苏木检测方法

Ⅰ 检测细胞增殖的方法有哪些

一、MTT比色：
MTT比色是一种目前被广泛采用的检测细胞生长和存活的方法，其原理是外源性MTT（四唑盐）可被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原成难溶的蓝紫色结晶物并沉淀在细胞中，而死细胞无此功能，DMSO（二甲基亚砜）能溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联检测仪在490nm波长处检测其光密度值，可间接反映活细胞数量。在一定范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比，此方法已广泛用于检测细胞活力、观察细胞生长等方面，具有灵敏度高、重复性好、操作简便、经济、快速、易自动化、无放射性污染等特点，与细胞计数有良好的相关性。
二、rdU标记法
1．细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中（内放置一盖玻片），培养1天，用含0.4％ FCS培养液同步化3天，使绝大多数细胞处于G0期。
2．终止细胞培养前，加入BrdU（终浓度为30μg/L），37℃，孵育40min。
3．弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。
4．甲醇/醋酸固定10min。
5．经固定的玻片空气干燥，0.3％H2O2-甲醇30min灭活内源性氧化酶。
6．5％正常兔血清封闭。
7．甲酰胺100℃，5min变性核酸。
8．冰浴冷却后PBS洗涤，加1抗即抗小鼠BrdU单抗（工作浓度1：50），阴性对照加PBS或血清。
9．按ABC法进行检测，苏木素或伊红衬染，在显微镜下随机计数10个高倍视野中细胞总数及BrdU阳性细胞数，计算标记指数（LI）。
三、结晶紫法
1．体外细胞培养结束后，去培养液，加入11％的戊二醛固定，置于振荡器上摇20min。
2．固定细胞用去离子水洗涤至戊二醛液洗净。
3．置空气或烘箱37℃彻底干燥。
4．加入0.1％的结晶紫液对细胞染色，振摇30min。
5．用蒸馏水洗涤，至多余的结晶紫液冲洗干净。
6．置空气或37℃烘箱中彻底干燥。
7．加入10％的乙酸对细胞吸收的结晶紫进行提取。
8．1h后在酶标仪上测定光吸收度，波长595nm。
四、酸性磷酸酶法
1．96孔细胞培养板中培养细胞，去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次（如为悬浮细胞则用离心洗涤）。
2．去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。
3．37℃，孵育1～4h。
4．加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。
5．在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度，将细胞培养板其中不含细胞，同样处理过的一孔作为空白对照，所测的每孔光吸收度可间接反应每孔中的细胞数。如在同样条件下作一细胞数的系列标准对照，以细胞数为X轴，光吸收度为Y轴，可作直线回归，可推算出每孔中的细胞。

Ⅱ 免疫组织化学sp法和pv法的区别

一·第二代聚合酶两步法（ PV，En Vision)
PV－9000是2001年投入美国市场的，它是将二抗抗体分子的单价Fab段与酶聚合在一起，与一抗结合后，直接用底物进行显色的方法。此方法由于简单、快速、敏感性强且避免了内源性生物素所造成的背景染色，以有逐渐取代其他免疫酶组织化学检测方法的趋势。
PV法操作流程
1石蜡切片脱蜡至PBS。
2 0.3％H2O2甲醇液或3％H2O2室温孵育20min。
3 抗原修复。
4滴加适当稀释的一抗370C 60min或40C过夜。
5 PBS洗涤。
6 酶标记二抗370C 30min或室温60min。
7 DAB(0.04%)显色（镜检控制），水洗、复染、封片

二·sp法是一抗＋生物素化二抗＋HRP标记的链霉卵白素（HRP标记的亲和素）
一般的sp法步骤啊,具体如下：
1.烤片，68℃，20分钟,
2. 常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水；二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min
3.阻断 灭活内源性过氧化物酶：3%H2O2 37℃孵育10min，PBS冲洗3X5min；
4. 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液（PH 6.0）中用煮沸（95℃，15－20min），自然冷却20min 以上，再用冷水冲洗缸子，加快冷却至室温，PBS冲洗3X5min。
5. 正常羊血清工作液封闭，37℃10 min，倾去勿洗.
6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育过夜，PBS冲洗3X5min（用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照）；
滴加生物素标记二抗, 37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min;
7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min;
8. DAB/ H2O2反应染色，自来水充分冲洗后，
苏木素复染，常规脱水，透明，干燥，封片。

三·检测试剂盒
灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为理想也是免疫组化染色优劣的关键，根据免疫组化技术发展至今PV系列及SP试剂盒更优于其它试剂盒。检测系统应与一抗来源相匹配，否则检不出目的物。如一抗是鼠单或多抗的，二抗就应该是羊或兔抗鼠的。

四·建议选SP，亦可根据实验室习惯及在组织中的表达情况来定

Ⅲ 中药质量检测新技术有那些

（一）性状鉴别

性状鉴别，就是人们对药材的形、色、味、大小、质地、断面等特征，采用眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等简单的物理、化学反应，直接感观药材，作出符合客观实际的结论，区分药材真、伪、优、劣的方法。它具有简单、易行、迅速的特点。这个方法，是几千年劳动人民同疾病作斗争中总结出来的宝贵经验。

各类药材的性状虽然有一定的共同点。但是，各种药材由于来源不同，组织结构也有差异，所含化学成分也不一样。因此，在性状上就各有一定的特异点，药材鉴别工作也是首先采用性状鉴别这个方法，通常照中国药典或地方药品标准及有关中药书籍中所描述的性状特征，就能比较正确地鉴定药材。

性状鉴别，通常从以下方面进行：

1、形状：一种药材的外形特征，一般是较为固定的。如圆柱形、纺锤形、鸡爪形、拳形、圆块状等。对有些品种老药工使用很形象的语言来表述药材外形的特征。如海马称为：“马头、蛇尾、瓦楞身”。野山参为“马牙芦、灯草芯、枣核艼、铁丝纹、落肩膀、细结皮、少数腿、珍珠尾”。蕲蛇为“翘鼻头、方胜纹、连珠斑、佛指甲。”防风为“蚯蚓头”。川贝称为“怀中抱月”等。又如以马兜铃状如马脖子上下垂的铃铛。马鞭草穗状如花序细长，形如马鞭。木鳖子扁平圆板状，形如鳖。瓦楞子如同房上瓦片（射放肋），凤尾草孢子叶片一回羽状复叶，下部羽片2-3分叉，羽片和小羽片呈长条形，状如凤尾。佛手果实具3-5个手指状的裂瓣。冬虫夏草虫体似蚕，头部子座细长圆柱形等。

在观察性状时，除少数鲜药材如生姜、地黄、石斛、芦根、薄荷等外，性状的观察应是干燥药材。易破碎药材如全草、叶类、花类等性状以完整的药材为主。

2、大小：药材的大小（指长短、粗细、厚薄），一般有一定的幅度。如测量大小与规定有差异时，应测量较多的样品，可允许有少量高于或低于的数值。

（1）选择有代表性和大多数的常见的药材进行测量，特大、特小的可以不概括。

（2）大小一般用厘米(cm)表示，细小的用毫米(mm)表示。

（3）一般习惯测量时，根、茎、果实称作长、直径。鳞茎称作高、直径。皮称作长、宽、厚。种子称作长、宽或直径。

药材的大小除了表明特定的长短、薄厚、粗细外，主要表现在中药材这个特殊商品的质量、规格、等级的划分上。例如：

甘草：大草：长25-50cm，顶端直径2.5-4。

条草：一等：长25-50cm，顶端直径1.5以上。

二等：长25-50cm，顶端直径1cm以上。

三等：长25-50cm，顶端直径0.7cm以上。

草节：一等：长6cm以上，顶端直径1.5cm 以上。

二等：长6cm以上，顶端直径0.7以上。

杜仲：一等：70-80cm，宽50cm，厚0.7以上。

二等：长70-80cm，宽40cm，厚0.5cm以上。

三等：长宽大小不分，厚在0.3cm以上。

四等：长宽大小不分，厚在0.29cm以下。

3、色泽：是指药材表面的颜色和光亮程度。商品药材的色泽一般是固定的，色泽的变化与药材的质量关系很大，可以反映出药材的真伪和质量的好坏。如药材品种不同，加工条件变化，贮藏时间长短或加工不当等就会改变药材的固有色泽，也表示药材质量的降低。

在观察颜色时，药材应是干燥品，不要在有色光下进行，最好在白天的自然光线下或日光灯下进行。对于颜色的描述，以质量好的在前，如枸杞子呈鲜红色或暗红色，表明鲜红色的枸杞子为佳；以色浅的在前，如牛黄表面呈金黄色或棕黄色等；如果是用两种色调复合的描述，以色强的和后一种颜色为主，如黄棕色，即以棕色为主，如阿胶呈棕黑或乌黑色等。关于颜色的描述举例如下：

红：朱砂：鲜红色或暗红色，有光泽。

红花：红黄色或红色。

丹参：棕红色或暗红色。

紫：紫苏叶：两面紫色或上表面绿色，下表面紫色。

紫草：表面紫红色或紫褐色。

紫石英：紫色或绿色。

黑：黑胡椒：表面黑褐色。

黑芝麻：表面黑色。

墨旱莲；表面墨绿色。

乌梅：表面乌黑色或棕黑色。

黄：川黄连：表面灰黄色或黄褐色，皮部橙红色，木部鲜黄色。

川黄柏：外表面黄褐色或黄棕色，内表面暗黄色。

姜黄：表面深黄色。

白：白芷：断面白色或灰白色。

白藓皮：外表面灰白色，内表面类白色。

白芨：表面灰白色或黄白色。

山药：表面黄白色，断面白色。

褐：赭石：表面暗棕红色或灰黑色。

蓝：青黛：深蓝色。

杂色：五花龙骨：淡灰白色，淡黄白色或淡黄棕色，夹有蓝灰色及红棕色深浅不同的花纹。对光泽的描述，一般采用形象比喻的方法。如石膏：绢丝光泽。自然铜：金属光泽。大青盐：玻璃样光泽。珍珠：彩光闪耀。元胡：具蜡样光泽。花蕊石：具闪星状亮光。青礞石：断面可见闪光星点。金礞石：带有闪烁的金黄色光泽。雄黄：断面具树脂样光泽，晶面有金刚石样光泽。

4、表面：是指药材外表面或内表面的具体特征。药材的表面特征是不一样的，如光滑、粗糙、皮孔、皱纹等。单子叶植物根茎及球茎节上的膜质鳞叶，根痕。蕨类植物的鳞片、毛等。这些特征的有无和程度，常是鉴别药材的主要特征之一。如枇杷叶的毛，苍耳子的刺，黄连的鳞叶，黄柏的栓皮，厚朴的皮孔，乌海的皱纹纹理，王不留的雕纹，苏子的网纹，大黄、首乌的绵纹、星点，天麻的鹦哥嘴（红色芽）、圆脐疤、点状环，白芷具有突起的皮孔和疙瘩状根痕。

5、质地：指药材的软硬、坚韧、疏松、轻重、粘性或粉性等特征，常用的术语很多。松泡：表示质轻而松，如南沙参（泡参），泡而松。灯芯草，松花粉质轻。粉性：表示含大量的淀粉，如山药、天花粉。粘性：表示具粘液质，如鲜石斛，折断面显粘性，干时，则嚼之显粘性，天冬柔润具粘性。柔润：表示柔软而润泽，如当归、玉竹。油润：具有油性，如柏子仁等。角质：表示含多量淀粉因加工糊化，如半透明，如郁金、天麻等。坚韧：表示质坚韧不易折断，如丝瓜络、桑白皮。其他如质重的朱砂，十黄九糠的大黄，糟皮粉茬的丹皮，心枯朽的黄芩等。

6、断面：指药材折断面所具有的特征，如自然折断面，破碎面，横断面等。观察折断时的现象，如有无粉末飞扬、响声、折断的难易等。折断面的平坦、粗糙、颗粒性、纤维性、胶丝以及层层剥离等情况。此法主要用于皮类，长条状的根及根茎类，藤、枝类药材的鉴别。

用刀横切（或削）成平面，观察皮、木两部的比例、色泽、射线与维管束的排列形式。如菊花心（黄芪），车轮纹（粉防己）和棕色小点（油室或油细胞）等特征。以下举几个例子如：九节菖蒲：断面白色粉性，可见淡黄色小点（维管束）6-9个排列成环。大黄：断面淡红棕色或黄棕色，根茎髓部宽广，颗粒状，有星点环列或散在，根木部发达，具放射状纹理。天麻：断面平坦，黄白色至淡棕色，角质样。元胡：断面黄色，角质样，有蜡样光泽。木贼：断面中空，周围有多数圆形小空腔，排列成环。珍珠：破碎面现层纹。牛黄：断面色浅，可见密细腻的同心层纹。首乌：断面红棕色，皮部有4-11个类圆形的异型维管束环列。

7、味：是中药鉴别采用最早方法之一，从古至今，把尝味当作中药鉴别的重要手段之一。药材的味，与药材的成分、质量关系很大。有些药材的味是衡量品质的标准之一，如乌海、木瓜、山楂以味酸为好。药材的味与其所含成分及含量有密切的关系。药材的味一变，就要考虑其品种与质量的优劣等问题。每一种中药都有它的味的特性，例如：

淡：石膏

酸：乌梅、山楂、木瓜

甘：龙眼肉、党参、桂圆肉

麻：细辛

辛、辣：干姜

刺喉：半夏、南星

咸：大青盐

苦：龙胆、鸦胆子、黄连、穿心莲

五味：五味子

涩：五倍子

苦涩：大黄

苦而回甜：牛黄、熊胆

吸舌：龙骨、竹黄

粘性：黄精、玉竹、茯苓

凉：薄荷、冰片

砂砾感：大黄、地枫

在尝药材时，应注意下列问题。

（1）取样要有代表性。因为药材的各部分味道可能不同，例如：果实的果皮与种子，树皮的外侧与内侧，根的皮部和木部等。

（2）取具有代表性的样品，放在口里嚼至少一分钟，才能准确的尝出味来。因为舌尖部只对甜味敏感，而对苦味敏感的是接近舌根部分，咀嚼一分钟后，再使舌头的各部分接触到药液，这样才能准确的尝到药味。

（3）对具有强烈的刺激性和毒性药，口尝时要特别小心，取样不能太多，尝后一定要吐出来，并用水嗽口，洗手，以免中毒，如草乌、白附子、狼毒、半夏等。

8、水试：利用某些药材在水中的比重和特殊变化，作为鉴别特征之一。例如，西红花用水泡后，水变金黄色，花不退色。苏木投入热水中，呈鲜艳的桃红色透明溶液，加酸（或醋）则溶液变为黄色，加碱（或石灰水）溶液则变红色。熊胆粉末投入清水杯中，可逐渐溶解而盘旋，有黄线下垂至杯底，且不扩散。小通草（旌节花科），南天仙子（爵床科）遇水显粘性。蟾酥遇水后呈乳白色。

9、火试：有些藤木类，树脂类和动物类药材用火烧之，能产生特殊的气味、颜色、烟雾、响声等现象，而用以鉴别药材，如降香微有香气，点燃则香气浓烈，燃时有油流出，烧完留有白灰。血竭放在锡纸上，下面用火烤，熔化后色鲜红如血而透明，无残渣。麝香少许，用火烧时有轻微爆响声，起油点如珠，但无臭气，灰为白色。海金沙易点燃而发爆鸣声及闪光，松花粉及蒲黄无此现象。大青盐置火焰上燃烧，火焰呈亮黄色（N+a）马勃置火焰上轻轻抖动，可见火星飞扬，熄后发生大量白烟。青黛微火灼烧有紫红色烟雾发生等，均可鉴别。

10、气：有些药材有特殊的香气或臭气，是由于中药材中含有挥发性物质的缘故。有的药材的气，本来就不很强烈，在空气中暴露时间久了，就更不容易闻出来，这时可将药材弄碎了再闻。或者放在有盖的杯子里，用热水泡一下再闻。有的药材的气是十分特殊的，成为鉴别时的主要依据之一。

例如：

无：珍珠、石膏
微：山药
清香：大黄、牛黄、熊胆、冰片
香芳香：八角茴香、蜂蜜
香烈：肉桂、砂仁、麝香
臭：九香虫、紫草、芜荑、蜘蛛香

特殊有：
羊膻气：白藓皮、羊红膻
焦糖气：黄精
腥：紫河车
蒜臭：薤白
苯甲醛臭：丹皮
硫臭气：硫黄
党参臭：桔梗科药材
鸡屎臭：鸡矢藤
樟脑臭：关木通（粗皮摩擦）
打嚏：蟾酥、猪牙皂

11、其它：如牛黄的挂甲，麝香用槽针检查有冒槽现象，手捏成团等

Ⅳ hematoxylin and eosin是什么意思

hematoxylin and eosin
网络释义

苏木精和伊红

（3） 壁细胞：大多分布在胃腺的上半部，其中有很多粒腺体，在苏木精和伊红
（hematoxylin and eosin）的制剂染色之下，会呈现明亮的嗜伊红性 （eosinophilia）。

伊红

四、检测指标及方法（一）病理学检查
右上叶肺组织常规石蜡包埋、切片，苏木红-伊红（hematoxylin and eosin）染色。光镜下观察肺组织病理学变化。

染色

四常规染色技术HE染色 （Hematoxylin and
Eosin） 1.苏木素的化学性质 天然苏木素是从苏木的树心中提取出来的变色物， 为浅黄色或褐色结晶，只有氧化为苏木红后分子 中才有发色团...

苏木精一伊红染色

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1.3检测方法 所有组织标本均进行苏木精一伊红染色（hematoxylin and
eosin,H-E），以链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶连结法 （streptavidin.perosidase,S

短语

hematoxylin and eosin stain 伊红染色

Ⅳ Br检测细胞周期结果如何用Flow J分析

你要先在FSC和SSC散点图上gate出细胞，然后SSC-W和SSC-Hgate出单细胞，然后在用BrdU/PI 散点图打开才能开的比较清楚的图。

Ⅵ 如何检测蛋白的苏木素化

方法一：western blot and strip 通过WB检测所有发生泛素化的蛋白条带，拍照后，将膜strip。然后与特定蛋白的抗体和特定泛素化位点的抗体反应，显色拍照。通过阳性条带的对比来初步判断某一特定蛋白的特定位点发生了泛素化 方法二：western blot and immunoprecipitations 通过免疫共沉淀方法...

Ⅶ 苏木乡到中牟县需不需要核酸检测现在走高速需不需要核酸检测报告

从苏木乡到中牟县，是不需要核酸检测报告的，现在走高速，也不需要检测报告，只要你有健康码的绿码和行程码就可以。

Ⅷ 糖尿病患者的血糖检测方法及注意事项有哪些

医学上的空腹是指禁食8小时以上。要求化验前一天晚8点后不再进食任何食物，直到第二天早上5：00-8：00之间的时间段为空腹时段，也就是早晨8点前应到医院采血。因影响血糖的因素比较多，特别是饮食，正常人进食晚餐后血糖会显着增高，餐后2小时可恢复到正常范围。夜间依靠内生胰岛素维持血糖在正常水平。糖尿病患者因胰岛素绝对或相对缺乏，晚餐后血糖升高的过程可维持6-8小时，此后逐渐恢复到原来空腹的水平。当空腹时间超过8小时后，血糖大多开始下降，无法真实反映实际的空腹血糖水平。也有极少数人在空腹时间超过8小时后血糖轻微上升，这是因为影响血糖的因素除了饮食，还有情绪、运动等。因此，只有按照时间要求检测空腹血糖，才能得到准确的数据。
如何做到检测结果的准确性，需要注意以下几点：
1、测空腹血糖的前一天不要过分节食甚至不吃晚餐，虽然空腹时间超过12小时可能使测定的血糖值低一些，但并不能反映真实的空腹血糖水平。
2、禁食时间内尽量不要大量喝水，如口渴可少量饮用白开水，但不可多饮。喝水过多可使血液稀释而干扰血糖的检测结果。
3、糖尿病患者检查空腹血糖前晚降糖药须照常服用，检查当日须在抽血后服药。
4、测空腹血糖前要保证充足的睡眠，避免情绪激动、过于剧烈的活动等，这些因素都可能导致血糖升高。
5、当糖尿病患者空腹血糖升高时，需鉴别以下情况，并采取不同处理措施：血糖未控制好，整个夜间均处于高血糖状态；半夜产生低血糖致血糖反跳引起空腹血糖升高(称苏木杰效应)：在血糖控制良好的基础上，凌晨4-5点钟由于生长激素分泌增多导致血糖上升(称黎明现象)。
6、若测定空腹血糖有困难，可选择糖化血红蛋白检测，因糖化血红蛋白不受时间、进食、活动和情绪等因素影响，可避免饥饿影响糖尿病筛查和检测结果，并能反映近3个月血糖平均水平。
空腹血糖是衡量胰岛功能的重要指标，是诊断糖尿病的标准之一。空腹血糖还可反映糖尿病患者前晚所用药物对整个夜间乃至清晨血糖的控制情况。总之，无论体检时，还是糖尿病患者的日常复诊，都应做到禁食8小时后的早8点前进行血糖测定，以此得到准确的空腹血糖数据。

Ⅸ 黎明现象跟苏木杰有什么区别

主要区别是，性质不同、主要症状不同、主要原因不同，具体如下：

一、性质不同

1、黎明现象

是指在夜间血糖控制尚可且平稳，即无低血糖的情况下，于黎明时分（清晨3～9时）引起的一种清晨高血糖状态。

2、苏木杰现象

是指夜间（午夜1～3时）低血糖，早餐前高血糖的现象。

二、主要症状不同

1、黎明现象

主要症状：乏力，饥饿，出汗，心悸。

2、苏木杰现象

主要症状：夜间血糖低，晨起感觉头痛、恶心。

三、主要原因不同

1、黎明现象

由各种激素间不平衡分泌所引起的。

2、苏木杰现象

主要是由于口服降糖药或胰岛素使用过量而导致夜间低血糖反应后，机体为了自身保护，血糖出现反跳性升高。