大肠杆菌检测方法分为三种:
1、细菌分离鉴定法
分离培养与鉴定:粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液先经肉汤增菌,然后转种血琼脂平板。其他标本同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。
37℃孵育18~24小时后,观察菌落涂片染色镜检。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要的时候检定肠霉毒素。
2、卫生细菌学检查法
大肠杆菌会不断随粪便排出体外,污染周围环境水源、食品等。取样检查时,样品中大肠杆菌越多,则表示样品被粪便污染的越严重,表明样品中存在肠道致病菌的可能性也就越大。
大肠菌数指数:指每立升中大肠菌群数,采用乳糖发酵法检测。中国卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群,瓶装汽水和果汁中每100ml大肠菌群不能超过5个。
3、全自动微生物定量分析仪(TEMPO)检测法
全自动微生物定量分析(TEMPO)仪大肠杆菌群计数检测有TEMPOTC和TEMPOCC两种方法。
TEMPOTC的开发是为获得NF ISO4832标准相当性能水平。
TEMPOCC法是TEMPO仪器上根据BAM方法专门用于24h计数食品中大肠杆菌群方法。
(1)检测口腔菌群的检测方法扩展阅读:
大肠杆菌在生物技术中的应用
这些菌株由于失去了细胞壁等重要组分,所以在自然条件下已无法生长。甚至普通的清洁剂都可以轻易地杀灭这类菌株。即便由于操作不慎导致活菌从实验室流出,也不易导致生化危机。
生物工程用的菌株基因组都被优化过,使之带有不同基因型(例如β半乳糖苷酶缺陷型),可以更好的用于分子克隆实验。
真核基因在大肠杆菌中表达,必须有合适的表达载体(Vector),常用载体:pBV220,pET系统。
目的基因在大肠杆菌中表达的情况:
大肠杆菌更适合原核基因的表达,外源基因表达产量与单位体积产量是正相相关的,外源基因拷贝数和表达 产物产量之间存在动态平衡,单个细胞的产量又与外源基因拷贝数,基因表达效率,表达产物的稳定性和细胞代谢负荷等因素有关。
② 要检查口腔是否感染白色念珠菌,具体做什么检测当天能出结果吗
问题分析:
白色念珠菌是一种真菌,通常存在于正常人口腔,一般上呼吸道,肠道及阴道,在正常机体中数量少,不引起疾病,当机体免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制约作用失调,就会导致发病。
意见建议:
一般可以采取直接检查法是临床最常用检验方法,阳性检出率较低,其优点是简便,快捷。马上就能够检查出,而革兰染色法以及培养法阳性率较高,但是时间较长,当天不能查出。
③ 大肠杆菌的检测方法
多管发酵法。
多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法,这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。
在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。
(3)检测口腔菌群的检测方法扩展阅读:
注意事项:
1、检样时注意无菌操作。
2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。
3、每次实验需要有阴性对照。
4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、
5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。
④ 幽门螺旋杆菌的检测方法有哪些
首先推荐呼气试验
有碳13和碳14两种
碳13价格约是碳14价格的两倍多
碳14c尿素呼气试验是一种无创伤、快速检测幽门螺旋杆菌方法。
测定结果为:
c14正常值为小于100
(dpm/mmol
co2)为阴性,大于100为阳性。
目前认为,幽门螺旋杆菌是引起消化性溃疡与慢性胃炎的重要因素之一,也是引起溃疡与胃病复发的重要因素。
建议在医生指导下进行抗幽门螺旋杆菌治疗
碳13和碳14都是采用同位素示踪的原理,所不同的是13是稳定的同位素,14是放射性同位素
13在自然界中的含量远远小于14的.所以检测费用高.碳-14胶囊放射性非常微弱.14是天然存在的放射性元素,一粒胶囊的碳-14的放射性约是一个成年人人体放射性的1/20.
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⑤ 怎样检查幽门螺杆菌
幽门螺旋杆菌它是一种很厉害的微生物,它是有一定的传染性的,他寄生在人的胃中,对于幽门螺旋杆菌感染已经是一种很常见的细菌感染了,幽门螺杆旋菌和胃溃疡、十二指肠溃疡还有胃癌的产生都有着密切的联系,那么幽门螺旋杆菌该怎么检测呢?让我们一起来看一下吧。
幽门螺旋杆菌的检测方法主要有下面的这四个:
第一种是,血清的方式检测,但是现在医院都不经常在使用了,因为患者在治疗之后,血中的幽菌抗体还是会存在一到二年的,可能还会有假阳性的。
第二种是,C13和C14的呼气试验,它是可以间接的检测出幽菌抗原的,但是C14对人体和环境都有污染,吃过同位素之后在人体不会被衰退,不适合孕妇和儿童检测。C13是C14的升级版,它去除了C14的污染,只是需要食用相对的C13的标记的底物,敏感性以及特异性比较高。
第三种,医院还是会采用胃镜以及胃粘膜来活检,是一种侵入性的方式,有很多人都比较排斥这种方法。但是它的病理切片精确比较度高,化学反应的精确度就比较低了,还有小病灶的区域很容易漏检的。是很多病人都比较排斥的,它的检查费用比较高,不适合普遍检查。
第四种,唾液检测法间接检出幽菌抗原,测定尿素酶的敏感性、特异性以及它的针对性强,这种方法简单安全快速。而且还填补了检测口腔幽门螺旋杆菌的空白,是很适合初查和复查的。
以上就是幽门螺旋杆菌检测的四个方法,侵入性的方法可能会让很多病人难以接受,非侵入性的方法会让人容易接受,幽门螺旋杆菌最好的检测方法就是C13和C14尿素呼吸试验,这个方法是最简单的也是最好的检测方法。
⑥ 肠道致病菌的分类及常用检测方法
根据可培养细菌的数量分类在肠道菌群中,可以培养到的细菌有400余种,依据其数量多少可以分为主要(优势)菌群(predominant microflora)和次要菌群(sub—dominant microflora)。
①主要(优势)菌群:指肠道菌群中数量大或种群密集度大的细菌,一般在10~10cfu/g以上,包括类杆菌属、优杆菌属、双歧杆菌属、瘤胃球菌属和梭菌属等专性厌氧菌,通常属于原籍菌群。优势菌群是对宿主发挥生理功能的菌群,在很大程度上影响着整个菌群的功能,决定着菌群对宿主的生理病理意义。
②次要菌群:数量在10~10cfu/g以下,主要为需氧菌或兼性厌氧菌,如大肠杆菌和链球菌等,流动性大,有潜在致病性,大部分属于外籍菌群或过路菌群。
检测方法:
1、采样及稀释
(1)按无菌操作法将检样25g(或25mL)放于含有225mL无菌水的三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用无菌均质器,以8000~10000r/min的速度离心1min,做成1:10的稀释液。
(2)用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1Ml,注入含有9mL无菌水的试管内,振摇混匀,做成1:100的稀释液,换用1支lmL灭菌吸管,按上述操作依次作l0倍系列稀释液。
(3)根据食品的卫生要求或对检验样品污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。
2、乳糖初发酵试验
即通常所说的假定试验。其目的在于检查样品中有无发酵乳糖产生气体的细菌。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双倍乳糖胆盐发酵管。
lmL及1mL以下者,用单倍乳糖胆盐发酵管。每一个稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
3、分离培养
将产气的发酵管分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板,置36±1℃温箱内培养18~24h,然后观察菌落形态并作革兰氏染色、镜检并作复发酵试验。
4、乳糖复发酵试验
即通常所说的证实试验,其目的在于证明经乳糖初发酵试验呈阳性反应的试管内分离到的革兰阴性无芽胞杆菌,确能发酵乳糖产生气体。
在上述选择性EMB培养基上,挑取可疑的大肠菌群菌落1~2个进行革兰染色,同时接种乳糖发酵管,置36±l℃温箱内培养24±2小时,观察产气情况。
凡乳搪发酵管产气,革兰染色为阴性反应的无芽胞杆菌,即报告为大肠菌群阳性;凡乳糖发酵管不产气或革兰染色为阳性,则报告为大肠菌群阴性。
(6)检测口腔菌群的检测方法扩展阅读:
有益菌菌群的生理功能:
如果肠内有益菌菌群占优,肠内黏膜呈现粉红色,表示肠内环境相当良好。
1、吸收水分,粪便较软,较易排泄
在胃部分解消化的食物,经由小肠吸收营养后,成为粘稠状物体送至大肠。然后再经过18小时将水分及矿物质吸收,就变成容易排泄的粪便。肠道内环境良好时,粪便的软硬适中,排便会较为顺利。
2、缓和的蠕动,能顺利将粪便排出
借由肠的蠕动,将粪便缓慢的推送至肛门。如果蠕动过快或太慢,都将影响粪便的构成,导致便秘或者腹泻。而如果肠内干净,则蠕动的速度就相当的有规律,粪便可顺利排出。
3、有助维他命的合成
比菲德氏菌等好菌能维护肌肤的健康,并具有合成有助热量产生的维他命B1、B2及B6等,以及与止血、骨骼形成有关的维他命K等之功用。健康的肠道,好菌会不断繁殖,维他命的合成也可顺利进行。
4、迅速排出有害物质
健康的肠道并非完全没有坏菌的存在,有害物质多少会产生。当然还包括,吃进体内的食品化学添加物或是无法成为营养成分的物质。只要肠内环境良好,这些物质在开始危害身体前就被排出体外。
5、避免病原菌的侵害
比菲德氏菌等好菌可以刺激并提高身体的免疫机能,而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特质,所以像是含有好菌的乳酸饮料或健康食品等,都可抑制病原菌在肠内繁殖。
肠道有益菌菌群除了以上功能之外,对人体还有营养作用,如糖尿病、高血压、高血脂等。B族维生素和非必需氨基酸对人类的毛发具有重要的作用,当缺少这些营养元素,会导致头发脱落或毛发发黄、发叉,容易折断等现象。
⑦ 儿童口腔菌群怎么检查
健民口腔医疗机构专门检查口腔环境的仪器,用于预测口腔是否是易患龋环境,从根本上预防
⑧ 咽拭子检测的原理是什么
正常人咽峡部培养应有口腔正常菌群,而无致病菌生长。咽部的细菌均来自外界,正常情况下不致病,但在机体全身或局部抵抗力下降和其他外部因素下可以出现感染等而导致疾病。因此,咽部拭子细菌培养能分离出致病菌,有助于白喉、化脓性扁桃体炎、急性咽喉炎等的诊断。
由于呼吸和食物都通过口腔,因此口腔中会有形形色色的细菌寄生。如卡它球菌、各种葡萄球菌、各种链球菌、类白喉杆菌、肺炎克雷伯菌及大肠杆菌等。另外还有厌氧菌,如消化球菌、拟杆菌及类酵母菌的存在。
流感是通过呼吸道传播的,咽部是此类病毒聚集较多的地方。咽拭子标本就是用医用的棉签,从人体的咽部蘸取少量分泌物,采取的样本就是咽拭子标本,为了检验呼吸道疾病病毒类型,往往通过咽拭子可以方便快捷准确地检测出该病毒类型。
(8)检测口腔菌群的检测方法扩展阅读:
标本采集步骤:
1、清晨先用淡盐水(约1%)漱口后,方可采样留取标本,这样可以将口腔中杂菌清理掉,以便准确地查出上呼吸道及下呼吸道的感染细菌。
2、标签贴于标本容器上,携用物至病人床旁。解释取咽拭子培养的目的和方法。
3、点燃酒精灯,嘱病人张口发“啊”音,暴露咽喉,用培养管内的消毒长棉签以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物。
4.取毕,将试管口在酒精灯火焰上消毒,然后将棉签插入试管,塞紧。
5.及时送检。接种于特制培养皿中培养。