Ⅰ 免疫学的检测方法
免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫。
Ⅱ 抗原抗体反应分为那四种类型各自有哪些常见的检测方法
根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别,抗原抗体反应表现为不同的形式.颗粒性抗原表现为凝集反应;可溶性抗原表现为沉淀反应;补体参与下细菌抗原表现为溶菌反应,红细胞抗原表现为溶血反应;毒素抗原表现为中和反应等.
Ⅲ 抗原或抗体的体外检测方法有哪些
抗原抗体检测有凝集反映、沉淀反应、放免技术、荧光技术、酶联免疫,化学发光、生物亲和,固相免疫、免疫组化等技术
Ⅳ 可以用于进行hiv抗体检测的有哪些
1、人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法)
雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)用于体外,肉眼观察,定性的免疫分析,检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用,本品检测阳性者,需进行进一步筛查确认。
2、InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂
InstantCHEKTM-HIV1+2为一种快速、简单、灵敏的检验方法,用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。
(4)抗体检测哪种方法检测抗体最常用扩展阅读
HIV1/2抗体筛查方法包括ELISA法、化学发光法或免疫荧光试验、快速检测(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒快速试验、明胶颗粒凝集试验、免疫层析试验)等,确证试验常用的方法是免疫印迹法。
筛查试验呈阴性反应可出具HIV1/2抗体阴性报告,见于未被HIV感染的个体,但处于窗口期的新近感染者筛查试验也可呈阴性反应。
若呈阳性反应,应用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测,或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则为HIV抗体阴性;如有一种或两种试剂呈阳性反应,需进行HIV抗体确证试验。确证试验无HIV特异性条带产生,报告HIV1/2抗体阴性。
Ⅳ 抗体检测最好选用什么血
抗体检测是在某些疾病中观察疗效及预后的一个指标。 抗体检测的目的是协助临床诊断。抗体检测的方法有标记免疫测定、凝集试验等。它在预防接种效果的观察和传染病流行病学调查中具有非常特殊的、重要的意义。
原理
在免疫应答中,细胞免疫和体液免疫是两个密切相关、互为调节的生理过程,对这两种免疫反应都有许多检测方法,但迄今为止,在临床检验工作中,以体液免疫反应中的特异性抗体的检测应用最广泛。
方法
现在抗体检测的方法众多,除传统的沉淀反应,凝集试验,补体结合试验外,标记免疫测定(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等)已成为主要的免疫测定技术,免疫印迹法也发挥了明显的作用,一些快速测定法(如快速斑点免疫结合试验)也被广泛使用。
临床应用
首先抗体检测用于诊断时,要考虑到患者所在地区该疾病的发病情况及与该疾病密切相关的情况,如正常人血清中抗体的水平,这一点在病原微生物感染的疾病中尤为重要。有些感染性疾病(例如病毒感染性疾病),往往采用“双份血清法”,根据发病初期及患病后某个时期抗体增长的情况进行诊断。
Ⅵ 检测抗核抗体最常用的技术是
正确答案:C
解析:间接免疫荧光技术常常作为检测抗核抗体最常用的技术
。
Ⅶ 指出ELISA有哪几种常用方法各种方法在操作上有什么异同
也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,操作步骤如下:
1) 将特异性抗体与固相载体联结。RF是一种自身抗体,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。
假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇。
2;夹心复合物",血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去,以提高试验的特异性.间接法测抗体
间接法是检测抗体常用的方法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备,应根据抗原结构的不同。小分子激素,HBsAg有adr,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。
在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的试剂,由于去除了Fc段。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物质,例如来自人血浆或人体组织的抗原,如不将其中的Ig去除,测知标本中抗原的量,直接包被不易成功,可采用捕获包被法、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。
3)加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体。
4.竞争法测抗体
当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。特别应注意除去能与一般健康人血清发生反应的杂质,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同,如按常法测读,形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质;(conjugate):
1)将特异性抗原与固相载体联结,故称为间接法。操作步骤如下,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份.Coli成份,很可能与受过E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗体发生反应。此法中受检标本不需稀释。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体,与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。
5.竞争法测抗原
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合,非特异IgG可直接吸附到固相载体上,应注意可测范围的最高值,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质;(immunosorbent)、ayr,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体.双抗原夹心法测抗体
反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型:
1.双抗体夹心法测抗原
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果、adw,固相载体上只留下特异性抗体;(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物":(1)固相的抗菌素原或抗体,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,在检测过程中标本须先行稀释(1。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。
4)加底物显色
本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。
间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结果,可直接用于测定,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。
双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3) 加酶标抗体。另外如抗原中含有无关蛋白,也会因竟争吸附而影响包被效果,然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,已被列为这类试剂的一项考核指标。
间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性。病人血清中受检的特异性IgG只占总IgG中的一小部分。
3。
4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色、AFP。
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,寻找合适的标记方法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,试验中也发生假阳性反应:40~1:200)。IgG的吸附性很强,即"免疫吸附剂",例如HBsAg,但应尽可能予以纯化。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect)。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应,例如以E.Coli为工程酶的重组抗原,如其中含有E,从而消除RF的干扰。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,最后的显色也愈浅。竞争法测抗体有多种模式,因此其敏感度相对高于间接法;(3)酶反应的底物、ayw4个亚型,因其不能形成两位点夹心,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加稀释的受检血清、HBeAg,有时也可吸附到包被抗原的表面。因此在间接法中,抗原包被后一般用无关蛋白质(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封闭(blocking)固相上的空余间隙。另外,以避免过高的阴性本底影响结果的判断,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2) 加受检标本、药物等ELISA测定多用此法。
6.捕获包被法测抗体
IgM抗体的检测用于传染病的早期诊断中。间接法ELISA一般仅适用于检测总抗体或IgG抗体。如用抗原包被的间接法直接测定IgM抗体,因标本中一般同时存在较高浓度的IgG抗体,后者将竞争结合固相抗原而使一部份IgM抗体不能结合到固相上。因此如用抗人IgM作为二抗,间接测定IgM抗体,必须先将标本用A蛋白或抗IgG抗体处理,以除去IgG的干扰。在临床检验中测定抗体IgM时多采用捕获包被法。先用抗人IgM抗体包被固相,以捕获血清标本中的IgM(其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM)。然后加入抗原,此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用,呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断。甲型肝炎病毒(HAV)抗体的检测模式。
类风湿因子(RF)同样能干扰捕获包被法测定IgM抗体,导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐,用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。
7.ABS-ELISA法
ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白,分子量60000,每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物,分子量244。用化学方法制成的衍生物素-羟基琥珀酰亚胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物,标记方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性,其亲和力较抗原抗体反应大得多,两者一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与4个生物素分子结合,因此如把ABS与ELISA法可分为酶标记亲和素-生物素(LAB)法和桥联亲和素-生物素(ABC)法两种类型。两者均以生物素标记的抗体(或抗原)代替原ELISA系统中的酶标抗体(抗原)。在LAB中,固相生物素先与不标记的亲和素反应,然后再加酶标记的生物素以进一步提高敏感度。在早期,亲和素从蛋清中提取,这种卵亲和素为碱性糖蛋白,与聚苯乙烯载体的吸附性很强,用于ELISA中可使本底增高。从链霉菌中提取的链霉亲和素则无此缺点,在ELISA应用中有替代前者的趋势。由于ABS-ELISA较普通ELISA多用了两种试剂,增加了操作步骤,在临床检验中ABS-ELISA应用不多。。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBc ELISA一般采用此法,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性
Ⅷ 为什么双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。那么,为什么双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法?
1、将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2、加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。 洗涤除去其他未结合物质。
3、加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合 的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4、 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。
Ⅸ 艾滋病抗体的检查方法
艾滋病病毒抗体检测
艾滋病病毒抗体检测:检测血液中的艾滋病病毒抗体是目前最常用的检测艾滋病病毒感染的实验室方法,一般要经过两个步骤:首先做初筛试验,如果为阳性,再做确认试验,确认试验阳性才可诊断为艾滋病病毒感染。
常用的方法有:
1病原检测病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。
2 抗体检测血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围,可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。
3 确证试剂筛检实验阳性血清的确证最常用的是Western blot(WB),由于该法相对窗口期较长,灵敏度稍差,而且成本高昂,因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高,WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。FDA批准的另一类筛检确证试剂是-免疫荧光-试验(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相对简单,整个过程在1-1.5小时内即可结束。此法的主要缺点是需要昂贵的荧光检测仪和有经验的专业人员来观察评判结果,而且实验结果无法长期保存。现在FDA推荐在向WB不能确定的供血员发布最终结果时以IFA的阴性或阳性为准,但不作为血液合格的标准。
4筛检试验筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。目前世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。颗粒凝集实验是另一种操作简单方便,成本低廉的检测方法,该方法结果可通过肉眼判定,灵敏度很高,特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用,缺点是必须使用新鲜样品,特异性较差。80年代后期发展起来的斑点印迹检测(Dot-blot assay)是一种快速ELISA(Rapid ELISA)方法,这种方法操作极为简便,过程短暂,整个过程多数在5-10分钟内甚至3分钟内即可结束,但该法比ELISA和颗粒凝集试剂昂贵得多。金免疫测定是以胶体金为标记物,以硝酸纤维素膜为载体的固相免疫测定,分为渗滤和层析两种形式。用于HIV抗体检体金试纸条属于金免疫层析,且大多数为间接法及双抗原夹心法,两种方法各有优缺点,但都简单而快速,数分钟即可得出结论,不需仪器设备,操作人员不需特殊训练,试剂稳定,适用于单份测定等。
Ⅹ 各种新冠病毒的检测方式,哪种最为准确
各种新冠病毒的检测方式,肛拭子是最准确的。
新冠病毒的主要检测方式新冠病毒出现之后,医院很快就推出了检测的方式,而其中全球使用最多的检测方式主要有三种。其中有两种是主流的检测方式,那就是鼻拭子或者咽拭子。主要是通过把一个长长的棉签深入到呼吸道之中,然后取样进行检测。因为新冠病毒在呼吸道停留的时间是比较久的,检测到样品的机会就更大,检测结果也就比较准确。
新冠病毒检测的注意事项在做新冠病毒检测的时候,很多人会频繁的清理喉咙,或者嚼口香糖,希望保持口腔的清洁,但是这完全没有必要,频繁的吞咽反而会让新冠病毒停留时间变短,存在检测不到病毒的可能性。因此在做新冠病毒的检测之前,最好不要喝水、不要清嗓子、不要抽烟、不要嚼口香糖,佩戴好口罩,等待进行检测即可。检测的过程是非常快速的,一般几秒钟就可以完成,所以不要对于长棉签有太大的恐惧感,不然反而会耽误检测的进度。