抗氧化活性检测方法及意义

⑴ 食品中主要的抗氧化剂的检测方法包括哪些

对于生物体的代谢有一种自相矛盾的情况，虽然大部分地球上的生物需要氧气来维持生存，但同时氧气又是一种高反应活性的分子，可以通过产生活性氧物质破坏生物体。所以生物体中建立了一套由抗氧化的代谢产物和酶构成的复杂网络系统，通过有抗氧化作用的代谢中间体和产物与酶之间的协同配合使得重要的细胞成分比如DNA、蛋白质和脂类免受氧化损伤。抗氧化系统大体上通过两种方式实现抗氧化作用，一种是通过阻止活性氧物质的产生来实现的，另一种是在这些活性物质对细胞的重要成分造成损伤之前清除它们来达到抗氧化作用的 。然而这些活性氧物质也有重要的细胞功能，比如在生化反应中充当氧化还原信号分子。因此生物体中抗氧化系统的作用不是氧化性物质彻底地全部清除，而是将这些物质保持在适当的水平。
在细胞内产生的活性氧物种包括过氧化氢(H2O2)、次氯酸(HClO)、自由基例如羟基自由基(·OH)和超氧化物阴离子(O2) 。羟基自由基特别不稳定，能无特异性地迅速与大多数生物分子反应。这类物种主要是由金属催化过氧化氢还原（比如芬顿反应）产生的 。这些氧化剂通过引发链反应比如脂质的过氧化反应、或氧化DNA和蛋白质破坏细胞。受到损害的DNA如果没有得到修复会引起突变、诱发癌症。对蛋白质造成的损伤会使酶的活性受到抑制、蛋白质发生变性或降解。

⑵ 食物抗氧化性的测定

抗氧化活性实验方法（体外实验）

1、清除DPPH自由基能力的测定
称取一定量的DPPH，用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。分别取2mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液，加入2mL DPPH溶液，混合均匀，室温放置30min后，5000r/min离心10min。取上清液于517nm处测吸光值。用Vc作为阳性对照。样品对DPPH自由基的清除率用以下公式计算：

2、总还原能力的测定
在10mL离心管中分别加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸缓冲液2.5mL和不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液1mL，加入2.5 mL 1%铁氰化钾，混合均匀后于50℃反应20min。取出后加入2.5mL 10%三氯乙酸终止反应，5000r/min离心10min。取上清液2.5mL，加入2.5mL蒸馏水和0.5mL FeCl3，混匀后静置10min，在700nm处检测吸光值。Vc作为阳性对照。

采用邻苯三酚自氧化法测定。取50mmol/L Tris-HCl缓冲液（pH8.2）4.5mL，置25℃水浴中保温20min，分别加入1mL样品溶液和0.4mL 25mmol/L邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应5min，加入1mL 8mmol/L HCl终止反应，于299nm处测定吸光度（Ax），空白对照组以相同体积蒸馏水代替样品。按下式计算O2-清除率：

A0—空白对照液的吸光度； Ax—加入样品溶液后的吸光度；
Ax0—不加显色剂H2O2样品溶液本底的吸光度。

⑶ 评价抗氧化效果的指标有哪些各有何特点

1. 清除自由基的能力（可重复性强，自由基种类多使用的范围广）

2. 对脂类的氧化抑制能力（适用于氧化过程初始阶段）

3. 铁离子的还原能力反映样品抗氧化能力（快速简便，可用于天然抗氧化剂）
   

⑷ 番茄红素抗氧化性研究的意义

番茄红素抗氧化性研究的意义在于：番茄红素是目前已知的最有效的抗氧化活性物质之一，其抗氧化能力是β胡萝卜素的3.2倍，更是维生素E的100倍。科学研究已经证实，它具有延缓衰老、抑制肿瘤，提高人体免疫力，减少心血管疾病及预防癌症等多种功效。
一、 抗氧化作用
人们细胞的老化、损伤和DNA突变都和自由基作用有关。现代科学技术表明，番茄红素能够通过物理和化学方式淬火单线态氧，捕捉过氧化自由基。虽然多数类胡萝卜素都是有效的抗氧化剂，但番茄红素猝灭单线态氧的活性最强。
二、 保护心血管疾病
由于番茄红素能够保护低密度脂蛋白免受氧化破坏，因而有可能预防心血管疾病的发生，荷兰学者对心肌梗塞患者的检查中发现病人的番茄红素含量低于健康人，而且α和β胡萝卜素含量也比正常人体显着降低，说明这几种胡萝卜素都与心肌梗塞的发生密切相关。
三、 抗辐射，抑制癌症和肿瘤
以色列的班古瑞安大学和索罗卡医学中心的研究员指出，番茄红素可抑制乳癌、肺癌及子宫内膜癌细胞的生长。更值得注意的是，给实验室的动物服用强力致癌物后再给予高剂量的番茄红素，可帮助抑制他们体内癌肿瘤的生长，而且剂量越高，抗癌的功效就越强。番茄红素对于香烟烟雾中的化学致癌物尤其有效。最近还有一项研究指出，番茄红素能保护皮肤不受紫外线的光线伤害，避免了皱纹、甚至皮肤癌的形成。

⑸ ABTS+测抗氧化性原理是什么

ABTS+测抗氧化性原理是通过漆酶氧化ABTS的速率来决定漆酶酶活力的大小。

2
,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐，如果与过二硫酸钾反应，可以生成绿色的ABTS自由基。该自由基在734nm有最大吸收，所以，通过检测734nm的吸光度，可以测定的其浓度。

一个物质加入到ABTS自由基溶液后，如果734nm的吸光度降低，则说明该物质具有自由基清除活性，属于抗氧化剂。该法称为ABTS自由基清除法，可以用评价植物（或中草药抽提物）、纯化合物的抗氧化能力的。

此外，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

(5)抗氧化活性检测方法及意义扩展阅读

以ABTS（7mmol, 10 equiv.）+K2S2O8(4.9mmol, 7
equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合，避光情况下储存12-16h，第二天以乙醇稀释40-60倍，摇匀，静置5min，放入比色皿中测734nm的吸光度（0.7左右）。

测试吸光度随时间变化关系，时长为30min，发现吸光度有很明显的下降，30min大概降到0.45左右，换做水稀释时，吸光度下降更为严重，30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力，这种情况势必严重干扰结果。

不过，ABTS自由基的生成需要过二硫酸钾氧化，所以，是一个混合物。而且，反应通常需要12小时，比较耗时。采用PTIO自由基替代ABTS自由基进行实验，取得不错的实验结果。PTIO自由基不需要氧化，可以现成的化学品溶于水配制，另外，由于反应是在水溶液或者缓冲液中进行，具有更强的生物相关性。

⑹ 抗氧化是什么

Anti-Oxidant——抗氧化
氧化是肌肤衰老的最大威胁，日晒、压力、环境污染等都能让肌肤自由基泛滥，从而产生面色黯淡、缺水等氧化现象。都是身体产生氧化的“罪魁祸首”。所以无论从健康层面还是从护肤层面，我们都需要在日常生活中注意抗氧化。
人体的抗氧化物质有自身合成的，也有由食物供给的。酶和非酶抗氧化物质在保护由于运动引起的过氧化损伤中起至关重要的作用。补充抗氧化物质有利于运动机体减少自由基的产生或加速其清除，以对抗自由基的副作用，因而对一般人和运动员的健康都有益，可能延缓运动性疲劳发生和加快体能恢复。年龄大的体力活动者比年轻者服用抗氧化剂效果更好。
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产生氧化的原因
抗氧化抗氧化不仅仅是身体内的环保，现在连脸部肌肤也要开始进行抗氧化工作。简单的说，脸部的抗氧化就是将青春留在脸上，并且屏除外在环境，比如紫外线、脏污空气等对皮肤的伤害，再加上年龄的自然老化，让岁月不会在脸上留下明显的痕迹。
每天的生活中，有太多会加速肌肤细胞氧化的可怕杀手，手机、电磁波、紫外线、空气污染、油炸食物及压力等。真正健康的保养观念，必须加入修复因素，也就是抗氧化的因素；在日常的肌肤保养品中，加入抗氧化效果的产品，会使肌肤的保养更向上提升。一般来说，除了借由饮食之外，保养品也有助于脸部抗氧化工作的进行，除了定期的清洁之外，运用加强保湿的产品，或是在重点部位如眼部周围等进行保养，防止肌肤松弛、老化，进而达到抗氧化的成效。
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抗氧化物质
（1） 维生素E
维生素 e是细胞膜内重要的抗氧化物和膜稳定剂。维生素e在维持肌肉组织的正常机构和代谢，特别是在肌肉收缩期间的能量供给和钙离子摄取和释放有着重要的作用。补充维生素 e（400～1,600国际单位/天）可减少由大强度运动或其它情况引起自由基增加对机体的损伤。在高于海平面时，补充维生素 e可防止运动能力的降低。因此，认为在高于海平面训练的运动员补充维生素 e有利于运动成绩的提高。推荐每天补充（d-α-生育酚）维生素e的剂量为： 400～800国际单位。
（2） 维生素 C
维生素 c缺乏可大大降低耐力运动能力。补充维生素 c可明显降低运动诱导的氧化应激。补充维生素c的安全剂量是0.5～3.0克/天。推荐每天补充维生素c的剂量为0.5～2.0克。
（3） 硒
硒是机体抗氧化系统组成成分谷胱甘肽过氧化物酶的必需成分，适当补硒可提高谷胱甘肽过氧化物酶活力，从而提高机体的抗氧化能力。有人报道给游泳运动员每天补充硒100～150微克可减少体内脂质过氧化，提示补硒对耐力运动员可能有益。建议的补硒剂量为每天100～250微克。常用补硒制剂：新稀宝、硒维康。
（4） β－胡萝卜素
β－胡萝卜素是维生素a的前体，具有清除自由基的功能，所以β－胡萝卜素对运动时的氧化应激有保护作用。推荐的β－胡萝卜素补充量是每天25,000－100,000国际单位。
（5） 辅酶q10
辅酶q是机体中要使用氧的所有细胞的必需成分，因为它是物质氧化产生能量的过程中的氧化磷酸化呼吸链的电子传递体，运动中能量的需求大大增加，所以辅酶q10可减少人心脏和肌肉自由基生成。对于要维持身体健康的人来说，辅酶q的推荐使用量为每天 30毫克，如果用治疗各种疾病，所使用的量就要高于这一剂量。
（6） 番茄红素
番茄红素是近几年国际上最新发现的一种更强有力的抗氧化剂。它如同β－胡萝卜素，属胡萝卜素类物质，在大多数水果和蔬菜中可以找到，是一种天然的生物色素。由于它具有独特的化学结构，所以可以消除自由基，尤其是氧自由基。据报道番茄红素提高机体免疫机能的作用比维生素e强100倍。

（7）SOD
SOD是Super Oxide Dimutese缩写，中文名称超氧化物歧化酶，是生物体内重要的抗氧化酶，广泛分布于各种生物体内，如动物，植物，微生物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标；现已证实，由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力，环境污染，各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成；因此，生物抗氧化机制中SOD的地位越来越重要！
（ 8）天然虾青素
天然虾青素是迄今为止人类发现自然界最强的抗氧化剂，其抗氧化活性远远超过现有的抗氧化剂。虾青素（astaxanthin在港台地区又称为虾红素）是一种红色素，可以赋予观赏鱼、三文鱼、虾和火烈鸟粉红的颜色。其化学结构类似于 β -胡萝卜素 。虾青素是类胡萝卜组的一种。也是类胡萝素合成的最高级别产物， β -胡萝卜素、叶黄素、角黄素、番茄红素等都不过是类胡萝卜素合成的中间产物，因此在自然界，虾青素具有最强的抗氧化性。
其清除自由基的能力是：
天然VE的1000倍，
天然 β - 胡萝卜素的10倍，
葡萄籽的17倍，
黄体素的200倍，
OPC的150倍，
Q10的60倍，
只有藻类和酵母菌和细菌等可以产生虾青素，更高等的动物不能转化出这种化学结构。
天然虾青素还有一个明确的特点是唯一能通过血脑屏障的一种类胡萝卜素
总之，体力活动尤其是急性大强度运动时体内自由基产生增加，并且形成链式反应引起膜结构等损伤。虽然众多的研究结果不一致，有关体力活动者补充抗氧化剂尚有大量的问题需要阐明，但现有证据均支持运动后服用抗氧化剂。慎重应用抗氧化剂对膳食不足和 /或体力活动（运动）时需求增加有益。
值得注意的是，自由基作为人体自然免疫系统的一部分发挥着有益的作用。长期滥用抗氧化剂可能有损自由基的正面作用。因此，补充抗氧化物质前要了解运动人体的抗氧化状态，所用的剂量要适度，最好在运动营养师或医师的指导下服用。
目前，国内一些运动保健饮（食）品含有一些抗氧化物质，具有一定的抗氧化作用，如沙棘制剂、弥猴桃汁、酸枣汁、等含有维生素c，梅参等运动饮料含生物活性物质绞股蓝，还有多种中药保健品，如长白景仙灵口服液、益寿回春汤等也具有抗氧化的作用，它们有的可以减少血液中mda的含量，有的可维持血还原型谷胱甘肽含量或谷胱甘肽过氧化物酶活力，这都是一些很好的阻止自由基损伤运动人体的天然制剂。
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抗氧化效果的评价方法
抗氧化不仅仅是一个概念，对生物体抗氧化的效果是可以量化测定的，作为动物实验一般是服用抗氧化剂一定时间后，测定血液中的酯质过氧化产物丙二醛变化、以及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX的活力变化。从上述两种酶和MDA的变化状况来判定抗氧化的强度及效果。作为人体不可能测肝脏匀浆，可以测定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXH-PX来判定抗氧化的效果。
食物中氧化剂长期以来倍受国内外学者关注，这是因为①食物中抗氧化剂能够保护食物免受氧化损伤而变质②在人体消化道内具有抗氧化作用，防止消化道发生氧化损伤@吸收后可在机体其他组织器官内发挥作用④来源于食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作为治疗药品。抗氧化剂的作用机理包括鳌合金属离子、清除自由基、淬灭单线态氧、清除氧、抑制氧化酶活性等
体外评价抗氧化的方法
虽然很多，但主要基于两类一个是通过测定样品抑制脂类物质氧化的能力来评定被测物的抗氧化能力另一个是用样品对人工合成的自由基的清除能力来反映待测物的抗氧化活性。抗氧化剂在食品和生物体系中的抗氧化活性受很多因素的影响，其中主要包括抗氧化剂在水相和油相间的分配效应，氧化条件和环境，被氧化底物物理状态等。
1．抗油脂过氧化力测定
脂类包括的范围很广，是构成生物膜的主要成分，脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化，脂类过氧化过程中会产生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH，这些产物会损伤生物细胞。因此，能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。
A硫氰酸铁法FTC：硫氰酸铁盐(FTC)比色法是基于在酸性条件下，脂质氧化形成的过氧化物可将Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+与硫氰酸根离子可形成在480-515nm内有最大吸收的红色络合物。通常用500nm处吸光值的高低表示物质抗脂质过氧化的能力，吸光值越小，表明物质的抗脂质过氧化能力越强。
B硫代巴比妥酸反应物TBARs法：是评价油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亚油酸氧化后的终产物主要是丙二醛，这些过氧化产物与硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，该有色化合物在530 nm左右有吸收。
2．清除2，2一二苯代苦味阱DPPH能力的侧定
DP是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果
3．还原能力的测定
还原力的测定是检验样品是否是良好的电子供体的方法，还原力强的样品应该是良好的电子供应者，它供应的电子不仅能使Fe3+还原为Fe2+，也可以与自由基反应。还原力的测定是用来评价抗氧化剂活性的常用方法。
4．抑制 LOX酶实验
脂肪氧化酶LOX在植物中分布广泛是一种非血红素铁蛋白，分子量为90一100KD。这种酶蛋白有多个多肤链组成，含有三价铁离子金属辅基则有活性，而包含二价铁离子的金属辅基则缺乏活性。在生物体内的主要作用是，专一催化含有顺，顺一戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸的加氧反应，生成具有共扼双键的多元不饱和脂肪酸的氢过氧化物。在生物体内的主耍底物是甘油脂类〔如磷脂）释放的游离不饱和脂肪酸，其中动物体内的主要底物是花生四烯酸，植物体内的主要底物是亚油酸和亚麻酸，主要产物为过氧羚基型脂肪酸
上述方法是抗氧化剂的应用效果的体、内外测定评价方法。

⑺ 有哪些方法可以评价抗氧化剂的活性

可以评价抗氧化剂的活性的方法：
抗氧化 -评价方法 ORAC

ORAC是（氧化自由基吸收能力）的缩写，是一种测试抗氧化能力的评价方法体系。
既然科学已证明抗氧化对人体的重要性，那么对抗
氧化效果进行量化是一个迫切需要解决的问题。只有抗氧化效果可以被量化，才能使企业研发出更好的产品、获得政府的认可、向消费者证明其产品抗氧化的有效性。
在ORAC方法未推出之前，因为抗氧化测试的极其复杂性，商业界（极其复杂的实验方案不可能被商业界所应用，当时一个严谨的抗氧化实验往往需要几个月，且费用巨贵，是商业界无法接受的）无法有效、全面的测试出样品的抗氧化力，然而商业是科技创新的动力，就像苹果公司。
ORAC抗氧化测试包括对：过氧化自由基（含亲水性、亲脂性）、羟基自由基、过氧亚硝基、单线态氧、超氧阴离子这五种人体最主要的活性氧自由基进行全面的分析，能有效得出样品的抗氧化实际能力及分布情况。
ORAC抗氧化生物测试是比普通抗氧化测试的更高一层的测试方案。利用人体细胞有效测试出样品的抗氧化力（生物利用度）。
ORAC已被美国AOAC评定为抗氧化测试标准方法，是国际主流测试方法。

其他评价方法
抗氧化不仅仅是一个概念，对生物体抗氧化的效果是可以量化测定的，作为动物实验一般是服用抗氧化剂一定时间后，测定血液中的酯质过氧化产物丙二醛变化、以及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX的活力变化。从上述两种酶和MDA的变化状况来判定抗氧化的强度及效果。作为人体不可能测肝脏匀浆，可以测定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXH-PX来判定抗氧化的效果。
食物中氧化剂长期以来倍受国内外学者关注，这是因为：
①食物中抗氧化剂能够保护食物免受氧化损伤而变质。
②在人体消化道内具有抗氧化作用，防止消化道发生氧化损伤。
③吸收后可在机体其他组织器官内发挥作用。
④来源于食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作为治疗药品。抗氧化剂的作用机理包括鳌合金属离子、清除自由基、淬灭单线态氧、清除氧、抑制氧化酶活性等。
体外评价方法
虽然很多，但主要基于两类一个是通过测定样品抑制脂类物质氧化的能力来评定被测物的抗氧化能力另一个是用样品对人工合成的自由基的清除能力来反映待测物的抗氧化活性。抗氧化剂在食品和生物体系中的抗氧化活性受很多因素的影响，其中主要包括抗氧化剂在水相和油相间的分配效应，氧化条件和环境，被氧化底物物理状态等。
1．抗油脂过氧化力测定
脂类包括的范围很广，是构成生物膜的主要成分，脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化，脂类过氧化过程中会产生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH，这些产物会损伤生物细胞。因此，能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。
A硫氰酸铁法FTC：硫氰酸铁盐(FTC)比色法是基于在酸性条件下，脂质氧化形成的过氧化物可将Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+与硫氰酸根离子可形成在480-515nm内有最大吸收的红色络合物。通常用500nm处吸光值的高低表示物质抗脂质过氧化的能力，吸光值越小，表明物质的抗脂质过氧化能力越强。
B硫代巴比妥酸反应物TBARs法：是评价油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亚油酸氧化后的终产物主要是丙二醛，这些过氧化产物与硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，该有色化合物在530nm左右有吸收。
2．清除DPPH能力的侧定
DP是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。
3．还原能力的测定
还原力的测定是检验样品是否是良好的电子供体的方法，还原力强的样品应该是良好的电子供应者，它供应的电子不仅能使Fe3+还原为Fe2+，也可以与自由基反应。还原力的测定是用来评价抗氧化剂活性的常用方法。
4．抑制LOX酶实验
脂肪氧化酶LOX在植物中分布广泛是一种非血红素铁蛋白，分子量为90一100KD。这种酶蛋白有多个多肤链组成，含有三价铁离子金属辅基则有活性，而包含二价铁离子的金属辅基则缺乏活性。在生物体内的主要作用是，专一催化含有顺，顺一戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸的加氧反应，生成具有共扼双键的多元不饱和脂肪酸的氢过氧化物。在生物体内的主耍底物是甘油脂类〔如磷脂）释放的游离不饱和脂肪酸，其中动物体内的主要底物是花生四烯酸，植物体内的主要底物是亚油酸和亚麻酸，主要产物为过氧羚基型脂肪酸。
上述方法是抗氧化剂的应用效果的体内、外测定评价方法。

⑻ 食品抗氧化活性测定的意义，抗氧化活性与食品哪些成分有关

下午好，食品抗氧化剂按照溶解性不同，可以分为水溶性和溶剂型（油溶性）两种。水溶性代表是诸如三聚磷酸钠、DL-抗坏血酸钠和亚硝酸钠等等有机盐，油溶性代表是BHT、BHA和蓖麻油葵花籽油等等。一说还有兼容性的抗坏血酸棕榈酸酯，它可以水油两溶，其实一水柠檬酸、D-抗坏血酸和D-苹果酸也是亲水亲油的。有少数极特殊的纯天然植物和动物提取物除外，比如虾青素、番茄红素和辣椒红素以及壳聚糖，它们属于需要特殊ph值才能溶解正常情况下水和有机溶剂都不是很好溶的。请参考。

⑼ 黄酮抗氧化性活性的测定方法有哪些

1 抗氧化活性的化学评价方法
1. 1 FRAP 法
1. 2 TEAC 法
1. 3 DPPH 法
1. 4 ORAC 法
1. 5 TRAP 法
1. 6 TOSC 法
1. 7 F - C 法
2 抗氧化活性的生物评价方法
2.1CAP - e 法
2.2CAA 法