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p3实验室核酸检测方法

发布时间:2022-04-28 01:11:13

⑴ 核算检测方法

第一步,采集分泌物。
首先,医务人员会使用咽拭子擦拭受检者鼻腔或者喉咙扁桃体处,采集唾液分泌物,这个过程其实蛮疼的。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
第二步,进行留样。
将人体分泌物采集出来以后,咽拭子浸到保存液中,将管子盖子旋好进行留样。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
3
第三步,样本送检。
然后,将样本装入到干净的密封袋中封好,送到相关部分进行检测。
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4
第四步,核酸提取。
相关部门将送来的样本,送到指定实验室做核酸提取实验。
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5
第五步,荧光PCR核酸检测。
核酸提取出来以后,再使用荧光PCR进行检测使用,检测是否有扩增反应,也就是判断阴性还是阳性。
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6
最后,出核酸检测报告。
最后,根据核酸检测的荧光PCR反应结果,得出核酸检测检车报告,本人查询结果即可。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
END
方法总结
1
1、采集分泌物。
2、进行留样。
3、样本送检。
4、核酸提取。
5、荧光PCR核酸检测。
6、核酸检测报告。

⑵ 实验室核酸检测最常用的方法是

你好朋友,核酸检测,现在的方法就是在鼻腔里取样品和在咽喉当中取样品,这都是非常简单的,谢谢。

⑶ 去医院做核酸检测需要几个步骤

核酸检测有助于病原体的发现及疾病确诊,以新冠肺炎为例,核酸检测流程包括:1,核酸检查对象:疑似病例、疑似聚集性病例患者。2,标本采集的技术人员,应经过生物安全培训,培训合格和具备相应的实验技能。3,标本采集种类,每个病例必须采集急性期,呼吸道标本和急性期血液标本,重症病例优先采集下呼吸道标本,如支气管或肺泡灌洗液等,可根据临床表现与采样时间间隔进行采集。4,标本采集后在,生物安全二级实验室生物安全柜内分装。5,用于病毒分离和核酸检测的标本,应尽快进行检测。6,规范实时荧光RT-PCR方法检测,及检测结果的判读。
病情分析:
这个情况首先戴口罩去医院的感染科就诊,或者是发热门诊,医生在了解你的情况以后,然后取咽拭子,并进行相对的隔离观察,一般来说可在1~2天出结果。门诊都要导医台,可以咨询一下相关医院的流程。
2022-01-17 13:27:20
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⑷ 核酸检测具体步骤图解

体验传说中的核酸检测:

第一步:填表

第二步:摘下口罩,张嘴暴露咽后壁

第三步:医生用一个像棉签一样的拭子去擦拭扁桃体分泌物,然后放到试管里,再交给检验科(旋转拭子过程会感觉恶心、呛)

第四步:戴上口罩

第五步:有序出去,下一个进来。哦了[好的]

第六步:等待结果出来即可。

下面就是我们的实验室小姐姐给深圳中建装饰采样现场图:

湖北武汉新能源与智能汽车基地封闭测试项目核酸检测

⑸ 核酸检测步骤

常规核酸检测样本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。权重过程如下:

在获得患者样本后,应尽快进行检测。如果样品需要运送到不能立即测试,他们应当根据指令和打包在低温送到一个特殊的测试机构测试。检测机构收到样品后,应从样品中进行核酸提取,核酸提取试剂应使用经批准的《产品规范》规定的核酸提取试剂盒。

病毒RNA需要首先转录成cDNA,然后扩增检测。PCR扩增和检测应使用批准的产品规范中规定的荧光定量PCR仪。通过荧光定量PCR获得的样本Ct值,可以判断患者样本是否含有新型冠状病毒。

(5)p3实验室核酸检测方法扩展阅读:

目前临床核酸检测主要采用咽喉拭子检测。步骤是让被测者用淡盐水漱口,去除口腔中的细菌,然后将标签贴在标本容器上。

通知检查员咽拭子培养的目的和方法,点燃酒精灯,检查人员收取的张开嘴巴,头发啊,完全暴露的喉咙,培养管长消毒棉签轻轻动作敏感和擦两边的腭扁桃体拱门和咽分泌物,抽样已经完成,在试管口在酒精灯火焰消毒,然后插入试管擦洗,插入后及时检验。

核酸检测是目前诊断病原体最重要的依据,是诊断病原体的重要依据。例如,对于目前COVID-19的检测,病毒核酸检测仍是诊断的金标准。

什么是核酸检测

作为新冠状病毒的筛选手段,核酸检测被推到了大众视野之中,那么核酸检测到底是什么呢?核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸,来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”,即可证明患者体内有病毒存在。新冠病毒感染人体之后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖,因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。所以说,核酸检测阳性可以作为新型冠状病毒感染确诊的金标准。
现在疫情防控仍然是非常严峻,无论是上学还是工作,好多学校及单位都是要求结果阴性的报告单。
1、阳性代表的是感染了新冠病毒,阴性代表的是没有感染。核酸检测是在实验室的条件下,通过分析致病微生物DNA或者RNA基因学的序列,进行临床病因学的确诊。
2、此种核酸检测的方法是利用PCR扩增的方法进行检测,需要很多的步骤,最快也要6个小时才能出结果。此种检测灵敏度高、成本高,完全手工操作,工作量非常大,同时要求实验室的条件也非常高。它是目前及早确定病人是否感染病毒,并且及早发现和及早治疗最有效的检测方法。

⑺ 核酸检测是怎样检测的

众所周知,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是一种烈性呼吸道传染病,其病原体为新型冠状病毒。若想证实已出现的感染症状是由本病毒所引起,最准确的方法是从患者体内分离出活病毒,并进行病毒培养。

然而,此方法并不适合大面积应用,在此次疑似病例的确诊工作中,也并不适用。这是因为病毒培养所需时间较长,需要的场所条件也很高(P3级实验室),时效性远远跟不上临床需要。

而核酸检测作为病原学的检测手段之一,效率很高,一般情况下几个小时就可以知道结果。因此,在此次疫情中,临床上取得病原学证据的主要方式并不是病毒培养,而是核酸检测。

核酸是遗传信息载体,是对DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的统称。病毒则主要由遗传物质和蛋白质组成。而新型冠状病毒正是一种RNA病毒,其遗传物质是单链RNA。核酸检测的原理,正是检测在被测者的咽拭子等样本中,是否存在病毒的RNA。如果存在,说明被病毒感染。那么,我们是否已经获悉了病毒的RNA呢?

△RNA与DNA(图片来源网络)

在武汉疫情初期,中国疾病预防控制中心应用宏基因组学技术,在短时间内完成该病毒的鉴定,并获取了全基因组序列。在病毒全基因组序列公布后,实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂被快速研发。

随后,核酸检测试剂盒被应用于临床,并为确诊新冠肺炎提供病原学证据。那么,应用试剂盒进行核酸检测,究竟是怎样的一个过程呢?

首先,检测人员需要在试剂的帮助下,将样本中的核酸提取出来。再把已经分离出来的核酸加到核酸扩增试剂中,然后将其放到核酸扩增仪内,一般两个小时内就会有结果。

事实上,在操作步骤中,扩增是很重要的一环。扩增的意义在于能让微量的遗传信息成指数增加。只要样本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,从而更清晰地与病毒全基因组序列实现比对。

实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法已在临床实验室应用多年,检测体系成熟,具有特异性强、灵敏度高、检测周期短和可定量检测的优点,而且还能对病毒感染程度和治疗效果进行动态监测。

中日友好医院呼吸与危重症医学科主任医师陈欣在记者采访中介绍道:核酸检测十分敏感,只要在被检者的分泌物样本中找到一部分病毒的核酸,就可以通过RT-PCR扩增的方式,整合成序列。

"虽然不确定核酸是否来自于活病毒,但对于有呼吸道感染症状的患者或疑似患者来说,如果其咽拭子有这种核酸,一般认为来源于活病毒的一部分,间接证实其体内存在着病毒的繁殖和感染。" 陈欣告诉记者。

核酸检测容易出现"假阴性"

虽然核酸检测有灵敏度高、检测周期短等优点,但也存在着一定的弊端。不同于从人体内直接分离出活病毒的方式,核酸检测采用的是一种间接的方式,有可能造成假阴性。

因为试剂盒存在最低检测限的问题,所以只有当采到的样本中,病毒的含量达到一定程度时才能检测出来。少数情况下,可能康复者并未康复,但由于样本中病毒载量低,故康复者核酸检测的结果呈阴性,也就是我们常说的"假阴性"。

因此,在《新型冠状病毒肺炎诊疗标准(试行第七版)》中,出院标准之一为连续两次痰、鼻咽拭子等呼吸道标本核酸检测阴性(釆样时间至少间隔24小时)。
而之所以选取呼吸道标本进行核酸检测,是因为新冠肺炎属于呼吸道传染病,故而优先考虑从呼吸道的分泌物中取得标本。呼吸道又分为上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;后者主要包括气管、主支气管及肺内各级支气管。

相应地,现在对疑似患者检测病毒核酸,标本的采集一般有两大类,上呼吸道标本和下呼吸道标本。

上呼吸道标本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子(NPS)、鼻咽吸取物(NPA);下呼吸道标本主要包括痰液、气管吸取物、支气管肺泡灌洗液(BALF)等。

⑻ 什么是核酸检测怎么检测

核酸检测是在实验室的条件下,通过分析致病微生物DNA或者RNA基因学的序列,进行临床病因学的确诊。此种核酸检测的方法是利用PCR扩增的方法进行检测,需要很多的步骤,最快也要6个小时才能出结果。此种检测灵敏度高、成本高,完全手工操作,工作量非常大,同时要求实验室的条件也非常高。它是目前及早确定病人是否感染病毒,以及及早发现和及早治疗最有效的检测方法新型冠状病毒核酸检测的方法,目前采用的是实时PCR荧光法这种PCR荧光法也叫聚合酶链式反应,是通过一种分子生物学的技术用来放大这种极少见的RNA病毒。可以将新冠病毒RNA片段扩增到百万倍以上,这样更容易检测出新冠病毒

但是需要注意PCR荧光方法必须在PCR有资质的实验室进行,因此在绝大部分基层医院是没有上述条件以及专业人员的。绝大部分的医院是通过采集咽拭纸样本,放置专用的密封袋以及送检袋,在低温下保存,及时送到有条件的实验室。需要注意的是检验人员都要身穿三级的防护衣,配备护目镜、N95口罩,戴两层橡胶手套等防护装备

⑼ 核酸检验方法

核酸检测具体流程如下:
1. 核酸提取
使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。
2. 逆转录合成cDNA
逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中,在规定的温度和时间下进行逆转录反应。建议使用商品化RT-PCR一步法试剂进行第一轮扩增反应。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中,在规定的温度和时间下进行逆转录反应。使用商品化RT-PCR一步法试剂进行第一轮扩增反应。
3. PCR扩增反应(使用二次扩增的套式PCR扩增方法)
PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶(如Taq酶等)、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板(DNA或cDNA)。在扩增仪中,按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。
4. 扩增产物定性分析
扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法,与分子量标准比较,判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。自动化核酸扩增仪使用酶联比色分析或荧光探针杂交等原理测定。
5.结果判定和完成报告单
(1)实验成立的条件:每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照,只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立,可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。
(2)HIV核酸检测阳性:发现核酸阳性反应,应该重复采集样品进行复测,复测结果呈核酸阳性反应则判定为核酸阳性,复测结果为核酸阴性反应则判为不确定结果,需进一步随访检测。
(3)HIV核酸检测阴性:只可报告本次实验结果阴性。
(4)应在完成检测后5个工作日内发出检测报告。

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