㈠ 壳聚糖游离氨基的数目如何确定
1 范围
本方法适用于红曲米、红曲红、红曲发酵液和功能性红曲中桔青霉素的测定。
2 原理
试样中的桔青霉素经提取、净化及浓缩后, 根据在高压液相色谱上的出峰面积测定含量。
3 试剂
3.1 乙腈：HPLC级；
3.2 磷酸：分析纯或色谱纯；
3.3 甲醇：HPLC级；
3.4 甲苯：分析纯；
3.5乙酸乙酯： 分析纯；
3.6甲酸：分析纯；
3.7水：去离子水
3.8乙醇：色谱纯
3.9桔青霉素标准溶液:：准确称取桔青霉素标准品（美国Sigma公司），用甲醇溶解，制成500 mg/L的储藏液， 工作液稀释到100mg/L，置4°C冰箱中备用。
3.10高压液相色谱洗脱剂：乙腈-去离子水（用色谱纯磷酸调pH至2.5）[35+65，v/v]
4 仪器
4.1 高效液相色谱仪；
4.2色谱柱：Eclipse XDB C18反相色谱柱，250 × 4.6mm, 粒度直径为5μm；
4.3试样环：20μL；
4.4检测器：荧光检测器，λex=331，λem=500；
4.5 VCX 400超声波细胞破碎仪；
4.6电子天平：千分之一或万分之一；
4.7 pH计：精度为0.01；
4.8匀浆器；
4.9离心机；
4.10旋转蒸发器；
4.11 分光光度计
4.12 0.45μm的微孔偏氟滤膜；
4.13具塞试管；
4.14烧杯；
4.15比色管。
5 分析步骤
5.1 桔青霉素的提取
5.1.1红曲米样品的预处理
准确称取粉碎的红曲米粉（细度达到测定色价时的要求）0.5—3.0g(根据红曲样品中的桔青霉素含量高低而定) 于50mL烧杯中，加入20mL复合萃取剂甲苯：乙酸乙酯：甲酸（7：3：1，v/v），称重，记录下连烧杯在内的重量，超声波处理10min（强度40%，5s，5s），自然澄清后称重，如果重量低于原重量，需用复合萃取剂补足。将上清液移入50mL具塞试管中，残渣中另加入15mL复合萃取剂，第二次称重并超声波处理（10min），自然澄清后称重，用复合萃取剂补足至超声处理前的重量，上清液移入50mL具塞试管，残渣用15ml复合萃取剂再重复提取一次。合并三次提取液，充分混匀后取30ml离心（3000rpm，20 min），上清液真空浓缩至干后溶于30ml甲醇中，微滤后取20μl 进行HPLC分析。
5.1.2液态发酵液的预处理
用均质器将发酵液中的菌丝打碎，取10mL均匀打碎的发酵液于比色管中，用乙醇定容至25mL，60℃加热1h（期间不断振摇），3000rpm离心15min，上清液微滤后取20μl进行HPLC分析。
㈡ 食品中过氧化氢残留还有哪些检测方法
过氧化氢也被称为双氧水，纯品为无色液体，极不稳定易分解，它是一种性能优良的氧化剂、漂白剂、消毒剂和交联剂，且具有高效杀菌、低残留、易分解、漂白效果好的的特点，促使许多食品制造商在食品生产加工中使用过氧化氢，用于杀灭生产设备、包装材料和食物中的有害微生物，提高产品的保藏期、防腐防臭、漂白食物、增加食品的美观度等。
我国食品添加剂使用标准GB2760-2011 中允许食品级过氧化氢在食品生产中作为加工助剂使用，但在制成成品前应该清除，如果清除不完全应严格控制在规定的范围内。
然而由于过氧化氢在使用过程中的众多性能优势，一些生产厂家在生产过程中过量添加过氧化氢和非法添加过氧化氢的现象非常严重，由此而引起的食物中毒事件常有发生。
因此，检测食品中过氧化氢残留是一件非常重要的事情，检测方法主要有以下几种：
1、化学滴定法
化学滴定法测定过氧化氢的原理是利用过氧化氢具有氧化性和还原性的特性，通过氧
化还原反应，显色剂变色，目视法确定反应终点的一种检测分析方法，该方法操作简单，但不适用于微量分析。GB/T 23499-2009中的碘量法和钛盐比色法就属于化学滴定法。但是对于脂类和蛋白含量较高的样品，方法的精密度和准确度较差。
2、分光光度法
分光光度法是在分光光度计中，在特定波长处或一定波长范围内，测定被测物质浓度与光的吸光度值呈线性关系，可以对被测物质进行定性、定量分析的方法。近年来，分光光度法由于操作方便、仪器设备价格低等优点被广泛应用于检测分析中，研究发现在过
氧化氢的特征反应中，铝酸盐具有催化作用，偏钒酸铵可以作为显示剂，过氧化氢氧化碘离子与亚甲基蓝反应生成离子络合物，使用分光光度计可以进行微量分析。
3、高效液相色谱法
高效液相色谱法是近几十年来发展起来的一种新型分离分析技术，因其具有灵敏度好和检测速度快等特点，现已被广泛应用于食品、药物、生物化学等的分析中。应用高效液相色谱检测过氧化氢的例子也有很多。如可以采用C18色谱柱，将样品中的过氧化氢与三苯基膦进行衍生化反应，生成氧化三苯基膦，采用高效液相色谱法可以进行定性定量测定。
4、化学发光法
化学发光法是在催化剂作用下，采用光电倍增管接受发光物质所产生光信号的一种方
法。在过氧化氢化学发光分析中，主要采用鲁米诺、过氧草酸酯和光泽精三中发光物质，
鲁米诺作为最有效的化学发光物质，近年来成为研究的热点。
5、荧光光度法
物质受到紫外光照射后会发射出紫外光荧光或可见荧光，荧光光谱的范围较广，可以
从 X 光到红外光谱区。过氧化酶提高了荧光光度法的灵敏度和选择性，可用于测定低浓度
的 过氧化氢。
6、电化学分析法
电化学分析方法是基于电化学性质的一种分析方法。通常，将被测物质作为一个电化学池的一部分，被测物质的浓度与电参数存在线性关系进行测定的一种方法。电化学分析
法具有测量范围宽、仪器设备价格低等特点，因此在一定程度上得到广泛的应用。采用电流法和循环伏安法对该纳米铂-多壁碳纳米管、壳聚糖修饰铂玻碳电极的化学性能进行研
究，过氧化氢与还原峰呈良好的线性关系。
㈢ 求助：壳聚糖纳米粒透射电镜表征的制样方法
透射电镜（结合图象分析仪）法，光子相关谱（PCS）（或称动态光散射），比表面积法以及X射线小角散射法（SAXS）等四种。1、透射电镜法：透射电镜是一种直观、可靠的绝对尺度测定方法，对于纳米颗粒，它可以观察其大小、形状，还可以根据像的衬度来估计颗粒的厚度，显微镜结合图像分析法还可以选择地进行观测和统计，分门别类给出粒度分布。如果将颗粒进行包埋、镶嵌和切片减薄制样，还可以对颗粒内部的微观结构作进一步地分析。当对于所检测的样品清晰成像后，就是一个测量和统计的问题。一种作法是选取足够多的视场进行照相，获得数百乃至数千个颗粒的电镜照片，再将每张照片经扫描进入图象分析仪进行分析统计。按标准刻度计算颗粒的等效投影面积直径，同时统计落在各个粒度区间的颗粒个数。然后计算出以个数为基准的粒度组成、平均粒度、分布方差等，并可输出相应的直方分布图。在应用软件中还包括个数分布向体积分布转换的功能，往往将这两种分布及相关的直方图和统计平均值等都出来。该方法的优点是直观，而且可以得到颗粒形状信息，缺点是要求颗粒要处于良好的分散状态，另外，由于用显微镜观测时所需试样量非常少，所以对试样的代表性要求严格。因此取样和制样的方法必须规范；而且要对大量的颗粒的粒径进行统计才能得到粒度分布值或平均粒径。2、光子相关谱法：该方法是基于分子热运动效应，悬浮于液体中的微细颗粒都在不停地作布朗运动，其无规律运动的速率与湿度和液体的粘度有关，同时也与颗粒本身的大小有关。对于大的颗粒其移动相对较慢，而小的颗粒则移动较快。这种迁移导致颗粒在液体中的扩散，对分散于粘度为η的球形颗粒，彼此之间无交互作用时，它的扩散系数D同粒径x之间的关系满足一关系。而当一束激光通过稀薄的颗粒悬浮液时，被照射的颗粒将会向四周散射光。在某一角度下所测散射光的强度和位相将取决于颗粒在光束中的位置以及颗粒与探测器之间的距离。由于颗粒在液体中不断地作布朗运动，它们的位置随机变动，因而其散射光强度也随时间波动。颗粒越小，扩散运动越强，散射光强度随即涨落的速率也就越快；反之则相反。光子相关谱（PCS）法这正是从测量分析这种散射光强的涨落函数中获得颗粒的动态信息，求出颗粒的平移扩散系数而得到颗粒得粒度信息的，所以又称为动态光散射法。光子相关谱法粒度分析的范围约3nm～1000nm。测试速度快，对粒度分布集中且颗粒分散好的样品，测量结果重复性好。该方法缺点是要求样品要处于良好的分散状态，否则测出的是团聚体的粒度大小。3、比表面积法：粉末的比表面积为单位体积或单位质量粉末颗粒的总表面积，它包括所有颗粒的外表面积以及与外表面积相联通的孔所提供的内表面积。粉末的比表面积同其粒度、粒度分布、颗粒的形状和表面粗糙度等众多因数有关，它是粉末多分散性的综合反映。测定粉末比表面积的方法很多，如空气透过法、BET吸附法、浸润热法、压汞法、X射线小角散射法等，另外也可以根据所测粉末的粒度分布和观察的颗粒形状因子来进行计算。在以上方法中，BET低温氮吸附法是应用最广的经典方法，测量比表面积的BET吸附法，是基于测定样品表面上气体单分子层的吸附量。最广泛使用的吸附剂是氮气，测定范围在1—1000m2/g，十分适合对纳米粉末的测定；该方法的优点是设备简单，测试速度快，但它仅仅是纳米粉末的比表面积的信息，通过换算可以得到平均粒径的信息，但不能知道其粒度分布的情况。4、X射线小角散射法：X射线小角散射（SAXS）系发生于原光束附近0～几度范围内的相干散射现象，物质内部1至数百纳米尺度的电子密度的起伏是产生这种散射效应的根本原因。因此SAXS技术可以用来表征物质的长周期、准周期结构以及呈无规分布的纳米体系。广泛地用于1～300nm范围内的各种金属和非金属粉末粒度分布的测定，也可用于胶体溶液、磁性液体、病毒、生物大分子以及各种材料中所形成的纳米级微孔、GP区和沉淀析出相尺寸分布的测定。SAXS的结果所反映的为一次颗粒的尺寸：所谓一次颗粒，即原颗粒，可以相互分离而独立存在的颗粒。很多颗粒粘附在一起形成团粒，这在纳米粉末中是相当常见的。如不能将其中的颗粒有效地分散开来，它们将会作为一个整体而沉降、遮挡和散射可见光，其测试结果势必为团粒尺寸的反映。而SAXS测试结果所反映的既非晶粒亦非团粒而是一次颗粒的尺寸。测试结果的统计代表性：检测结果是否具有代表性，当取样合理时，主要是看测量信息来源于多少个颗粒。对小角散射而言就是要看测量时X射线大约照射上多少颗粒，根据上述参数可以算出X射线辐照体积内的颗粒数近似为1.8×10的10次方个。因此，我们可以认为一般小角散射信息来自10的9次方～10的11次方个颗粒，这也就保证其结果的统计代表性。
㈣ 食品中是否含有壳聚糖成分怎样检测出来
壳聚糖在自然界中广泛存在于低等生物菌类，藻类的细胞，节支动物虾、蟹、昆虫的外壳等。人体内是没有的。
在pH 5.5的B-R(Britton-Robinson)缓冲溶液中，壳聚糖对荧光素的吸光度度具有明显的降低作用,且降低程度与加入的壳聚糖浓度成线性关系,据此可以建立一种测定壳聚糖含量的分光光度法。
来自《分析试验室》 2008年S1期 保健食品中壳聚糖含量检测新方法的研究
㈤ 壳聚糖的制备：以虾壳为原料，来提取壳聚糖。 急！急！急！急！希望高手来帮助啊！万分感谢！
虾壳蟹壳漂洗----脱钙及无机盐----脱蛋白质及脂----脱碱，漂洗----水洗；烘干----甲壳素产品----浓碱处理----水洗；烘干----壳聚糖初产品----提纯----壳聚糖初产品----提纯-----壳聚糖产品
㈥ 壳聚糖微生物检测方法
小生新手，不知壳聚糖在微生物检测时用的什么标准？为什么我用药品的标准检测时，每次检出的细菌总数很少几乎没有？请哪位前辈指点迷境？谢谢！！
㈦ 壳聚糖的功效是什么
1.控制胆固醇
人类健康的最大问题之一是胆固醇，它导致许多严重的疾病。壳聚糖有两个机制降低胆固醇。一个是阻止脂肪的吸收，另一个是将人体血液内的胆固醇排泄掉。首先，壳聚糖抑制那些助于脂肪吸收的脂肪酶的活性。
脂肪酶分解脂肪使人体进行吸收。另外一个是排泄胆酸。一旦胆酸排泄，则血液中的胆固醇被用于制造胆酸。这两种机制使得壳聚糖成为强胆固醇清除剂。壳聚糖是一种天然材料，具有强大的阴离子吸附力，适用于降低胆固醇而没有任何副作用。
2.抑制细菌活性
壳聚糖在弱酸溶剂中易于溶解，特别值得指出的是溶解后的溶液中含有氨基（NH2+），这些氨基通过结合负电子来抑制细菌。壳聚糖的抑制细菌活性，使其在医药、纺织和食品等领域有着广泛的应用。
(7)壳聚糖液相检测方法扩展阅读：
此外，壳聚糖的一个显着特性是吸附能力。许多低分子量的材料，比如金属离子、胆固醇、甘油三酯、胆酸和有机汞等，都可以被壳聚糖吸附。特别是壳聚糖不仅可以吸附镁、钾，而且可以吸附锌、钙、汞和铀。壳聚糖的吸附活性可以有选择地发挥作用。
这些金属离子在人体中浓度太高是有害的。比如，血液中铜离子（Cu2+）浓度过高会导致铜中毒，甚至产生致癌后果。现已证明壳聚糖是高效的螯合物介质。壳聚糖的吸附能力的大小取决于其脱乙酰度。脱乙酰度越大，吸附能力越强。
参考资料来源：网络-壳聚糖
㈧ 蛋白质含量可以用液相吗
一个完整的样品测定方法需要大量的文献资料考察、方法摸索、方法验证。这么大量的工作基本是1-2个月的工作量。你提问连个悬赏都不给，实在是有点抠门。
我只能给出大致方向，具体方法还要你自己找专家去问，来这里回答问题的只能叫专业人士，很少有专家。
第一，明确测定目标，将目标物从样本中提取出来。
螺旋藻藻蓝蛋白的提取常分为蛋白溶出和蛋白沉淀两个过程。藻蓝蛋白是属于胞内蛋白质, 要使其溶出首先要破碎细胞的细胞壁、细胞膜使其以溶解的状态溶于提取液中, 再采用适宜的方法将其沉淀,在提取过程应保持蛋白的活性，本实验中，将经细胞破碎后的粗提液，先用磷酸缓冲液做溶剂把蛋白质溶解出来，再用离心法除去不溶物即得藻蓝蛋白初提取物，再经壳聚糖亲和沉淀－活性炭吸附，透析除盐，除掉其他杂质，最后结合阴离子交换层析即可得到高度纯化的藻蓝蛋白。
（参见：螺旋藻藻蓝蛋白分离方法研究，网络搜索，网络文库中文章）
第二，寻找合适的测定方法，准确定量。
其实利用铅电极测定及总氮量测定法测定总蛋白含量是非常简单易行且准确的。但是你要求是用液相法测，那就非常麻烦了。因为不同的蛋白质会被液相分离开来，每种蛋白质都需要用对照品进行准确定量，最终再折算成总氮量进行计算。不仅复杂、难以操作，而且其前期对色谱峰进行定性的工作就已经是非常大的工作量了。所以用液相分离是一种得不偿失的检测方法。
㈨ 壳聚糖制备水凝胶的方法
这个三言两语是讲不清楚的，建议你查一下文献。
附一篇的摘要：
杨旭东,吴国杰,林玩金.壳聚糖水凝胶的制备及性能研究[j].化工新型材料,2005,33(12)
摘要：以壳聚糖为原料,用戊二醛作为交联剂,在醋酸溶液中合成壳聚糖水凝胶.用正交实验优化了制备壳聚糖水凝胶的工艺条件,实验结果表明:当壳聚糖浓度为3%、戊二醛浓度为3%、凝胶温度为55℃时制得的水凝胶硬度最大;当壳聚糖浓度为2%、戊二醛浓度为1%、凝胶温度为45℃时,制得的水凝胶溶胀度最大.壳聚糖水凝胶具有良好的生物相容性.
