能用本法分离。
(
2
)等密度区带离心法:用于样品颗粒的浮力密度差,密度差越大的样品分离效果越好,与颗粒大小和形状无关。离心管中预先放置好梯度介质,样品加在梯度液面上,或样品预先与梯度介质溶液混合后装入离心管,通过离心形成梯度。离心时,样品的不同颗粒向上浮起,一直移动到与它们的密度相等的等密度点的特定梯度位置上,形成几条不同的区带,这就是等密度离心法。离心所需时间以最小颗粒到达等密度点(即平衡点)的时间为基准,有时长达数日。
等密度区带离心法所用的梯度介质通常为氯化铯
C
S
Cl
,其密度可达
1.7
g/cm3 。此法可分离核酸、亚细胞器等,也可以分离复合蛋白质,但简单蛋白质不适用。
2.
密度梯度离心法的优缺点
优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性。
缺点是:①离心时间较长;②需要制备惰性梯度介质溶液;③操作严格,不易掌握。
⑩ 高中生物实验哪些用到差速离心法,哪些用到梯度离心法。
1、差速离心法:
分离不同密度的结构的实验用到差速离心法,如线粒体、叶绿体等。差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。
2、梯度离心法:
分离核酸、蛋白质、核糖体亚基的实验用到梯度离心法。密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度。
(10)常用的离心方法有哪些扩展阅读
差速离心法原理:
物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得: F=Mω2r 或者 F=V.D.ω2r (1) 上述表明:被离心物质所受到的离心力与该物质的质量、体积、密度、离心角速度以及旋转半径呈正比关系。
离心力越大,被离心物质沉降得越快。 在离心过程中,被离心物质还要克服浮力和摩擦力的阻碍作用。
梯度离心法原理:
不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。