1. 可以通过什么办法防止限制性内切核酸酶切割后的dna自身环化
Ⅰ（1）质粒分子经SmaⅠ切割前，为环状DNA，无游离磷酸基团；切割后，会断裂2个脱氧核苷酸（CG）之间的磷酸二酯键，露出2个游离磷酸基团．（2）插入的SmaⅠ酶切位点越多，碱基对CG越多，氢键越多，故质粒的热稳定性越高．（3）只使用EcoRI，质粒、外源DNA自身都只含有1对互补黏性末端，自身会发生连接成为环状DNA，不利目的基因导入．故使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，各自会有不同黏性末端，能防止自身环化．Ⅱ．原核生物（如大肠杆菌）是基因工程中较理想的受体细胞，具有一些其他生物没有的特点：①繁殖快，能大量快速复制DNA；②多为单细胞，结构简单，容易操作；③遗传物质相对较少，不易对目的基因干扰．大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用Ca2+处理细胞，使之成为感受态细胞，然后完成转化．Ⅲ．植物基因工程中将目的基因导入受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法．且一般将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中形成重组Ti质粒，这样可将目的基因整合到受体细胞的染色体上．移植入的目的基因为单个，故转基因植株一般为杂合子．要避免基因污染，一般需将目的基因导入植物细胞的细胞质（线粒体、叶绿体），不会随着花粉进行基因污染．故答案为：Ⅰ．（1）0 2 （2）高 （3）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化Ⅱ．③遗传物质相对较少 Ca2+ 感受态Ⅲ．农杆菌转化法 T-DNA 杂合 细胞质（线粒体、叶绿体）
2. 在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用
这个要看你是具体如何克隆的
如果你使用的是酶切连接，选择不同黏末端的酶一般不会发生自身环化
如果是平端连接，则需要对载体去磷，也就是碱性磷酸酶处理。此时需要注意你的插入片段两边要有磷酸基团（可以引物合成时添加，也可设计平端的酶如EcoRV自己回来切），否则是连不上的。
3. 都有哪几种方法避免载体质粒的自环化
找切割位点时，让两端的黏性末端不同，我只知一种。帮你查过
具体可采用以下方法：
（1）用碱性磷酸酶处理限制酶酶解产生的线性载体分子。碱性磷酸酶可除去线性载体DNA 分子的5¹-磷酸，而留下3¹-羟基基团。经过碱性磷酸酶处理的线性载体分子，除非插入外源DNA 片段，否则就不能重新环化为有功能的载体分子。
（2）采用同聚物加尾连接技术，可自动防止线性载体DNA 分子的自身环化作用，这是因为切割后形成的线性DNA 分子的两个3¹-OH末端，此时都已被加上具有同样碱基结构的同聚物尾巴。
（3）应用柯斯质粒，也可防止质粒DNA 分子发生自身环化作用。需要指出的是，在连接反应中，正确配加载体DNA 与外源DNA 间的比例，是高效获得重组体的一个重要因素。在应用λ噬菌体或柯斯质粒作载体时，如果配置高比值的载体DNA /外源DNA 的连接反应体系，就有利于重组体分子的形成；在应用质粒作载体时，因为其重组体分子是由一个载体分子和一个外源DNA 片段环化而成的，所以当载体DNA 与外源DNA 的比例为1时，最有利于重组体分子的形成。
4. 生物如何防止质粒自身环化
会的，因此用不同的限制性内切酶，和粘性末端可以防止自身环接，我记得做过这样的题
5. 为防止载体与目的基因自身环化
不矛盾,用同一种限制酶目的是让运载体的末端和目的基因的末端互补.所以为了防止环化,需要对运载体加以修饰改造,使运载体的两个末端也不相同并且都刚好与目的基因的末端互补.
6. 基因工程中如何避免载体的自我环化和目的基因的双向插入
双酶切。
在基因两端分别用不同的内切酶来酶切，载体上也用这两种酶来酶切。这样自己的酶切位点只能识别自己的位点，就不会发生基因方向的错误了。而且载体的两个位点互相不识别，也不会自连接。
7. 基因工程中如何避免载体的自我环化和目的基因的双向
避免自我环化可以考虑使用双酶切位点和加CIAP处理
目的基因避免双向接入的话通过设计双酶切位点就能完美避开
8. 为避免自身环化可用什么法链接
上保护基。自身环化也是因为官能团作用，将其中的官能团保护起来，它的这种作用力会改变，性质也相应会改变。但是不影响其他基团的作用。
9. 基因工程里面有个自身环化。 1.什么东西自身环化 2.如何防止自身环化
就是切下的DNA片段、两端碱基相同、刚好可以配对而连接成环状DNA。两端用不同的限制酶便可防止！！