兔瘟疫苗抗体效价检测方法

‘壹’ 养殖兔子需要接种疫苗，到底有哪些呢

兔子需要打疫苗，比如兔瘟疫苗，在兔子45天龄左右就可以带它打疫苗了，不过先确保它的身体健康。兔子可以不打狂犬疫苗，即使人被兔子抓伤咬伤，感染狂犬病的几率也很低，一般消毒一下伤口即可。兔子和猫狗一样，也需要打疫苗，比如兔瘟疫苗。一般兔子在45天龄左右就可以进行第一次疫苗注射了。和猫狗一样，兔子打疫苗时也需要确保身体健康。如果带生病的兔子打疫苗，兔子可能会出现生命危险。

兔子

打疫苗产生抗体的原理就是让兔子得一次可以自愈的小病继而产生对应的抗体。如果兔子处于生病的状态，身体的抵抗力本身就处于很薄弱的情形，兔子的身体状态也很差，此时打疫苗无异于雪上加霜，极有可能导致兔子死亡或加重病情，所以在兔子生病的时候绝对不要打疫苗。

‘贰’ 抗体效价测定的方法内容

1．取小试管10支，分别标明1-10号，各管加生理盐水0.2ml，用刻度吸管吸取被检者血清0.2ml加入到第1管充分混匀，再用同一吸管从第1试管中吸出0.2ml加入到第2管，充分混匀后再吸取0.2ml加入第3管，以此倍量稀释。取第10管的0.2ml稀释液弃去。使成 1:2、1:4……。
2．然后各管再加等量含相应抗原的5%红细胞盐水悬液，振摇试管架使之混匀，置 37℃水浴中放置1h，以3000r/min离心15s，观察凝集结果并记录；对凝集强度为“1+”以下及不凝集者，用生理盐水洗涤3遍，末次吸干上清液；各加生理盐水2滴，取出每管加抗人球蛋白试剂2滴，以3000r/min离心15s，观察凝集结果并记录。出现凝集的最高稀释度的倒数为效价。例如右图表抗A血清效价测定结果为256。

‘叁’ 制备免疫血清时，为检测抗体效价，家兔最常用的采血方法是

正确答案:B
解析：制备免疫血清时，免疫家兔后，常采用耳缘静脉采血来检测家兔产生抗体的效价
。

‘肆’ 如何检测中和抗体效价

北京德元国际科技公司代做抗体效价检测，用ELISA法

‘伍’ 抗体效价怎样检查

医院测抗体一般是用ELISA方法。灵敏度很高的。
在其他地方，还有血凝抑制试验，琼脂扩散试验，抗体蛋白纯化定量，抗体活性检测等。
根据要求不同，选择不同的方法，现在医院最常用。使用方便的就是ELISA试剂盒。
原理是:在反应板上包上抗原，然后加入检测样品液(血清，组织液等，需要处理一下)，如果检测样品中有抗体，就可以与抗原结合，再加入酶标记的抗抗体，就可以和样品中抗体结合，加入显色剂，显色后，检测，通过吸光度的多少，确定抗体的含量。

‘陆’ 求助ELISA测定抗体效价方法

我用的是间接ELISA，以下自我的毕业论文：
将抗原用包被液稀释至约10 ?g/mL；分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释，稀释梯度从1：200，1：400至1：204800，二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450)，计算阳性血清与阴性血清的吸光度之比(P/N)，当P/N＜1.5时为阴性，当P/N≥1.5而＜2.1为可疑，当P/N≥2.1为阳性，将P/N≥2.1时所对应的抗体最高稀释倍数作为抗体的效价。

‘柒’ 兔子应该打什么样的疫苗

日本科学家以天花疫苗中使用的牛痘病毒为基础，研制出一种冠状病毒新型疫苗。试验表明，兔子接种该疫苗后体内产生了抗体。

据共同社9日报道，这种疫苗是由日本东京都临床医学综合研究所和北海道大学的研究人员共同开发的。研究小组在牛痘病毒中植入非典冠状病毒基因，用这种疫苗给兔子接种，然后定期回收兔子血清，观察兔子体内是否产生了针对冠状病毒的抗体。结果表明，接种一周后兔子体内就产生了抗体，接种三周后兔子体内抗体的含量达到一周时的4倍以上。

研究人员下一步打算改良试验，使牛痘病毒更加安全。但这种疫苗对人类是否有效还有待检验，与实际应用尚有距离。

‘捌’ 如何正确使用兔瘟疫苗

垂耳兔(详情介绍)

人工饲养宠物兔，让兔兔健健康康的是每个主人都希望的，和猫咪狗狗一样，兔兔也需要定期注射疫苗来预防一些传染性疾病。那么对于兔兔来说最重要的兔瘟疫苗应该如何正确使用呢？

1、首先对兔群进行单苗预防注射，然后在可能的情况下，再考虑是否使用其它联苗，应用兔瘟单苗一年应不少于2次。

2、为确保母兔给予仔兔的母源抗体，应在母兔怀孕前接种一次疫苗，母兔怀孕后期不能接种以防止流产、畸胎和死胎。

3、仔兔断奶一般在45日龄左右，现在接种疫苗，大多在断奶前后，由于仔兔在30－45日龄时正好处在免疫空缺期，因此在断奶前30日龄左右时，应进行首次免疫接种，接种后一个月，再加强免疫一次；如在20－25日龄断奶，由于仔兔不能继续从母乳中获得母源抗体，因此应在断奶同时或稍前些接种疫苗；如母兔产仔数较多，母乳不足而进行人工哺乳的仔兔，也应在20日龄左右接种一次疫苗。

4、发生兔瘟后，可使用兔瘟高免血清治疗，每只皮下注射2－4毫升，10天后再注射兔瘟苗，紧急接种，一般3天后产生抗体，从而达到控制疾病的目的。

5、疫苗使用前应仔细检查瓶口是否破裂、瓶内是否有霉斑异物和凝结物。如出现以上情况，不能再使用。

‘玖’ 抗体效价的检测方法

多采免疫双向扩散法
【基本原理】
*指抗原和抗体在同一凝胶内都扩散，彼此相遇后形成特异性的沉淀线。
-将抗原与抗体分别加入同一凝胶板中两个相隔一定间距的小孔内，使两者进行相互扩散，当抗原抗体浓度之比相适宜时，彼此相遇形成一白色弧状沉淀线。
*优缺点：简便，但敏感性较低，易出现假阴性结果。
免疫双向扩散法的操作步骤
*将玻璃板用水洗净后用75%乙醇冲洗，晾干后放在水平台上备用。
*将1%agar 融化后，置56℃水浴。
*在玻璃板上铺胶，约1.5mm 厚，凝固后打孔(直径 3rnm)，孔间距10mm。
l 抗血清(抗体预先作系列倍比稀释即ml 抗原样品，周围孔内每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。
*凝胶板置湿盒内，室温扩散24h。
*观察结果。
凝聚胺法测定孕妇血清IgG抗-A（抗-B）效价的方法待检血清与0.2 mol/L 2?硫基乙醇(2?Me)在试管内等量混合，放入37℃水浴1 h以破坏血清中的IgM抗体，吸取处理后的血清用生理盐水倍比稀释，稀释度分别为2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024，然后每管加入相应的3%～5%红细胞悬液，置37℃水浴30 min，观察是否凝集，不凝集者用生理盐水洗涤3次，然后加入低离子盐水介质(LIM液)，混匀，滴入2滴凝聚胺，混匀后3 000 r/min离心30 s，扣摇肉眼可见明显的凝集(无凝集者须重做)，再加入2滴重悬液，轻摇，观察凝集是否消失，凝集1 min内不消失者表示受检者血清中含有IgG型抗?A(抗?B)。
抗体效价检测的其它方法
*环状沉淀试验，需较多的抗血清，现已很少用；
*对流免疫电泳，比琼脂免疫双扩散法敏感，较简便、实用；
*酶联免疫吸附试验 (ELISA)。
通常抗体效价低于1：128是没有问题的，有些孕妇高达1：256以上，而且抗体效价最好1个月查上一次，有时候会有所变化。