⑴ 芽孢杆菌活性如何检测
把菌株接种到营养琼脂平板或者液体培养基中,30度左右培养一段时间,假如平板上长出菌落或者液体培养基变浑浊(因为培养基中含菌体较多),那就说明没失活啊。
⑵ 芽孢细菌若不通过芽孢染色法,在显微镜下如何识别
一、目的要求
学习并掌握芽孢染色法。
二、基本原理
芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低,着色、脱色均较困难,因此,当先用一弱碱性染料,如孔雀绿(malachite green)或碱性品红(basicfuchsin)在加热条件下进行染色时,此染料不仅可以进入菌体,而且也可以进入芽孢,进入菌体的染料可经水洗脱色,而进入芽孢的染料则难以透出,若再用复染液(如番红液)或衬托溶液(如黑色素溶液)处理,则菌体和芽孢易于区分。
三、器材
枯草芽孢杆菌,蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),生孢梭菌(Clostridium sporogenes);
孔雀绿染液,番红水溶液,苯酚品红溶液,黑色素溶液等。
四、操作步骤
方法1、
(1)将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌,作涂片、干燥、固定。
(2)滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。
(3)用木夹夹住载玻片在火焰上加热,使染液冒蒸汽但勿沸腾,切忌使染液蒸干,必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5分钟。这一步也可不加热,改用饱和的孔雀绿水溶液(约7.6%)染10分钟。
(4)倾去染液,待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。
(5)用番红水溶液复染1分钟,水洗。
(6)待干燥后,置油镜观察,芽孢呈绿色,菌体呈红色。
方法2、
(1)取二支洁净的小试管,分别加入0.2ml无菌水,再往一管中加入1—2接种环的蜡状芽孢杆菌的菌苔,另一管中加入1—2接种环的生孢梭菌的菌苔,两管各自充分混合成浓厚的菌悬液。
(2)在菌悬液中分别加入0.2ml苯酚品红溶液,充分混合后,于沸水浴中加热3—5分钟。
(3)用接种环分别取上述混合液2—3环于两片载玻片上,涂薄,风干后,将载玻片稍倾斜于烧杯上,用95%乙醇冲洗至无红色液流出。
(4)再用自来水冲洗,滤纸吸干。
(5)取1—2接种环黑色素溶液于涂片处,立即展开涂薄,自然干燥后,油镜观察,在淡紫灰色背景的衬托下,菌体为白色,菌体内的芽孢为红色。
五、实验报告
1.结果
绘图表示你观察到的两种芽孢杆菌的芽孢在形状、大小、着生位置上有什么不同?
2.思考题
为什么在孔雀绿染色液加热染色中,要待玻片冷却后才能用水冲洗?
⑶ 枯草芽孢杆菌 检测方法
用改良的schaeffer-fulton染色法,方法如下:
1 取一支洁净的小试管,分别加入2-3滴无菌水,再往一管中加入1—2接种环的菌苔,制成浓的菌悬液。2 在菌悬液中分别加入2-3滴孔雀绿溶液,充分混合后,于沸水浴中加热染色15-20分钟,3 用接种环取试管底部菌液于载玻片上,涂薄,过火焰3次温热固定,4 再用自来水冲洗, 5用番红水溶液复染2-3分钟,水洗,自然干燥后,油镜观察,芽孢呈绿色,菌体呈红色。
改良的schaeffer-fulton染色法与schaeffer-fulton染色法区别在于孔雀绿染色过程在试管进行,(schaeffer-fulton染色法是滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上,用木夹夹住载玻片在火焰上加热,使染液冒蒸汽但勿沸腾,切忌使染液蒸干,必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5分钟。)
⑷ 耐热菌、芽孢杆菌检测方法
你说的是鉴定方法吗?
根据菌种特性进行鉴定,耐热菌就加热到特定温度,可以是水浴或者别的方法,然后涂平板,看能不能分离处该菌。芽孢杆菌利用能观察到芽孢的特性,或者也可以用加热的方法。
跑蛋白或这PCR都是不错的方法。
⑸ 求助枯草芽孢杆菌的测定方法
枯草芽孢杆菌的测定方法
枯草芽孢杆菌因具有稳定性好、抗性强、复活率高等自身优势,成为研究和应用较多的菌种之一
快速、简便的定性检测芽孢杆菌的方法
染色基本方法如下:
取微生态制剂样品1g,加入99mL无菌水,充分摇匀,37度 30min
用接环,取菌液,涂于载玻片,风干固定
在涂菌液加入0.076孔雀绿饱和水溶液,染色10分钟后,用水冲洗至无绿色即可,再用0.005品红液染色1min,水冲洗、风干后镜检。
结果判断:芽孢孢子呈绿色,营养体呈红色。
⑹ 用什么方法可以检测和计算芽孢杆菌的总数和芽孢
纳豆芽孢杆菌是一种细菌,使用牛肉膏蛋白胨培养基就可以培养了。我没有太明白你的活菌检测方法是什么意思,芽孢杆菌一般都不太容易死亡。比较好的纳豆芽孢杆菌检测方法就是镜检,使用美兰染色就够了,前期纳豆芽孢杆菌很细很长,菌很多,活力也很好,中期就会慢慢减少,菌体缩短,到了后期就会出现芽孢。另外的检测方法就是接种到大豆上,首先将大豆在水中浸泡10-16个小时,分装到培养皿中,然后灭菌,取出后接种纳豆芽孢杆菌的菌悬液,如果菌的活力够的话,12小时挑看大豆就会出现粘连的细丝,如果没有活菌或者活力不够不会出现或者需要更长时间。希望对你有所帮助
⑺ 枯草芽孢杆菌生长曲线的测定具体应该怎么做
枯草芽孢杆菌生长曲线的测定具体应该怎么做
枯草芽孢杆菌的测定方法
枯草芽孢杆菌因具有稳定性好、抗性强、复活率高等自身优势,成为研究和应用较多的菌种之一
快速、简便的定性检测芽孢杆菌的方法
染色基本方法如下:
取微生态制剂样品1g,加入99mL无菌水,充分摇匀,37度 30min
用接环,取菌液,涂于载玻片,风干固定
在涂菌液加入0.076孔雀绿饱和水溶液,染色10分钟后,用水冲洗至无绿色即可,再用0.005品红液染色1min,水冲洗、风干后镜检。
结果判断:芽孢孢子呈绿色,营养体呈红色。
⑻ 耐热芽孢菌的微生物检测方法
沸水浴10min后平板稀释法计数。
具体方法可参考:
1、方法
(1)用10ml灭菌吸管吸取5ml奶样加入灭菌试管中。
(2)在另一支试管加入与奶样等量的水。
(3)在装水的试管中插一支温度计。
(4)将装有奶样和水的试管同时放入沸水浴中(在电炉上用白瓷缸把水煮沸,并保持沸腾)。
(5)直至“装水试管”的温度达到100℃,计时10分钟(如果水不到100℃就沸腾,则等候时间延长;或在水中加入盐以提供高沸点温度,但要避免奶样沸腾)。
(6)10分钟后,取出试管,用冷水冲,使含奶样的试管冷却。
(7)用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后的奶样于两个灭菌平皿中。
(8)及时将冷却至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml,并转动平皿使之混匀;同时将营养琼脂分别注入加有1ml灭菌生理盐水的平皿和另一个灭菌的空白平皿内,做空白对照。
(9)待营养琼脂凝固后,翻转平板。置于55±1℃的培养箱内培养48-72h,取出计数。
2、计数
同菌落总数测定的计数方法。
⑼ 枯草芽孢杆菌怎么检测他的菌值
随着国家对农业,养殖业、环保等越来越重视,枯草芽孢杆菌的应用越来越广,而且用量日益增大,虽然使用枯草芽孢杆菌的添加量不大,但如果从节约成本的角度上来看,当然是能省则省,作为生产企业,如果学会了枯草芽孢杆菌的检测方法,对于降低枯草芽孢杆菌使用成本是有很大的帮助的。比如我们公司一般按200亿/克的含菌量出售,但我们实际给你的菌数不止200亿/克。说不定是220亿,250亿或更高。如果你拿到手的是250亿/克的。而你原设计的配方是200亿/克的。那么就可以多出50亿/克。这样在用量上就可以减少。成本也就降了不少。或者有些公司以假充好,你采购的是200亿的,结果他却只给100亿的给你。你都可以清楚的判断出来。你是不是心动了呢?想了解枯草芽孢杆菌检测方法是怎么样的呢?
枯草芽孢杆菌检测的国家标准
枯草芽孢杆菌检测要用到的设备
枯草芽孢杆菌检测的注意事项
枯草芽孢杆菌检测的国家标准
行业内的人可能都了解,枯草芽孢杆菌检测的国家标准就是用:《GB20287-2006 农用微生物菌剂》即可。可以在网上搜索一下,如果懒得搜或怕找不到正确的,可以找我们索取,加我QQ:814345728 注明索取枯草芽孢杆菌检测方法。里面内容较多,这里不一一介绍。外行的人很多人其实不知的。甚至有些用错误的标准去检测。这就造成了数据的不准确。
枯草芽孢杆菌检测要用到的设备
枯草芽孢杆菌的检测设备其实也很简单,如果建有试验室的厂家一般都配备有,如果没有,要投资也不用很大。相比使用枯草芽孢杆菌省下来的钱,这些投资是非常少的。具体设备如下:
超净工作台
电子天平
蒸气灭菌锅
三角瓶
刮铲
平皿
酒精灯
总的投资应该在一万块左右吧。主要看你购买的数量,当然。如果购买不方便或采购价格高的话。也可以找我们代购。也是加上面的QQ号。
枯草芽孢杆菌检测的注意事项
枯草芽孢杆菌检测一般人都是检测菌数的含量为主,就是采用国标来检,因为枯草芽孢杆菌分为含芽孢和不含芽孢的菌,所以如果要检测芽孢的含量就需要水浴,目前有些公司就倡导用户直接用水浴方法来检测,这样来证明他们的芽孢率有多高多好,其实这样也不科学的。最好是先正常检测一下菌数,然后再水浴检测芽孢,因为不排除有些菌的杂菌率较高。直接水浴检测不宜测出杂菌等,另外,因为枯草芽孢杆菌是有生命的东西,有生有死。就算测到芽孢率很好,也并不能代表你买到的货就是最好的,有些菌虽然芽孢率很高,但可能含有大量的噬菌体或本来损伤较大,也是很容易死亡的。这样的菌对质量也是影响较大的。为此我们专门设了一个枯草芽孢杆菌的专栏,介绍一些关于枯草芽孢杆菌相关的知识,欢迎您了解更多枯草芽孢杆菌的知识,从而买到高品质的产品。