谷胱甘肽检测方法

‘壹’ 氨基酸显色方法

1、使用茚三酮试剂，喷后110oC加热显出颜色。用茚三酮剂显色后用硝酸酮试剂喷，斑点由兰紫色转成红色。

2、使用茚三酮+硝酸酮试剂，喷后在电炉上烤至刚刚显色，颜色在日光灯中逐渐加深，某些氨基酸首先显出颜色，用笔立刻将色点记下，许多氨基酸赕出特殊的颜色，不同的氨基酸显出的速度也有差别。

3、使用2—萘醌—4—磺酸试剂（Folin试剂），喷后在室温干燥，不同的氨基产生各种颜色。

4．使用氯气—联甲苯胺试剂。也可以使氨基酸显色。

(1)谷胱甘肽检测方法扩展阅读；

常用的显色反应

双缩脲反应：

该反应是肽键常用的反应，即在碱性铜溶液中， 肽键与铜离子形成络合物，呈紫色(在540nm有最大光吸收峰)。

酚试剂法：

该反应是比色法测定蛋白质的常用方法，即蛋白 质以碱性铜溶液处理后,加用酚试剂,呈蓝色(在650nm有最大光吸收峰)。

考马斯亮蓝法： 即蛋白质与一种蛋白质染料考马斯亮蓝g250反应形成复合物，该复合物在595nm有最大光吸收峰。ms蛋白质遇硝酸也显色为黄色，不过这样蛋白质就变性了。

茚三酮反应：除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应生成黄色物质外，所有的α?氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。

还有坂口反应 。在次溴酸钠或次氯酸钠存在的条件下，许多含有胍基的化合物 (如胍乙酸、甲胍、胍基丁胺等)能与α-萘酚发生反应生成红色物质。

‘贰’ 基因甲基化检测、甲基化PCR 的原理是什么

一种全新的DNA甲基化研究方法——Pyrosequencing技术

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。

CpG双核苷酸在人类基因组中的分布很不均一，而在基因组的某些区段，CpG保持或高于正常概率，这些区段被称作CpG岛。CpG岛主要位于基因的启动子和第一外显子区域，约有60％以上基因的启动子含有CpG岛。 CpG甲基化的研究在肿瘤的研究中有着非常主要的地位。通过基因启动子区及附近区域CpG岛胞嘧啶的甲基化可以在转录水平调节基因的表达，从而引起相应基因沉默，去甲基化又可恢复其表达。DNA甲基化在生理情况下就参与了控制基因的时空表达，在肿瘤发生时，肿瘤细胞全基因组低甲基化是一个重要特征。肿瘤细胞基因组甲基化的程度与正常细胞相比仅为20-60% , 同时伴有局部区域基因的高甲基化,包括肿瘤抑制基因、抑制肿瘤转移和浸润的基因、细胞周期调节基因、DNA修复基因、血管形成抑制基因等。但是目前研究手段的局限，限制了DNA甲基化的广泛研究。

近年来，研究者不断探索定性及定量检测单个或多个甲基化位点的方法，但由于甲基化多态性区域存在的密度很高，所以对于延伸反应其引物的位置很难设计。Pyrosequencing技术作为一种新的序列分析技术，能够快速地检测甲基化的频率，对样品中的甲基化位点进行定性及定量检测，为甲基化研究提供了新的途径。

从原理上来看，Pyrosequencing是一种通过合成方法进行序列分析的方法，它通过核苷酸和模板结合后释放的焦磷酸引发酶级联反应，促使荧光素发光并进行检测。这项技术曾经被用作单核苷酸多态性（SNP）的基因型和单倍型的检测，以及细菌和病毒的鉴定和分型研究。这项技术的一个主要特点是在Pyrogarm™软件上显示的峰值高度来自于序列分析的原始数据，通过峰值的高度可以精确的检测混合DNA模板中等位基因的频率。

目前甲基化研究方面，很多甲基化定量分析的报道采用亚硫酸氢盐处理甲基化样本，并用混合的PCR产物
作为校正。其主要原理是：亚硫酸氢盐可以将没有甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而在适当的实验条件下甲基化的胞嘧啶保持不变。因而，用它处理样本后，再进行PCR扩增，甲基化的位点可以被当作一个C/T的SNP来处理，它的基因频率为0－100％。在此，我们给大家介绍一个研究人员使用Pyrosequencing技术分析并精确定量DNA甲基化水平的例子。

研究者在一个Pyrosequencing反应中同时检测了6个甲基化位点。这种方法同样可以用于石蜡包埋的组织，并且具有较高的重复性和精确性。实验选择谷胱甘肽-S-转移酶π（GSTP1）转录启动位点的CpG岛进行检测。这些位点在正常前列腺组织中是非甲基化的，而在肿瘤样本中高甲基化。通过PCR扩增一个包含17个甲基化多态位点140bp的片段，并用4个测序引物研究其中15个位点（Table 1）。使用在线的SNP测序引物设计软件（Pyrosequencing AB）设计测序引物，其中一些甲基化多态性位点用最可能的碱基所代替，以减少计算的数量。再通过人工检测测序引物可能存在的错配。此外，同时在PSQ 96MA DNA分析仪上运行空白对照，扣除由测序引物、生物素标记的引物或是模板引起的背景。

PCR引物设计完全与模板相匹配，不覆盖任何甲基化多态性区域。使用10ng亚硫酸氢盐转化的DNA样本或是10 fmol纯化的PCR产物，10 pmol 正向（5’-GTGATTTAGTATTGG-3’）和反向（5’-biotin-AACTCTAAACCCCATC-3’）引物扩增GSTP1转录启动位点的基因片段，扩增片段长度为144bp。反应体系为60 mM Tris-SO4, pH 8.9, 18 mM (NH4)2SO4, 1 mM MgSO4, 200 μM dNTPs，以及3 U Platinum Taq DNA高保真聚合酶，终体积为50μL。PCR循环设置：首先在95℃下变性4分钟，然后在95℃ 30S，50℃ 45S以及72℃ 20S条件下重复50个循环，最后一步延伸步骤在72℃下4分钟，中止反应。PCR反应在Eppendorf的Mastercycler 96

哺乳动物基因组中，DNA甲基化是指CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化. DNA甲基化是一种基因外修饰，不改变DNA的一级结构; 他在细胞正常发育、基因表达模式以及基因组稳定性中起着至关重要的作用. 全基因组低甲基化，维持甲基化模式酶的调节失控和正常非甲基化CpG岛的高甲基化是人类肿瘤中普遍存在的现象. DNA高甲基化是导致抑癌基因失活的又一个机制.

‘叁’ GSH-Px是什么什么意思有什么作用

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)可以清除由活性氧和•OH诱发的脂质过氧化物，保护细胞膜结构和功能的完整性
体内GSH-Px活性的检测采用DTNB显色法。

‘肆’ 谁知道测DNA甲基化的方法

http://www.ebiotrade.com/emgzf/genenews200404/gene5.htm您自己看吧！好多图片粘贴不过来，还不如你自己看。

一种全新的DNA甲基化研究方法——Pyrosequencing技术

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。

CpG双核苷酸在人类基因组中的分布很不均一，而在基因组的某些区段，CpG保持或高于正常概率，这些区段被称作CpG岛。CpG岛主要位于基因的启动子和第一外显子区域，约有60％以上基因的启动子含有CpG岛。 CpG甲基化的研究在肿瘤的研究中有着非常主要的地位。通过基因启动子区及附近区域CpG岛胞嘧啶的甲基化可以在转录水平调节基因的表达，从而引起相应基因沉默，去甲基化又可恢复其表达。DNA甲基化在生理情况下就参与了控制基因的时空表达，在肿瘤发生时，肿瘤细胞全基因组低甲基化是一个重要特征。肿瘤细胞基因组甲基化的程度与正常细胞相比仅为20-60% , 同时伴有局部区域基因的高甲基化,包括肿瘤抑制基因、抑制肿瘤转移和浸润的基因、细胞周期调节基因、DNA修复基因、血管形成抑制基因等。但是目前研究手段的局限，限制了DNA甲基化的广泛研究。

近年来，研究者不断探索定性及定量检测单个或多个甲基化位点的方法，但由于甲基化多态性区域存在的密度很高，所以对于延伸反应其引物的位置很难设计。Pyrosequencing技术作为一种新的序列分析技术，能够快速地检测甲基化的频率，对样品中的甲基化位点进行定性及定量检测，为甲基化研究提供了新的途径。

从原理上来看，Pyrosequencing是一种通过合成方法进行序列分析的方法，它通过核苷酸和模板结合后释放的焦磷酸引发酶级联反应，促使荧光素发光并进行检测。这项技术曾经被用作单核苷酸多态性（SNP）的基因型和单倍型的检测，以及细菌和病毒的鉴定和分型研究。这项技术的一个主要特点是在Pyrogarm™软件上显示的峰值高度来自于序列分析的原始数据，通过峰值的高度可以精确的检测混合DNA模板中等位基因的频率。

目前甲基化研究方面，很多甲基化定量分析的报道采用亚硫酸氢盐处理甲基化样本，并用混合的PCR产物
作为校正。其主要原理是：亚硫酸氢盐可以将没有甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而在适当的实验条件下甲基化的胞嘧啶保持不变。因而，用它处理样本后，再进行PCR扩增，甲基化的位点可以被当作一个C/T的SNP来处理，它的基因频率为0－100％。在此，我们给大家介绍一个研究人员使用Pyrosequencing技术分析并精确定量DNA甲基化水平的例子。

研究者在一个Pyrosequencing反应中同时检测了6个甲基化位点。这种方法同样可以用于石蜡包埋的组织，并且具有较高的重复性和精确性。实验选择谷胱甘肽-S-转移酶π（GSTP1）转录启动位点的CpG岛进行检测。这些位点在正常前列腺组织中是非甲基化的，而在肿瘤样本中高甲基化。通过PCR扩增一个包含17个甲基化多态位点140bp的片段，并用4个测序引物研究其中15个位点（Table 1）。使用在线的SNP测序引物设计软件（Pyrosequencing AB）设计测序引物，其中一些甲基化多态性位点用最可能的碱基所代替，以减少计算的数量。再通过人工检测测序引物可能存在的错配。此外，同时在PSQ 96MA DNA分析仪上运行空白对照，扣除由测序引物、生物素标记的引物或是模板引起的背景。

PCR引物设计完全与模板相匹配，不覆盖任何甲基化多态性区域。使用10ng亚硫酸氢盐转化的DNA样本或是10 fmol纯化的PCR产物，10 pmol 正向（5’-GTGATTTAGTATTGG-3’）和反向（5’-biotin-AACTCTAAACCCCATC-3’）引物扩增GSTP1转录启动位点的基因片段，扩增片段长度为144bp。反应体系为60 mM Tris-SO4, pH 8.9, 18 mM (NH4)2SO4, 1 mM MgSO4, 200 μM dNTPs，以及3 U Platinum Taq DNA高保真聚合酶，终体积为50μL。PCR循环设置：首先在95℃下变性4分钟，然后在95℃ 30S，50℃ 45S以及72℃ 20S条件下重复50个循环，最后一步延伸步骤在72℃下4分钟，中止反应。PCR反应在Eppendorf的Mastercycler 96

哺乳动物基因组中，DNA甲基化是指CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化. DNA甲基化是一种基因外修饰，不改变DNA的一级结构; 他在细胞正常发育、基因表达模式以及基因组稳定性中起着至关重要的作用. 全基因组低甲基化，维持甲基化模式酶的调节失控和正常非甲基化CpG岛的高甲基化是人类肿瘤中普遍存在的现象. DNA高甲基化是导致抑癌基因失活的又一个机制.
http://www.wjgnet.com/1009-3079/abstract_cn.asp?f=1420&v=11

‘伍’ 为什么要做同型半胱氨酸检测

为什么要做同型半胱氨酸检测？同型半胱氨酸是人体内合成的一种蛋白质，在理想状态下其在血液中的含量很低。

如果身体不处于最佳最佳营养状态，血液中的同型半胱氨酸将会蓄积，增加患病风险，相关疾病50多种。

同型半胱氨酸由蛋氨酸转化而成。

人体可以通过一定途径把它转化成两种有益物质之一：

一种是谷胱甘肽，是体内重要的抗氧化剂，另一种是甲基供体，是对大脑和身体有益的“智力”营养素。

如果饮食中所含的B族维生素不处于最佳量，那么催化同型半胱氨酸转化为上述两种物质的酶就无法正常工作，体内同型半胱氨酸无法转化，在血液不断积累。

同型半胱氨酸在血液中积累，患心脏病、中风、癌症、糖尿病、抑郁症、早老性痴呆症等各类疾病可能性不断提高，相关疾病50多种。

延长健康寿命的最佳方法之一就是降低同型半胱氨酸的水平。目标是降到6个单位以下。

要将同型半胱氨酸水平保持在6个单位以下，最有效快捷的途径是补充可降低同型半胱氨酸水平的营养素，包括维生素B2、维生素B6、维生素B12、叶酸和锌。

‘陆’ 谷胱甘肽的检测标准

Glutathionum
C10H17N3O6S Mr:307.3
DEFINITION
谷胱甘肽
定义描述
L－r谷氨酰基－L－半胱氨酰基甘氨酸
含量：按干燥品计算，98.0%-101.0%
性状
外观性状：白色或几乎白色结晶性粉末或无色的结晶。
溶解度：易溶于水，微溶于96%乙醇及二氯甲烷。
鉴别
A 比旋度符合特定的光学旋转测定（见测定项）。
B 红外吸收光谱检测（2.2.24)
对比：谷胱甘肽CRS.
测定
溶液S：取该品5.0g，蒸馏水R溶解并稀释至50ml。
溶液澄清度溶液S澄清（2.2.1），无色（2.2.2,Method II)
比旋度（2.2.7）－15.5～－17.5（干品物质）
取该品1.0g，蒸馏水R溶解并稀释至25.0ml。
有关物质采用毛细管电泳法（2.2.47)
溶液应临用前新鲜配制
毛细管
-材料：石英（未涂层）
-尺寸：有效长度0.5m，总长：0.6m，内径75 μm
温度：25℃
电解质溶液：取无水磷酸二氢钠R1.50g，加水R230.0ml，用磷酸R调节PH值为1.80。加水R稀释至150.0ml，检测PH值，如有必要，用磷酸R或氢氧化钠溶液R调节PH值。
检测：采用分光光度计在200 nm处检测
新毛细管的预处理：在首次进样前在压力138Kpa下用0.1mol/L盐酸溶液前冲洗毛细管20min，138Kpa压力下用水R冲洗10分钟已达到全平衡状态，用电解质溶液在350kpa条件下冲洗40min，在电压20kv条件下保持60min。
预处理的毛细管：138 kPa压力下，用电解质溶液冲洗毛细管40min；
批间冲洗：138 kPa压力下，依次用水R冲洗毛细管1min，0.1mol/L氢氧化钠溶液冲洗2min；水R冲洗1min，0.1mol/L盐酸溶液冲洗3min，最后用电解质溶液冲洗10min；
进样：3.45 kPa压力下维持5s；注入电解质溶液（空白溶液），对照溶液（b）、（c）和供试溶液a、b
迁移：电压为20KV
运行时间：45min
相对迁移率：相对于内标物质（约14min）
杂质A=约0.77
杂质B=约1.04；杂质E=约1.2
杂质C=约1.26；杂质D=约1.3
系统适用性
分辨率：内标物质产生的峰与对照溶液C中那个杂质B产生的峰之间最低为1.5，如有必要，使用稀氢氧化钠溶液上调PH值
峰-谷比：最低位2.5.其中：HP=杂质D产生的基线峰以上的高度
HV=对照溶液中谷胱甘肽产生的峰的分离曲线的最低点以上的高度
如有必要采用磷酸下调PH。
电泳法测定以上项目，供试溶液a在与内标物质在相同的迁移时间里没有出现峰（可用苯丙氨酸峰进行校正）
限度供试溶液B
校正面积：相对迁移时间除以所有峰面积之和
校正因子：
杂质A、B、E：
氯化物不得大于200ppm
取溶液S2.5ml，加水R稀释至15ml。
硫酸盐不得大于300ppm
取溶液S2.5ml，加蒸馏水R稀释至15ml
铵盐不得超过200ppm
铁不得超过10ppm

‘柒’ 细胞凋亡的早期检测方法有哪些

1、PS（磷脂酰丝氨酸）在胞外膜分布的检测
PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS，使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白（如Annexin V-FITC）即可检测细胞凋亡。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测（悬浮细胞和贴壁细胞都适用），可与DNA染料或别的晚期检测方法相结合来标记凋亡的发展阶段。操作简便快速，10分钟就可完成检测。灵敏度高，可作为流式方法分析凋亡细胞的基础。
2、细胞内氧化还原状态改变的检测
正常状态下,谷胱甘肽（GSH）作为细胞内的一种重要的氧化还原缓冲剂。细胞内有毒的氧化物通过被GSH还原而清除，氧化型的GSH又可被GSH还原酶迅速还原。这一反应在线粒体中尤为重要，许多呼吸作用中副产物的氧化损伤将由此被消化除。在细胞膜中有可被凋亡信号启动的ATP依赖的GSH转移系统。当细胞内GSH的排除非常活跃时，细胞液就由还原环境转为氧化环境，这可能导致了凋亡早期细胞线粒体膜电位的降低，从而使细胞色素C（三羧酸循环中的重要组分）从线粒体内转移到细胞液中，启动凋亡效应器caspase的级联反应。
3、细胞色素C的检测
细胞色素C作为一种信号物质，在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况下，它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中，而不存在于胞浆内。凋亡信号刺激后可使其从线粒体释放到胞浆中，结合Apaf-1后而启动caspase级联活化反应，首先可激活caspase-9，后者再激活caspase-3和下游的其它caspase分子。凋亡发生的早期，细胞色素C泄漏到胞浆中，检测胞浆中细胞色素c的含量可反映细胞的早期凋亡。
4、线粒体膜电位变化的检测
在细胞凋亡的早期，线粒体在形态学上没有明显变化。但线粒体可发生很多生理生化的改变。例如在受到凋亡诱导后，线粒体的转膜电位发生变化，导致膜穿透性改变。MitoSensorTM是一种阳离子染色剂，对此膜电位改变非常敏感，可呈现出不同的荧光染色。正常细胞中，它在线粒体中形成聚集体，发出强烈的红色荧光。凋亡细胞中，因线粒体跨膜电位改变，它则以单体形式停留于胞浆中，发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。

‘捌’ 谷胱甘肽过氧化物酶的简介

谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的组成成分，它能催化GSH变为GSSG，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，同时促进H2O2的分解，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映机体硒水平。
谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG，而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。在上述反应中谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。

‘玖’ 抗氧化活性的实验测定方法有哪些

1、ORAC

ORAC是Oxygen Radical Absorption Capacity（氧化自由基吸收能力）的缩写，是一种测试抗氧化能力的评价方法体系。

ORAC抗氧化测试包括对：过氧化自由基（含亲水性、亲脂性）、羟基自由基、过氧亚硝基、单线态氧、超氧阴离子 这五种人体最主要的活性氧自由基进行全面的分析，能有效得出样品的抗氧化实际能力及分布情况。

ORAC抗氧化生物测试是比普通抗氧化测试的更高一层的测试方案。利用人体细胞有效测试出样品的抗氧化力（生物利用度）。

2、其他评价方法

抗氧化不仅仅是一个概念，对生物体抗氧化的效果是可以量化测定的，作为动物实验一般是服用抗氧化剂一定时间后，测定血液中的酯质过氧化产物丙二醛变化、以及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX的活力变化。

从上述两种酶和MDA的变化状况来判定抗氧化的强度及效果。作为人体不可能测肝脏匀浆，可以测定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXH-PX来判定抗氧化的效果。

3、抗油脂过氧化力测定

脂类包括的范围很广，构成生物膜的主要成分，脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化，脂类过氧化过程中会产生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH，这些产物会损伤生物细胞。因此，能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。

A硫氰酸铁法FTC：硫氰酸铁盐(FTC)比色法是基于在酸性条件下，脂质氧化形成的过氧化物可将Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+与硫氰酸根离子可形成在480-515nm内有最大吸收的红色络合物。通常用500nm处吸光值的高低表示物质抗脂质过氧化的能力，吸光值越小，表明物质的抗脂质过氧化能力越强。

B硫代巴比妥酸反应物TBARs法：是评价油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亚油酸氧化后的终产物主要是丙二醛，这些过氧化产物与硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，该有色化合物在530 nm左右有吸收。

4、清除DPPH能力的侧定

DP是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。

5、还原能力的测定

还原力的测定是检验样品是否是良好的电子供体的方法，还原力强的样品应该是良好的电子供应者，它供应的电子不仅能使Fe3+还原为Fe2+，也可以与自由基反应。还原力的测定是用来评价抗氧化剂活性的常用方法。

6、抑制 LOX酶实验

脂肪氧化酶LOX在植物中分布广泛是一种非血红素铁蛋白，分子量为90一100KD。这种酶蛋白有多个多肤链组成，含有三价铁离子金属辅基则有活性，而包含二价铁离子的金属辅基则缺乏活性。

在生物体内的主要作用是，专一催化含有顺，顺一戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸的加氧反应，生成具有共扼双键的多元不饱和脂肪酸的氢过氧化物。

在生物体内的主耍底物是甘油脂类〔如磷脂）释放的游离不饱和脂肪酸，其中动物体内的主要底物是花生四烯酸，植物体内的主要底物是亚油酸和亚麻酸，主要产物为过氧羚基型脂肪酸。

(9)谷胱甘肽检测方法扩展阅读

在机体内抗氧化活性成分发挥作用主要通过两个机制：第一是链的中断机制，主要中断自由基的链式反应，例如多酌类化合物、VE、VC等天然抗氧化物质可向自由基提供一个电子来中断链式反应。第二是促使产生自由基的催化剂失活而达到抗氧化的目的。

抗氧化物质可与超氧化物歧化酶等酶类或抗氧化物质协同构成抗氧化联合系统，增强机体的抗氧化能力，修复损伤的DNA，使体内的基因能够正常的表达。对于食品而言，食品中的抗氧化活性成分不但可以防止食品自身的腐败变质还可以生产加工为抗氧化剂。

田迪英等对41种果蔬进行了抗氧化活性的研究，发现其中大部分果蔬具有较强的抗氧化能力。谢天柱等对添加包括茶多酷在内的多种抗氧化剂的苹果酒的抗氧化能力的比较，结果发现，添加0.1%的茶多酷可提高果酒的抗氧化能力，并可有效减轻果酒的褐变程度。