乳糖检测方法

1. 如何测定乳粉中的乳糖和蔗糖含量试写出试验思路和流程

方法二 乳糖、蔗糖和总糖的测定（莱因-埃农氏法） 9 方法提要 乳糖：样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜 还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，以终点稍过量时，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基 蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 蔗糖：样品除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为具有还原能力的葡萄糖和果糖，再按还原糖测定。将水解前后 转化糖的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。 总糖：乳糖和蔗糖之和。 10 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 10．1 费林氏液（甲液和乙液） 10．1．1 甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mL。 10．1．2 乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL，静置两天后过滤。 10．2 次甲基蓝溶液：10g/L。 10．3 盐酸溶液：体积比1：1。 10．4 酚酞溶液：0.5g酚酞溶液于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加入20mL水，然后再加入约0.1mol/L的氢氧化钠 溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容至100mL。 10．5 氢氧化钠溶液：c（NaOH）为300g/L。取300g氢氧化钠，溶于1000mL水中。 10．6 乙酸铅溶液：c（PbAc 2 ）为200g/L。取20g乙酸铅，溶解于100mL水中。 10．7 草酸钾-磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100mL水中。 11 仪器 ：常用理化实验室仪器。 12 操作步骤及结果计算 12．1 费林氏液的标定 12．1．1 用乳糖标定 12．1．1．1 称取预先在92～94℃烘箱中干燥2h，乳糖标样约0.75g（准确至0.2mg），用水溶解并稀释至250mL。将 此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。 12．1．1．2 预滴定：取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中。再加入20mL蒸馏水，从滴定管中放出 15mL乳糖溶液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲 基蓝溶液（10.2），继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖 的毫升数。 12．1．1．3 精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比 预备滴定量少0.5～1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入 3滴次甲基蓝溶液，然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算 的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。 12．1．1．4 按式（2）、（3）计算乳糖测定时，费林氏液的乳糖校正值（f 1 ）: V 1 ——滴定时消耗乳糖液量，mL； m 1 ——称取乳糖的质量，g； AL 1 ——由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数，mg。 表1 乳糖及转化糖因数表（10mL费林氏液） 12．1．2 用蔗糖标定 12．1．2．1 称取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g（准确到0.2mg），用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中，加水 10mL，再加入10mL盐酸（10.3），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s之间，使瓶内温度升至67℃。 自达到67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水冷却，当瓶内温度冷却至35℃ 时，加2滴甲基红指示剂（10.4），用300g/L的氢氧化钠（10.5）中和至呈中性。冷却至20℃，用水稀释至刻度，摇 匀。并在此温度下保温30min后再按12.1.1.2和12.1.1.3操作。得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化糖量。 12．1．2．2 按式（4）、（5）计算蔗糖测定时，费林氏液的蔗糖校正值（f 2 ）： V 2 ——滴定时消耗蔗糖液量，mL； m 2 ——称取蔗糖的质量，g； AL 2 ——由蔗糖液滴定毫升数查表1所得的转化糖数，mg。 12．2 乳糖的测定 12．2．1 样品处理 12．2．1．1 称取2.5～3g样品（准确至0.01g），用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。 12．2．1．2 加4mL乙酸铅（10.6）、4mL草酸钾-磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶， 用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤过滤，弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。 12．2．2 滴定 12．2．2．1 预滴定：将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧 瓶中，再加入20mL蒸馏水，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲 基蓝（10.2），然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。 12．2．2．2 精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预 备0.5～1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基 蓝溶液，然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖 时，此即为转化后滴定量）。 12．2．3 乳糖含量的计算 式中：L——样品中乳糖的质量分数，g/100g； F 1 ——由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg； f 1 ——费林氏液乳糖校正值； V 1 ——滴定消耗滤液量，mL； m——样品的质量，g。 12．3 蔗糖的测定 12．3．1 转化前转化糖量的计算 利用测定乳糖时的滴定时，自表1中查出相对应的转化糖量，按式（7）计算： 式中：F 2 ——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg； f 2 ——费林氏液蔗糖校正值； V 1 ——滴定消耗滤液量，mL； m——样品的质量，g。 12．3．2 样液的转化及滴定 取50mL样液于100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL的盐酸（10.3），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s 之间，使瓶内温度升至67℃。自达至67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水 冷却，当瓶内温度冷却至35℃时，加2滴酚酞溶液剂（10.4），用氢氧化钠（10.5）中和至呈中性，冷却至20℃，用 水稀释至刻度，摇匀。并在此温度下保温30min后再按12.2.2滴定，得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化液量。 式中：F 3 ——由V2 2 1查得转化糖数，mg； f 2 ——费林氏液蔗糖校正值； m——样品的质量，g； V 1 ——滴定消耗转化液量，mL。 12．3．3 蔗糖含量的计算 式中：L 1 ——转化后转化糖的质量分数，%； L 2 ——转化前转化糖的质量分数，%。 12．3．4 若样品中乳糖与蔗糖之比超过3：1时，则计算乳糖时应在滴定量中加上表2中的校正值数后再查表1和计算。 12．3．5 总糖=蔗糖+乳糖 13 允许差 13．1 重复性 ：由同一分析人员在短时间间隔内测定的两个结果之间的差值，不应超过结果平均值的1.5%。 13．2 重现性 ：由不同实验室的两个分析人员对同一样品测得的两个结果之差，不应超过结果平均值的2.5%。 表2 乳糖滴定量校正值数 方法三 蔗糖的测定——（酶比色法） 同GB/T 16286。

2. 乳糖不耐受有哪些检测方法

为了避免不适当饮奶对健康造成的损害，最好在饮奶前检查自己是否耐受乳糖，然后选择不同类型的奶制品。
1．临床诊断，医生根据患者腹痛、腹胀、腹泻等症状，确定其是否耐受乳糖。2．在饮用牛奶后做“呼氢试验”。3．在饮用牛奶后，测试尿液中半乳糖的浓度，这是目前国外最常用的一种方法，更为简便、经济、可靠。伊利在本次活动中选用的即为此种检测方法。

3. 请问如何检测“乳糖不耐受”

目前，检测人体乳糖耐受能力的方法大致有三类：一是临床诊断；二是饮用乳糖后做“呼氢试验”，需用特殊仪器，如有吸烟史或蔗糖不耐受症，测试结果不准确；三是测试尿中半乳糖的浓度，在西欧、北美和日本较为普遍。我国基本采用临床诊断法，造成许多隐性不耐受患者漏诊，可靠性较差。 针对这一现状，在全国小儿佝偻病防治科研协作组等的组织支持下，经过两年多努力，北京金域高科诊断技术有限公司王加义副研究员率领的团队经过数千次实验，终于掌握了一种评价人体乳糖耐受能力、指导公众科学饮奶的新技术——JY-Po-Color Gal尿半乳糖测定技术。 经权威机构查新检索，这一技术属国内首创。受试者只需收集饮用乳糖或牛奶后2至3小时间的5毫升尿液，十几分钟即可测试出乳糖耐受能力，可在家庭使用。

4. 请教乳清粉中乳糖含量测定的方法及注意事项

A可以试下这个： 乳清粉中乳糖的测定 1 仪器设备 磁力搅拌器、分析天平(感量0.000lg)、烧杯、容量瓶、具塞锥形瓶等。 2 主要试剂 0. lmol/L氢氧化钠溶液，0.5mol/L盐酸溶液，0.1N碘标准溶液，0.1N硫代硫酸钠标准溶液，1%淀粉指示剂 3 操作方法 准确称取乳清粉样品1.5～2.0g (精确至0.000lg)放入150m1的烧杯中，加入100m1的蒸馏水，放置磁力搅拌器中搅拌10分钟，让其充分溶解。然后移人200m1容量瓶中，用蒸馏水洗2～3次，加水

5. 乳糖不耐受怎么检查

病情分析： 可以检查的，你可以去医院进行一下特定的检查。 意见建议：目前，检测人体乳糖耐受能力的方法大致有三类：一是临床诊断；二是饮用乳糖后做“呼氢试验”，需用特殊仪器，如有吸烟史或蔗糖不耐受症，测试结果不准确；三是测试尿中半乳糖的浓度，查小便，如果怀疑还是去查一下更放心一些。

6. 乳糖的微生物限度检验方法是什么

浓度梯度的设置，生物量做纵坐标，乳糖浓度做横坐标，进行检测。

7. 如何测定牛奶中乳糖含量

牛奶中乳糖含量的测定方法有两种，一是利用其还原性，另一种是利用其稳定性。日本推行的方法是Lane Eynon法，这种方法是还原铜盐法。具体测定方法是：先配制斐林试剂A液（CuSO434.369克定容至500毫升水中）和斐林试剂B液（173克酒石酸钠，50克NaOH定容至500毫升水中），然后取A、B液各5毫升混合，加水10毫升，另取5毫升牛奶溶于水定容至100毫升，再用斐林混合液在加热条件下滴定，用甲蓝GF作指示剂，根据终点，换算成乳糖含量。

8. 乳糖不耐受有哪些检测方法 低乳糖牛奶能解决乳糖不耐受吗

乳糖不耐受检测方法：

为了避免不适当饮奶对健康造成的损害，专家建议：最好在饮奶前检查自己是否耐受乳糖，然后选择不同类型的奶制品，检查的办法分三类。

1．临床诊断，医生根据患者腹痛、腹胀、腹泻等症状，确定其是否耐受乳糖。这种方法的缺点是不能发现隐性乳糖不耐受者。

2．在饮用牛奶后做“呼氢试验”。这种做法需要特殊仪器，如受试者有吸烟史或蔗糖不耐受症，测试结果会不准确。

3．在饮用牛奶后，测试尿液中半乳糖的浓度，这是目前国外最常用的一种方法，更为简便、经济、可靠。伊利在本次活动中选用的即为此种检测方法。

低乳糖奶可以解决乳糖不耐受：

在牛奶加工过程中，加入安全的乳糖酶，像体内乳糖被正常消化一样，乳糖被消化为葡萄糖和半乳糖。由于酶的消化，牛奶中的乳糖含量便下降，所以这样的牛奶被称作低乳糖牛奶。 由于低乳糖牛奶生产中，利用乳糖酶将乳糖消化成更利于吸收的葡萄糖和半乳糖，这类产品可以满足正常消费者、乳糖不耐受者、乳糖酶缺乏者饮用牛奶、充分吸收牛奶营养的需要。 由于乳糖的甜度较乳糖酶消化后的产物---葡萄糖和低聚半乳糖合起来的甜度低，所以，仔细品尝会发现，低乳糖牛奶甜度比正常牛奶略为甜一点。

9. 如何判断自己的乳糖耐受程度

人体需要借助乳糖酶的帮助才能分解乳糖，但很多人由于肠道内乳糖酶缺乏，无法将牛奶或是其他食物中的乳糖有效分解。没能分解的乳糖就有可能在回肠末端、结肠被细菌所发酵，进而产气，引起腹胀、排气。（还记得《生活大爆炸》中的莱纳德吗？）

有时，乳糖还可以直接或间接使得肠道中内容物的渗透压逐渐增高，从而出现渗透性腹泻、腹痛等。这种乳糖酶缺乏的人喝了奶之后出现腹泻、腹胀等一系列情况的症状，就叫做乳糖不耐症。

也就是说如果你空腹喝了牛奶之后，有涨气、放屁、腹泻、腹痛，那就可能是乳糖不耐受。
如果不耐受程度比较轻，喝的太少可能反应不大，建议喝个一杯（200ml）左右，要是这样都没反映那日常生活中就基本上也不用特地注意了。

看网络牛奶乳糖耐受性上的介绍，医院检查中最常用的是尿液检测
就是在饮用牛奶后，测试尿液中半乳糖的浓度，这是最常用的一种方法。

10. 牛奶乳糖耐受性的检测方法

就是运用基因学和分子生物学技术，对不同个体的与牛奶中乳糖耐受性相关DNA片段进行遗传信息解读，因为我们知道分解消化乳糖需要人体内产生的一种叫LCT的乳糖酶，所以通过检测LCT的DNA 有助于解释他们是否适合喝牛奶或适合喝哪种类型的奶制品。这是目前国内外最先进的检测手段。
DNA 样本的采集
口腔粘膜采集：受测者在医护人员帮助下用清水漱口，用无菌拭子适度用力的在口腔左右腮上下刮拭20次以上，将样本保存放入采集袋中。此过程无痛无损伤，是非常方便快捷的取样方式。
FTA血样采集：医护人员替病患消毒后采集相应部位的血液，此方法现在不是很常用了。
检测方法：利用荧光PCR仪器，根据DNA列阵的微测序法、动态等位基因特异的杂交、寡聚核苷酸特异的连接、DNA芯片以及TaqMan系统 等。但不管哪一种方法，首先必须进行靶序列的扩增，然后才能进行其它检测。