荧光鉴别法的操作方法

❶ 荧光检测方法

荧光检测是一种自然发光反应，通过荧光素酶与 ATP进行反应，可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣，在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量，并以数字形式予以表示，在1975年首先被应用到食品工业中，在1985年在化妆品制造业中得到应用。
荧光定量：采用国际主流的荧光定量PCR技术，迅速提升技术水平。
结果稳定：检测结果CV值与进口全自动PCR仪接近，具有自检功能，避免错误数据的输出。
封闭操作：全部检测过程均为闭管操作，于反应管处检测荧光，有效防止污染，解决PCR技术中最棘手之难题。
准确定量：满足临床对量化的需求，定量荡围宽，可涵盖大部分病原微生物，自动曲线拟合。
灵敏度高：利用光谱信号灵敏性的优势，有效提高检测灵敏度。
安全：全程无毒检测。
操作简便：省去后处理的烦琐过程。
直接打印：直接打印结果，无须记录大量数据。
升级版：FS1000有与电脑连接的数传输口，可以连接电脑，根据用户需要提供先进分析软件，全面分析实验数据。（电脑和打印机选配件）
故障率低：维护非常简单。
节约资源：可利用现用PCR扩增仪，最大限度节约资源。

❷ 荧光标记法是什么

荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。

例如：Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

相关信息：

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。

荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简便等优点，使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。

❸ 微生物荧光物质的鉴定方法有哪些

1.
酸碱反应：细菌代谢碳水化合物，一般产生酸性物质；分解蛋白质或氨基酸，则产生碱性物质，根据不同细菌的理化性质不同，测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色，来判断菌种。
2.
酶谱分析：根据细菌生长产生酶的特性，在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中的酶结合成荧光物质，可以在较短的时间判定菌种。
3.
高压液相色谱分析：用气相色谱检测细菌在液体培养基中的代谢产物(挥发和非挥发脂肪酸)，结果与数据库数据比较后，得出鉴定结果。
4.
代谢指纹法：其原理是根据细菌对碳源(或氮源)利用的差异来区别和鉴定细菌，不同的细菌会利用不同碳源(或氮源)进入新陈代谢过程(称为呼吸)，而对其他一些碳源(或氮源)则无法利用，将每种细菌能利用和不能利用的一系列碳源(或氮源)进行排列组合，就构成了该种细菌特定的代谢指纹，由于细菌在利用碳源进行呼吸时，会发生一系列的氧化-还原反应，产生电子，TTC(四唑紫，2，3，5-TriphenylTetrazoliumChloride)在呼收电子后，会由无色的氧化型转变为紫色的还原型，通过肉眼观察或计算机控制的读数仪，将反应结果同数据库中的指纹进行比对，从而得到细菌的鉴定结果。

❹ 飞机荧光检测法的步骤

飞机荧光检测法的步骤是第1步检测水银

❺ 什么是荧光标记法

荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

目前用于神经元标定的荧光物质有十多种。可以根据实验的要求进行单荧光物、双标定和三标定。后者可以用来做神经元轴突侧枝投射的追踪。

(5)荧光鉴别法的操作方法扩展阅读

1. SYBR green I染料

反应体系中，加入过量SYBR

荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的扩增完全同步。

其优点是对模板没有选择性，使用方便，非常方便，但也易与非特异性双链DNA结合，产生假阳性，可以通过溶解曲线的分析，优化反应条件。

2. Taqman 探针

目前在Real-time

Q-PCR中最广泛使用的Tagman系统就是运用了这个原理。它能被DNA合成酶（例如Taq酶）的5'-3'活性所降解，探针的5'端有一荧光报告基团，3'端有一荧光淬灭基团。

当两个基团相互先靠近的时候，由于发生能量传递作用，报告基团不能发出荧光，但随着扩增反应的进行，5'端得报告基团随着探针的水解而脱落下来，不再与淬灭发生能量传递作用，从而能发出荧光，被信号探测器所捕获。

3. Scorpions

它由两个寡核苷酸分子组成，一个是引物，另一个是带荧光分子的探针，但是此探针也具有引物的功能。引物与形成发夹结构的探针相连，在探针上由于荧光报告基团与淬灭基团相互靠近，不发荧光。

变性阶段，探针的发夹结构会解开，在退火时则与模板相结合，形成线性分子，报告基团同淬灭基团分离而发射荧光。在探针的设计上，要求绝对保守，长度为25-32bp，Tm在68-70度之间，探针的5'端不能为G，避免多个碱基同时出现，尤其要避免4个G同时出现，另外，探针应靠近上游引物。

4. 分子信标

分子信标是（Molecular

beacon）是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。

荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭，由荧光基团产生的能量以红外光而不是可见光形式释放出来。在复性温度下，因为模板不存在时形成茎环结构。

当加热变性会互补配对的茎环双链解开，如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后，分子信标将成链状而非发夹装，使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时，淬灭作用被解除，发出激光分子。

❻ 荧光反应鉴别方法的介绍

荧光鉴别反应法主要有三种情况：
1、药物本身在可见光（或紫外光）下发射荧光；
2、药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见或紫外光下发射荧光；
3、药物与某些试剂如溴、间苯二酚、衍生化收集试剂等反应，于可见光下发射荧光。

❼ 时间分辨荧光

时间分辨荧光分析法（Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA）是近十年发展起来的一测微量分析方法，是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19，较放射免疫分析（RIA）高出3个数量级。

时间分辨荧光分析法（TRFIA）实际上是在荧光分析（FIA）的基础上发展起来的，它是一种特殊的荧光分析。荧光分析的利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外－可见分光分析法中杂色光的影响，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度的提高了光学分析的灵敏度。但是，当进行超微量分析的时候，激发光的杂散光的影响就显得严重了。因此，解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。

解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短，激发光消失，荧光也消失。不过有非常少的稀土金属（Eu、Tb、Sm、Dy)的荧光寿命较长，可达1－2ms，能够满足测量要求，因此而产生了时间分辨荧光分析法，即使用长效荧光标记物，在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。

平时常用的稀土金属主要是Eu(铕）和Tb(铽），Eu荧光寿命1ms,在水中不稳定，但加入增强剂后可以克服；Tb荧光寿命1.6ms，水中稳定，但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解，因此从测量方法学上看Tb很好，但不适合用于生物分析，故Eu最为常用。

由于常用Eu作为荧光标记，因此增强剂就成了试剂中的重要组成。增强剂原理：利用含络合剂、表面活性剂的溶液的亲水和亲脂性同时存在，使Eu在水中处于稳定状态。现在有些试剂，在络合Eu在抗体上时已考虑了增强问题，而使用了具有增强作用的新络合剂，因而有的试剂没有单独的增强剂。

随着检验医学的发展，对微量、超微量的测定会越来越多，同时RIA的污染问题会越来越被重视，因此，时间分辨荧光分析法（TRFIA）具有越来越大的应用空间。

❽ 怎样鉴别纸巾有没有荧光剂

鉴别纸巾有无荧光剂的检测方法：

第一步：可以用一个紫光灯手电筒来检测，这是专门用于荧光剂检测的。如下图所示：

❾ 荧光反应鉴别方法的测定方法

荧光反应鉴别方法是将供试品溶解在适当的溶剂中，直接观察或加入试剂反应后观察荧光的鉴别方法。直接观察荧光的反应为直接荧光法，加入试剂观察荧光称为间接荧光法，加入的试剂如：溴、间苯二酚、衍生化收集试剂等。

❿ 怎样用紫光灯检验玉石的真伪

紫光光检验玉石真假的方法：主要是看在紫光灯照射下玉石的颜色和内部构造。

紫外线下，真正的天然翡翠无荧光反应。

b货翡翠在经过化学物品的浸泡下，大量的树脂类化学物质存留在翡翠内部，当在紫光灯的照耀下就会有荧光呈现出来。

玉石的其他检验方法：

1、滴水鉴别法：将一滴水滴在玉上，如果成露珠状，久不散者是真玉。

2、双手触摸法：若是真玉，用手摸有冰凉润滑之感。

3、高光观察法：将玉对着高光亮处观察，颜色剔透、绿色均匀分布的是真玉。

4、舌尖鉴别法：舌尖舐真玉有涩的感觉，而假玉则无。

5、放大镜观察法：还可以用放大镜观察，主要看有无裂痕，有裂痕的其价值大减。

(10)荧光鉴别法的操作方法扩展阅读

鉴定的注意事项

1、颜色：颜色是决定翡翠价值的首要因素，颜色差一点点，价值就差很多。因此， 正确观察颜色非常重要。白炽灯下看翡翠颜色会显得鲜艳些，饱和度也会显得高一些，即所谓“月下美人，灯下玉”。而同样一块翡翠在日光下观察，其颜色会相对淡些、暗些。通常，人们以自然光下所观察到的颜色为准。

2、透明度：指翡翠使可见光自由透过的程度，由于组成翡翠的颗粒粗细不同、结合方式不同，允许光通过的能力也就不同。若大部分光线不能透过，翡翠的颜色显得死板，行话称之无水分，也就是很“干”。

若允许大部分光线透过翡翠，则透明度较高，使翡翠显得非常晶莹，有“水汪汪”的感觉，行话形象地称之为水分足。欣赏透明度高的翡翠会令人有一种陶醉感，这种翡翠有一种滋润的感觉，似乎颜色是活的，可向四周放出。

3、体积： 在色、种、底、工、裂纹等相同的情况下体积越大就越贵，对于高价位的翡翠来说体积影响更大。

4、做工： 对于戒面、耳钉等首饰，要求切工规正，抛光优良；对于挂件、摆件来讲， 工匠的巧妙构思、娴熟技艺将起到决定。