饲料级核黄素含量检测方法

A. 如何检测水果所含各种营养量

水果营养量的剑客，科标检测可以做检测

营养成分指的就是营养素，营养素是指食物中可给人体提供能量、机体构成成分和组织修复以及生理调节功能的化学成分。凡是能维持人体健康以及提供生长、发育和劳动所需要的各种物质均称为营养素。宏量营养素：碳水化合物、脂肪、蛋白质、无机盐和膳食纤维等。

微量营养素：维生素C（抗坏血酸）、硫胺素（维生素B1），核黄素（维生素B2），尼克酸，吡哆醇（维生素B6），叶酸，钴胺素（维生素B12），生物素、泛酸、视黄醇（维生素A）、胆钙化醇、麦角钙化醇（维生素D，α-生育酚（维生素E）、叶绿醌、甲萘醌（维生素K）、碘，氟，锌，铬，硒，镁，钼和铜等。

其他成分：总皂苷、总黄酮、粗多糖、褪黑素、茶多酚、大蒜素、叶黄素、虫草素、肌醇、胆碱、肉碱、腺苷、番茄红素、氨基酸、核苷酸、脂肪酸、亚油酸、亚麻酸、10-羟基-2-癸烯酸、叶酸等。

B. 如何检测饲料中的黄曲霉毒素

黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。
饲料中这种情况无可避免，用 肝肾无忧 按照比例拌料，分解毒素，排出母猪体外，不带走一点点营养成分。

C. 核黄素覆盖率验证几个难点请教一下

浓度一般0.2%足够了，喷完后干燥度不用测，这东西水溶性特别好只要是水喷

D. 关于微生物发酵生产核黄素的提取问题

维生素B2C17H20N4O6?

整个操作过程需避光进行。
11.1 样品提取
11.1.1 水解
称取2～10g样品(约含10～200μg核黄素)于100mL三角瓶中，加入50mL 0.1mol/L盐酸，搅拌直到颗粒物分散均匀。用40mL瓷柑埚为盖扣住瓶口，置于高压锅内高压水解，10.3×104Pa(15lb/in2)30min。水解液冷却后，滴加1mol/L氢氧化钠，取少许水解液，用0.04%溴甲酚绿检验呈草绿色，pH为4.5。
11.1.2 酶解
11.1.2.1 含有淀粉的水解液：加入3mL 10%淀粉酶溶液，于37～40℃保温约16h。
11.1.2.2 含高蛋白的水解液：加3mL 10%木瓜蛋白酶溶液，于37～40℃保温约16h。
11.1.3 过滤
上述酶解液定容至100.0mL，用干滤纸过滤。此提取液在4℃冰箱中可保存一周。
11.2 氧化去杂质
11.2.1 视样品中核黄素的含量取一定体积的样品提取液及核黄素标准使用液(约含1～10μg核黄素)分别于20mL的带盖刻度试管中，加水至15mL。各管加0.5mL冰乙酸，混匀。加3%高锰酸钾溶液0.5mL，混匀，放置2min，使氧化去杂质。滴加3%双氧水溶液数滴，直至高锰酸钾的颜色褪掉。剧烈振摇此管，使多余的氧气逸出。
11.3 核黄素的吸附和洗脱
11.3.1 核黄素吸附柱：硅镁吸附剂约1g用湿法装入柱，占柱长1/2～2/3(约5cm)为宜(吸附柱下端用一小团脱脂棉垫上)，勿使柱内产生气泡，调节流速约为60滴/min。
11.3.2 过柱与洗脱：将全部氧化后的样液及标准液通过吸附柱后，用约20mL热水洗去样液中的杂质。然后用5.00mL洗脱液(9.9)将样品中核黄素洗脱并收集于一带盖10mL刻度试管中，再用水 洗吸附柱，收集洗出之液体.

但是大量分离不知用此方法是否可行，仅提供你参考。

E. 纯化水/注射水储罐的喷淋效果验证过程（核黄素+紫外灯检测），以及过程照片。 望大家协助！谢谢！

Preparegoggles before performing the test for preventing damages from UV and theriboflavin solution. There are no requirements on protective clothes.
在测试前应该准备防护眼镜以防止紫外线和核黄素溶液的伤害。对防护衣物没有要求。
Checkthe internal surface of the PW storage tank. There must be no fluorescent partson the internal surface by UV light(365nm). Clean the tank thoroughly if fluorescentwas detected and keep it dry if necessary.
检查罐体内表面，用紫外灯（365nm）检查内表面必须无荧光剂，如存在荧光剂则需进行全面清洁，并保持干燥。
Theriboflavin solution shall be prepared with soft water at the minimum. Theconcentration of the riboflavin solution is 0.1 to 0.2g/L. Spray the riboflavinsolution evenly on the internal surface of the PW storage tank with adispersion pump or other devices. Use UV (365nm) to verify that the internal surfaceof the tank is completely covered by riboflavin (adjust the ambient light ifnecessary).
至少使用软化水配制核黄素溶剂：核黄素水溶液 0.1~0.2g/L，将核黄素溶液均匀喷在罐体的内表面。用紫外灯（365nm）证实完成了核黄素对罐内的完全表面覆盖（如果必要调暗周围的光线）。
Drythe riboflavin solution for 30 minutes.
晾干核黄素溶液30min。
启动CIP系统清洗程序，完成一个循环周期。
Checkwith a UV light (365nm) to see whether the riboflavin on the internal surfaceof the storage tank has been completed cleaned. Focuses shall be put to themanhole and the instrument connections.
用紫外灯（365nm）检查储罐体内表面的核黄素是否清洗完全，重点检查拐角连接处。

F. 请教:饲料用的动物油脂鉴别的指标和测定方法有哪些

饲用油为高能量饲料。由于价格高，市场上的饲用油掺假现象严重。被检出的掺假物主要有水，溶点较高的动物油中还检出面粉和食盐。下面先就通用的感官简易判定油脂是否掺假的的方法进行简单介绍，再对饲料中常用的油脂进行逐一介绍。
（一） 油脂的检测项目
1、总脂肪酸
此系包括游离脂肪酸及与甘油结合之脂肪酸总量。动物性或植物性油脂其量通常为92%—94%。油脂能量大部分系由脂肪酸供应，因此总脂肪酸量为能量值之指标。
2、游离脂肪酸
脂肪分解后会产生游离脂肪酸，故其量可做为鲜度判断之根据，完全饲料所用油脂一般约在15%—35%。在营养上而言，游离脂肪酸对动物无害，但太高的游离脂肪酸（50%以上）表示油脂原料不好，对金属机械、器具有形蚀性，而且会降低嗜口性。
3、水分
油脂中含有水分，不但引起加工设备的腐蚀，同时易使油脂起水解作用产生游离脂肪酸，加速脂肪之酸败，并降低脂肪之能量含量。
4、不溶物或杂质
包括纤维质、毛、皮/骨、金属、砂土等细小颗粒无法溶解于石油醚之物质。这些物质没有能量价值，而且会阻塞筛网和管口，或在贮存椅造成沉积。其量应限制在0.5以下。
5、不可皂化物
包括白酶类、碳氢化合物、色素、脂肪醇、维生素等不与碱发生皂化反应之物质，大部分成分仍有饲用价值，对动物无不良影响，但其中蜡、焦油等则无营养价值，甚至有些成分对动物有害，如水肿因子。
6、酸价
酸价虽测定容易，但通常不能单纯以之评价油脂品质，须配合其他方法供签定。油脂酸价之提高，部分由于油脂水解而生成游离脂肪酸，部分由于过氧化物的分解所产生羟基化合物再氧化而生游离脂肪酸，因此游离脂肪酸生成机构随条件而异，不易做为油脂氧化程度的判断指标。
7、过氧化价
羰氧化物系在油脂氧化过程中生成，该过氧化价可做氧化程度判断。但过氧化物在水中的存在或高湿下甚易分解，因此油脂氧化至某一程度后，过氧化价反而会降低。因此我们应了解，过氧化价==所存在过氧化物量与分解量之差，故需配合其他氧化测定方法，以利品质之正确判断。
8、羰基化合物
测定油脂中经酸败而产生的羰基化合物含量，亦为判断油脂氧化程度的一种方法。
9、TBA试验（硫代巴比妥酸试验），一般要求不大于2。
通常TBA与上述油脂氧化生成物作用而呈红色，于530毫米下测吸光度，可供酸败程度之鉴定。TBA试验可测出丙二醛（Malonaldehede）含量，丙二醛乃油脂氧化过程中第二阶段产物，故本试验无法测出初期氧化变化，加之丙二醛本身亦不稳定，可再氧化变成丙二酸（Malonicacid）人造成氧化与否之误判。
10、Kreis试验
此为醛类及酮类化合物之简便呈色反应，可做油脂氧化变质与否之定性反应。
11、AOM（活性氧法，Active Oxygenmethod）
系将油脂保持一定高温而通入定量空气以促进氧化而评价。油脂之稳定性以过氧化价达到某一定值所需时间来表示，不同种类油脂有不同过氧化物标准，通常对植物性油脂之过氧化物标准为100meg/千克；对动物性油脂则为20meg/千克（如猪油），并以不超过20小时为饲料级油脂规格。由于AOM测定系采用光电比色法，对某些颜色较深之饲料级油脂而言，其有效性虽有待商榷，但仍不失为最佳之方法。
12、安全性及其他
农药、多氯联苯、杀虫剂、氯戴奥兴及其他具毒性物质均可能移行油脂中，为防止可能之中毒，应行李一伯二氏（Liberman Buchard）反应及Hdphen反应及其他试验检出。
（二）油脂的鉴别
1、不同油脂其物理特性亦不同
故可由粘度、折光率、色泽、碘价、皂化价、溶解性、比重、融点、沸点等鉴别油脂是否纯品。
2、动植物油脂之鉴别
动植物油脂之鉴别是基于其所含特征成分，如动物性油含胆固醇（Cholesterlo）而植物性油则为植物固醇（Phytosterol）。致动物性油脂的不皂化物中含有胆固醇，而植物性油脂的不皂化物中则含有植物固醇。由其定性可认定动植物油之区分。
3、鱼油鉴别
鱼油含有高度不饱和脂肪酸，经氧化反应所生之乙醚不溶性之氧化物通常不溶于热苯，而亚麻酸所生成之乙醚不溶性多六氧化物可溶于热苯。
4、硬化油之鉴别
硬化油通常含有微量触媒（如镍人又因氢化而产生异油酸（Isl-Oleic acid）。可由这些物质的存在与否而判别之。
5、猪油中含牛油之鉴别
猪油与牛油之Boemer数值不同，可由其测定值辨别之，通常纯猪油的值为73.4-78.1℃；牛油为62.8-67.1℃，猪油+10%牛油为67.7-75.4℃，猪油加20%牛油为65.3-73.9℃。
6、矿物油鉴别
通常矿物油比重为0.84-0.93，碘价6-12，折光率1.490-1.507，不溶于酒精，可利用油脂中不皂化物之比重、碘价、对酒精溶解度等做鉴别之依据。
7、石蜡烃的鉴别
本品乃石油中抽出废弃之碳氢化合物，秤取样品1.43克，置试管（具0.1毫米刻度，长15厘米，内径10毫米），加入甘油二氯醇7毫米及水1.2毫米，于65℃加热振荡后静置10分钟（65℃），然后测其不溶解部分之容积即可判别石蜡羟之存在，其容量0.1毫米约等于5%石蜡羟。
（三）油脂酸价的检验
测定原理：用中性乙醇和乙酸混合溶剂溶解油样，然后用碱标准溶液滴定其中的游离脂肪酸，根据油样质量和消耗碱液的量计算出油脂酸价。
用到的仪器有：滴定管：25毫升；三角瓶：250毫升；天平：感量0.001克；容量瓶、移液管、称量瓶、试剂瓶等。
用到的试剂有：0.1摩尔/升氢氧化钾（或氢氧化纳）标准溶液；中性乙醚：乙醇（2：1）混合溶剂：临用前用0.1摩尔/升碱液滴定至中性。
具体操作步骤：称取混匀试样3—5克，注入锥形瓶中，加入混合溶剂50毫升，摇动使试样溶解，再加三滴酚酞指示剂，用0.1摩尔/升碱液滴定至出现微红色在30秒不消失，记录下消耗的碱液毫升数。
计算结果 酸价（毫克KOH/克油）=V×C×56.1/m。
式中：V—滴定消耗的氢氧化钾溶液体积，毫升；C—氢氧化钾溶液浓度，摩尔/升；m—试样质量，克；56.1—每毫升1摩尔/升碱液相当于氢氧化钾的质量56.1毫克。
双试验结果允许差不超过0.2克KOH/升油，求其平均数，即为测定结果。测定结果小数点后保留一位有效数字。

（四）油脂的通用感官检测法
1、气味检查
要注意是否酸败，即有无哈喇味：①盛装油脂的容器开口的瞬间用鼻子挨近容器口，闻其气味；②取1—2滴油样放在手掌或手背上，双手合拢快速摩擦至发热闻其气味；③用钢精勺取油样25克左右，加热到50℃上下闻其气味。
2、滋味检查
每种油脂都有其固定的独特滋味。通过滋味的鉴别可以知道油脂的种类，品质的好坏，酸败程度，能否使用等。用嘴尝试油脂，不正常的变质油脂会带有酸、苦、辛辣等滋味和焦苦味，质量好的油脂则没有异味。方法是用玻璃棒取少许油样，点涂在已漱过口的舌头上，辨其滋味。
3、色泽检查
每种油脂都有它固有色泽，根据这一点可鉴别油脂是否具有该种油脂的正常色泽、按油脂组成而言，纯净的油脂是无色、透明，常温下略带粘性的液体。但因油料本身带有各种色素，在加工过程中，这些色素溶解在油脂中，而使油脂具有颜色，国家标准规定，色泽越浅，质量越好。
色泽的鉴别方法如下：一般用直径1—1.5米长的玻璃插油管抽取澄清无残渣的油品，油柱长约25—30厘米（也可移入试管或比色管中）在白色背景前反射光线下观察。冬季气温低，油脂容易凝固，可取油250克左右，加热至35—40℃，使之呈液态，并冷却至20℃左右，按上述方法进行鉴别。
4、透明度
品质正常的油脂应该是完全透明的，如果油脂中含有碱脂、类脂、蜡质和含水量较大时，就会出现浑浊，使透明度降低，一般用插油管将油吸出，用肉眼即可判断透明度，分出清晰透明。微浊、混浊、极浊、有无悬浮物、悬浮物多少等。
5、沉淀物
油脂在加工过程中混入的机械杂质（泥砂、料坯粉末、纤维等）和碱脂、蛋白质、脂肪酸粘液、树脂、固醇等非油脂的物质，在一定条件下沉入油脂的下层，称为沉淀物。品质优良的油脂，就没有沉淀物，一般用玻璃扦油管插入底部把油吸出，即可看出有无沉淀或沉淀物多少。
6、植物油脂水分和杂质的感官鉴别
油脂是一种疏水性物质，一般情况下不易和水混合，但油脂中常含有少量的碱脂、固醇和其他杂质等能吸收水分，并可形成胶体物质悬浮于油脂中，所以油脂中仍有少量的水分，这部分水份一般是在制油过程中混入的。同时，还混入些杂质，油脂中的水分和杂质含量过多时，不仅降低其品质，还会加快油脂水解和酸败，影响油品贮存的稳定性。植物油脂水分和杂质和鉴别是按照油脂的透明、混浊程度，悬浮物和沉淀物的多少，以及改变条件后所出现的各种现象等，凭人的感觉器官来分析判断的。鉴别方法如下：
（1）取样判定法。取干燥洁净的扦油管一支，用大拇指将玻璃管上口按住，斜插入装油容器内至底部，然后放开大姆指，微微摇动，稍停后再用大拇指按住管口，提取观察油柱情况。在常温下，油脂清晰透明，水分杂质含量在0.3%以下；若出现混浊，水分杂质含量在0.4%以上；若油脂出现明显的混浊并有悬浮物，则水分杂质含量在0.5%以上。把扦油管的油放回原容器，观察扦油管模糊不清，则油品水分在0.3%-0.4%之间。
（2）烧纸验水法。取干燥、洁净的扦油管，用食指按住油管上口，插入静止的油容器里，直至底部，放开上口，扦取底部沉淀物少许，涂在易燃烧的纸片上点燃，听其发出的声音，观察其燃烧现象。燃烧时纸面出现气泡，并以出“吱吱”响声，水分约在0.2%—0.25%之间；如果燃烧时发生油星四溅现象，并发出“叭叭”的爆炸声，水分约在0.4%以上；如果纸片燃烧正常，水分约在0.2%以内。这种方法主要用于检查明水（如装油的容器口封闭不严，漏进雨水或容器原来带水所引起）。
（3、）钢筋勺加热法。用普通的钢精勺一个，取有代表性的油样约250克，在炉火或酒精灯上加热到150—160℃，看其泡沫，听其声音和观察其沉淀情况（霉坏、冻伤的油料榨得的油例外）如出现大量泡沫，又发出“吱吱”响声，说明水分较大，约在0.5%以上；如有泡沫，但很稳定，也不发出任何声音，表示水分较少，一般在0.25%左右。加热后，撇去油沫，观察油的颜色，若油色没有变化，也没有沉淀，说明杂质一般在0.2%左右；如油色变深，杂质约在0.49左右；如勺底有沉淀，说明杂质多，约在1%以上。用这种方法，加热温度不能超过160℃。
7、掺入食盐的识别
方法一：从油桶底部取少许油样，用嘴尝，如有咸味则说明该油中掺有食盐。
方法二：从油桶底部取少许油样放入干净的试管（需用蒸馏水冲洗）中，加入5毫升蒸馏水，加热至沸，继续加热1—2分钟，稍冷却，趁热过滤，或静置冷却，待分层后用滴管吸取下层液体，在滤液（或下层液体）中加入1—2滴1.7%硝酸银溶液（称取1.7硝酸银溶于100毫升蒸馏水中）。若有白色沉淀产生，则可确认被测油中掺有食盐。
8、掺入面粉的识别
从油桶底部取少许油样放入干净的试管（需用蒸馏水冲洗）中，加热融化后加入2滴碘溶液，若变为蓝色，则表示油样中含有淀粉。

G. 黄曲霉毒素的特征及其检测方法有哪些主要检测方法是什么

目前
主要检测方法是
常见的胶体金试纸条，ELISA酶联免疫试剂盒，TLC薄层色谱，免疫亲和净化荧光光度法和高效液相法，液质联用法

H. 青贮饲料水分含量的检测方法

在对青贮饲料存储过程中分青草和干草两类型，存储方式一般是存在地下窖，有的是用地上窖，还有用塑料薄膜做成的可以搬动的青贮塑料袋。青贮饲料水分含量目前都是采用快速的方法，因为 传统（烘箱）的饲料含水量检测手段已经无法满足今天的大规模流水线生产需求，主因还是检测过程复杂，效率低，能耗大；因此CS-002青贮饲料快速水分仪的应用不但提高了设备工作、检测效率，而且还提升并实现了高效、环保、降低能耗的特点。对于饲料行业的高低水份样品都能进行精准、快速的测量分析网页链接，

I. 黄曲霉毒素B1的检测方法

GB2761-2014《食品安全国家标准 食品中真菌霉素的限量》中对于黄曲霉毒素B1的限量以及检测方法做了修改，婴幼儿配方食品及婴幼儿辅助食品按照GB5009.24规定的方法测试，其他食品按照GB/T18979规定的方法测定。 TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法，是中国测定食品及饲料中AFT黄曲霉素B1(AFB1)的标准方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将AFB1从样品中提取出来，经溶剂萃取纯化，再在薄层板上层析展开，分离，利用AFB1的荧光特性，根据荧光斑点的大小和强弱，比较测定黄曲霉毒素含量。
TLC有单项展开法和双向展开法，TLC法由于设备简单，易于普及，所以国内外仍在使用，但由于该法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多因而在展开时影响斑点的荧光强度，而双向展开虽避免了杂质干扰，增加了灵敏度，但增加了操作步骤和时间。 酶联免疫法检测AFB1的理论基础是抗原抗体反应，其采用单克隆或多克隆抗体技术，具有特异性强、分析时间短等优点。其原理是抗原（或抗体）吸附于载体上的免疫吸附剂和用酶标抗体（或抗原）与标本中的待测物（抗原或抗体）起特异的免疫学反应，最后用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度。大体分为2类：一是用双抗体夹心法检测样本中的AFTB1， 二是用竞争法检测样本中的AFTB1,。为了使用方便，目前国内外已研制了酶标记免疫吸附测定试剂盒及配套仪器,方法也被列入国家标准(GB/T5009.22 1996第二法)。
但由于ELISA法中酶的活性易受反应条件影响，因此ELISA法测定结果稳定性较差，分析结果的准确性不高，容易出现假阳性结果。 一般来说，组织中黄曲霉毒素含量很低，而液相色谱串联质谱法具有比高效色谱法更高的灵敏度和准确性，如今这种方法还极少使用在测定组织霉菌毒素含量中。该方法检测限可达0.02~0.025 ppb。 84%甲醇水溶液提取样品中,正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化。采用电喷雾电离,正离子扫描,选择多反应检测模式（MRM）监测,外标法定量，该法灵敏,结果可靠。

J. 发酵饲料PH及小肽含量检测方法

pH检测：10g饲料加90ml蒸馏水，搅拌5min，pH计校准后测定。
小肽：测酸溶蛋白，测游离氨基酸，酸溶蛋白减去游离氨基酸就是小肽含量