核苷酸检测方法

‘壹’ 核酸检测方法有哪些

核酸检测采用咽拭子检测，有口咽拭子采样和鼻咽拭子采样两种方式。

口咽拭子采样就是在咽喉部位用棉签涂擦，刷取咽喉部位上皮细胞的检测。受检测者只要放松心情，张口发出“啊——”的声音就可以了，检测过程并没有创伤风险，是非常安全的检测。

检测时可能会有恶心、想要呕吐的不适感觉，不过这些不适症状通常只需要半分钟到两分钟左右就可以完全缓解了。鼻咽拭子采样是将一根细棉签深入鼻孔，从下鼻道深入抵达鼻咽后壁，然后捻转棉签取样。棉签进入鼻腔的深度约为鼻尖到耳垂的距离。

(1)核苷酸检测方法扩展阅读：

核酸检测相关知识：

核酸检测是检测病毒的方法，它可以更早发现感染。现在临床中对乙肝、丙肝、艾滋病都开展了核酸检测，可以在抗体产生前检测到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通过咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸检测来判断是否感染，以及推测是否具有传染性。

季节性流感、禽流感、冠状病毒感染等通过咽拭子检测可以方便地判断出上呼吸道是否存在病毒成份，从而判断被检测者是否属于感染者。

新冠病毒的核酸检测已经是比较成熟的检测方法了，只要在咽喉部位擦拭几秒钟就可以采集到标本。通过分析判断是否有新冠病毒的核酸成分，可以尽早发现感染者，甚至在感染者出现症状前就可以检测到阳性。

感染者经过隔离治疗后咽拭子检测阴性说明病毒已经清除，不具有传染性了。目前两次咽拭子核酸检测阴性是确诊病例和无症状感染者解除隔离的标准之一。

‘贰’ 核酸检测如何检测

核酸检测如何检测最近因为疫情的关系，总是能听到周围人谈论核酸检测，那么核酸检测是什么，需要怎么检查呢？下面就让我来给你科普一下。

在不知道核酸检测怎么检查的时候我还真没什么感觉，在知道了以后我对核酸检查有了一定的畏惧心理。

核酸检测是在实验室的条件下，通过分析致病微生物DNA或者RNA基因学的序列，进行临床病因学的确诊，是目前检测新冠病毒的常用手段。

核酸检测目前流行的检查手段大概分为三类，分别是：

1、口腔拭子


采集方法是用医用棉签（单头），伸进口腔，从口腔内侧两颊粘膜处反复擦拭20次以上，取出棉签，完成。

这个操作和医生的操作手法有关，采集时很容易产生恶心干呕，所以选对医生很重要。

这种方法采集的样本，可以在干燥环境下保存2-3个月。

2、鼻腔拭子


采集方法：首先去除鼻前孔中表面的分泌物，然后通过鼻腔轻轻、缓缓插入拭子至鼻咽部，当遇到阻力后即到达后鼻咽，停留数秒吸取分泌物，取出棉签，完成。

听着就觉得鼻子一阵一阵的不舒服，想想就不想做这个检查。

3、肛门拭子

听到这个名字大家应该就知道怎么做了吧，为避免让大家产生不适，相应的配图我就不附了，采集的方法和上面大同小异，就是插进去然后拔出来，就完事了，大家自行脑补吧。

说了这么多，这回大家都知道核酸检测怎么测了吧，知道了以后是不是也会有一些不适应嘿嘿。

‘叁’ 核酸检测是怎样检测的新冠病毒核酸检测的原理是什么

除朊病毒外的所有生物都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA)和核糖核酸（RNA)。新型冠状病毒是一种只含有核糖核酸的病毒。在新冠病毒出现后，我国科学家在短时间内完成了对新冠病毒的全基因组序列的分析。在核酸检测过程中，如果在患者样本中发现新型冠状病毒特殊的核酸序列，则说明该患者可能感染新型冠状病毒。

在临床核酸检测中，首先需要根据试剂盒的样本要求进行样本的收集。样本类型主要包括咽拭子，鼻拭子，痰液，支气管灌洗液，肺泡灌洗液等。考虑到利于操作等多种因素，核酸检测样本多为鼻拭子。鼻拭子和口咽拭子的提取方法如下：

用一根较长的棉签插入鼻孔，通过鼻腔取鼻咽后部的分泌物；口咽拭子则是从口腔进入，擦拭扁桃体和咽隐窝附近的分泌物。

核酸检测全程时间比较短，无创口，高效快速。检测完就可以离开，回去等待结果就好。考虑到新型冠状病毒 感染症状的特殊性，有条件以及所处地区有要求的人要积极配合完成核酸检测。

‘肆’ 核酸检测的方式有几种

核酸定量常用方法如下：
1、光吸收法：核酸中碱基共轭结构在近紫外光波长260纳米处有最大吸收，吸收强度与核酸浓度成正比，因此可以用于核酸定量。
2、定P法：核酸中P含量约为0.095，因此可以通过测定样品中的有机P量来进行核酸定量。核酸简介：核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内，生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸，其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸和脱氧核糖核酸。DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用，其中转运核糖核酸，简称tRNA，起着携带和转移活化氨基酸的作用；信使核糖核酸，简称mRNA，是合成蛋白质的模板；核糖体的核糖核酸，简称rRNA，是细胞合成蛋白质的主要场所。

‘伍’ 去医院做核酸检测需要几个步骤

核酸检测有助于病原体的发现及疾病确诊，以新冠肺炎为例，核酸检测流程包括：1，核酸检查对象：疑似病例、疑似聚集性病例患者。2，标本采集的技术人员，应经过生物安全培训，培训合格和具备相应的实验技能。3，标本采集种类，每个病例必须采集急性期，呼吸道标本和急性期血液标本，重症病例优先采集下呼吸道标本，如支气管或肺泡灌洗液等，可根据临床表现与采样时间间隔进行采集。4，标本采集后在，生物安全二级实验室生物安全柜内分装。5，用于病毒分离和核酸检测的标本，应尽快进行检测。6，规范实时荧光RT-PCR方法检测，及检测结果的判读。
病情分析：
这个情况首先戴口罩去医院的感染科就诊，或者是发热门诊，医生在了解你的情况以后，然后取咽拭子，并进行相对的隔离观察，一般来说可在1~2天出结果。门诊都要导医台，可以咨询一下相关医院的流程。
2022-01-17 13:27:20
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‘陆’ 核酸含量的测定方法及原理都有哪些

核酸检测的主要原理其实是反转录和聚合酶链式扩增反应。也叫做RT-PCR。目前对新型冠状病毒进行的核酸检测也主要采用此种方式。简单来说就是采取患者鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、粪便，检测人员通过。核酸提取试剂盒提取患者标本里边儿的核酸，然后把提取到的核酸放进检测试剂中进行复制扩增。然后再根据检测结果进行判断如果是阴性代表没有感染，如果是阳性代表有感染。目前对新型冠状病毒核酸检测会存在假阴性的可能，所以可以选择多次测量。如果连续两次核酸检测为阴性，同时没有临床症状可以排除感染，并且对已经感染了新型冠状病毒肺炎的患者，如果连续两次检测核酸为阴性，注意间隔时间必须大于一天，同时临床症状缓解，影像学好转也可以解除隔离。

‘柒’ 核酸检测方法有几种

核酸定量常用方法如下：
①
光吸收法：核酸中碱基共轭结构在近紫外光波长260nm处有最大吸收，吸收强度与核酸浓度成正比，因此可以用于核酸定量。
②
定P法：核酸中P含量约为9.5%,因此可以通过测定样品中的有机P量来进行核酸定量。

‘捌’ 核酸检测具体步骤

1、核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存，RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。

2、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。

3、PCR扩增反应PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。

4、扩增产物定性分析；扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量标准比较，判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。

5、结果判定和完成报告单：每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。

(8)核苷酸检测方法扩展阅读：

检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR。因PCR反应模板仅为DNA，因此在进行PCR反应前，应将新型冠状病毒核酸逆转录为DNA。在PCR反应体系中，

包含一对特异性引物以及一个Taqman探针，该探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；

如反应体系存在靶序列，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分离，发出荧光。

每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高， Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。

‘玖’ 核酸怎么检查

新型冠状病毒的核酸检测根据采样方式，大致分为上呼吸道标本和下呼吸道标本，上呼吸道标本主要为鼻咽拭子、鼻咽抽取物，下呼吸道标本主要是支气管肺泡灌洗液、深部痰液。

‘拾’ 核酸检测是怎么检测

核苷酸增加无损检测技术，是一系列立即检验病原菌核苷酸的技术性统称，包含基因表达介导的核苷酸增加无损检测技术(TMA)、即时莹光聚合酶链反应(PCR)，根据对靶核苷酸立即增加或对其附加的数据信号增加的方式，使极为少量的核苷酸变为形象化的光学或可视性数据信号。

一、血液为何需要开展dna检测？
因为基本的血液血清学无损检测技术方法学要素，包含酶链免疫吸附实验(ELISA)、电化学发光免疫力剖析实验(CLIA)，会使一些病原菌不检和漏验，经血清学检测阴性的血液也并并不是100%安全性的，仍存有静脉注射传播疾病的风险性。关键原因:基本检测病毒的漏捡:病毒感染感染者“潜伏期”捐血、病毒变异、免疫力缄默性感染(immunosilent infection)、人工服务实际操作不正确。一些己知病毒感染未检验:如CMV、B19、HTY、登革热病、Pion等。未知病毒:探索与发现病毒感染，如WNV、SARS、寨卡病毒等。选用核苷酸增加检验则可减少经血液传播疾病的风险性。

二、血液dna检测的实际意义
1.减少乙肝检测潜伏期，减少静脉注射风险性。说白了“潜伏期”，就是指从感染病源刚开始，直到用某类检验方式可以检验到该病源存有才行的这一段时间。因为感染后病毒颗粒在于抗原体、抗原释放出来入血，如HCV感染后，在将近1～3月的时间里，感染者身体没有或仅有少量而没法检验出的抗原，而血液却具备感染性。因而抗原体、抗体检测的“潜伏期”较长，如HBsAg、抗HIV检验的“潜伏期”各自为56d和22d，抗-HCV检验的“潜伏期”则长达70d。研究表明，(NAT)检验的确可以减少潜伏期，但针对不一样的病毒感染，其高效率也是有差别，这与血清学检验的基本值和dna检测实验试剂的敏感度相关。
2、别的优点：血液dna检测除开能显着减少潜伏期外，与血清学方式对比，也有本身优点：
(1)敏感度高，特异性强:dna检测敏感度远超医学免疫学方式检验，此外，核苷酸碱基配对的精确性决策了dna检测的特异性能比医学免疫学检验强。

(2)一些特殊情况dna检测可能是唯一的方式:如外周血单核细胞中或肝脏中融合的病毒感染;病毒感染的亚型或变异性;抗原体基因变异后抗原融合结构域转变或不产生抗体;产生抗原体一抗原一氧化氮合酶，使医学免疫学检验展现假阴性;感染中后期或漫性感染时抗原体/抗原
三、在我国血液dna检测状况