感控生物检测方法

A. 生物检验包含哪些检验

传统定义：利用生物体对被检测物质的特有反应而鉴定被检测物质的质量和功效的方法。 用于生物检验的生物体主要是各种微生物和某些动物。生物检验的范围主要包括生物效价测定和安全性试验。 现代定义：以现代生命科学为基础，结合各种分析技术和其他基础学科的科学原理，对生物的个体、器官、组织、细胞、生物大分子的生命活动进行定性、定量的观察、比较、分析、判断。

从检验方法看，可分为生物形态学、免疫学、分子生物学、细胞化学、生物化学、生物物理学、细胞生物学、结构生物学等。

B. 活体生物测定方法有哪些

1．用家蝇检测蔬菜中的残留农药

20世纪60年代后期，我国台湾农业试验所采用生物测定方法进行农药残留检验，其原理是释放高敏感性的家蝇于菜汁中，4～5h后家蝇死亡率在10%以下即为合格，该方法过程简单，无须复杂仪器检测，缺点是检测时间较长，只对部分杀虫剂有反应，无法分辨残留农药的种类，准确性较低。

2．用大型水蚤为试验材料监测蔬菜中农药的残留

该方法的原理是将蔬菜汁按ISO标准稀释，每个剂量10个水蚤，测定24h、48h、96h的实验结果，以实验水蚤的心脏停止跳动作为最终死亡指标，测定半数致死浓度。袁振华等对该类测定方法作了探索性的研究，研究表明，大型水蚤测试技术完全适用蔬菜中的农药残留测定，并认为该方法具有快速、灵敏、简便、经济等特点，但该方法同样无法分辨残留农药的种类。

3．用发光细菌检测农药残留

发光细菌是一类非致病性的普通细菌，在正常的生理条件下能发出波长为490nm的蓝绿色的可见光。这种发光现象是细菌新陈代谢的结果，是呼吸链上的一个侧支。当发光细菌接触干扰和损害新陈代谢的物质，特别是有毒、有害物质时，就能使细菌发光强度下降或熄灭，而且毒物的浓度和细菌的发光强度呈负相关线性关系变化。利用这一特点就可以对农药残留试样进行测定。袁东星等利用发光菌进行农药残留检测，最小检出浓度为3mg/L。该方法已能用于检测甲胺磷、敌敌畏等常用有机磷农药。

发光细菌能同时对多种毒物产生发光受抑反应，但农药浓度与发光强度的线性关系不够准确，发光菌被激活后，它的发光强度会随时间的变化而改变。它具有快速、简便、灵敏、价廉的特点，在定性、半定量的现场快速检测中逐渐显现出了其优势。随着食品工业的发展，采用发光细菌法检测食品安全性作为一种快速的初筛方法，已逐渐受到人们的广泛关注。

C. 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

D. 找一案例用生物指示进行环境检测

生物监测是通过对生物群落、种群及个体对环境变化或者污染出现的反应进行监测，立足于生物学角度监测和评价环境污染状况。生物监测属于环境监测的重要组成部分，具有综合性、非破坏性、经济性、连续性、长期性、敏感性的特征，在环境标准制定、突发事件监测、环境污染早期预警、环境风险评价等各种领域得到广泛应用。

在社会生产水平不断发展的今天，世界的环境问题也变得越来越严重，因此世界各国都开始积极地研究环境保护问题。作为环境保护工作的基础，环境监测工作的主要目的就是将环境问题的发展趋势以及质量现状及时、准确、全面地反映出来，从而将科学的依据提供给环境规划、污染控制以及环境管理。物理和化学监测是传统的、主要的环境监测的方法，由于现在人们使用的化学物品的数量和品种正在不断增长，因此不管是在效率上还是基本上，传统的物理和化学检测方法已经不能够使监测的需要得到充分的满足。在这种情况下，生物检测作为一种新的环境监测方法。

1 生物监测的分类和原理概述

1.1 生物监测的分类

1.1.1
以生物的生长环境为根据进行监测：以生物的生长环境为根据可以将生物检测方法划分为主动生物检测以及被动生物检测，所谓的主动生物监测主要是将生物体在控制条件下转移到监测点，从而开展各种参数测试。所谓的被动生物监测主要是通过对污染环境中天然存在的生物个体和群落的反映对环境状况进行评价。

1.1.2
以生物的分类为根据进行监测：通常可以将生物分类监测划分为微生物检测、植物监测以及动物监测，生物监测良好的指示剂就是各种环境介质中的生物，比如指示植物、蚯蚓以及鱼类。微生物监测主要是通过对微生物群落在环境中的功能和变化进行监测，从而将环境污染状况反映出来。

1.1.3
以生物所处的主要环境介质为根据进行监测：以生物所处的主要环境介质为根据可以将生物监测划分为土壤污染、水体污染以及大气污染的生物监测，植物是监测大气污染的主要生物;叶绿素a测定法以及生物群落法是对水体生物监测的主要方法;酶活性的测定、土壤微生物、指示植物和动物监测是主要的土壤监测方法。

1.1.4 以生物学层次为根据进行监测：生物学层次为根据可以将生物监测划分为行为测试、生物测试以及生态监测等方法。

1.2 生物监测的主要原理

生物学理论以及生态系统理论是生物监测的主要理论基础，由于生物与其生存环境之间具有相互依存、相互制约、相互影响的关系，同时两者之间还不间断地进行能量以及物质的交换，一旦环境受到污染，生物体内就会有污染物的迁移和蓄积现象，最终引起环境中各级生物出现生理生化、生长发育情况以及分布情况的变化，比如藻类的光合作用强度和细胞密度会带水环境受到污染的情况下发生变化。监测主要是通过生物对环境污染的反应为根据对环境污染的程度和状况进行度量和反映。

2 生物监测方法在环境监测中的应用

2.1 生物群落监测法的应用

生物群落监测法主要是监测水体污染，同时也可以在大气污染以及土壤污染监测中进行应用，比如水生生物的群落结构和个体在水体出现污染情况之后就会出现明显变化，一些敏感生物会消亡，而一些抗性生物则会生长得越来越旺盛，因此就会产生非常单一的群落结构。利用对生物群落变化的监测能够将污染状况很好地反映出来，其中最为主要的指示生物就是鱼类、底栖动物、着生动物以及浮游生物等。

E. 生物上的四种调查方法是什么

生物学研究的基本方法有四种：

①观察法

观察法是科学探究的一种基本方法。生物科学的很多重大发现或发明都源于细致的观察。观察法就是在自然状态下，研究者按照一定的目的和计划，用自己的感观外加辅助工具，对客观事物进行系统的感知和描述，以发现和验证科学结论。

②调查法

调查是科学探究常用的方法之一，是了解生物种类、生存环境和外部形态等常用的研究方法。调查法一般是在自然的过程中进行的，通过访问、座谈、问卷、测验和查阅书面材料等方式去搜集反映研究对象的材料。

科学调查的步骤：明确调查目的和调查对象→制订合理的调查方案→实施实验调查方案，并如实做好记录→对调查情况和结果进行整理和分析→写出调查报告。

③实验法（如对照实验和模拟实验）

生物学是在实验的基础上建立和发展起来的一门自然科学。利用实验的方法进行科学探究是现代生物学的重要方法。实验法就是利用特定的器具和材料，通过有目的、有步骤的实验操作和观察，记录、分析，发现或验证科学结论。

④测量法

(5)感控生物检测方法扩展阅读：

实验的设计过程

从研究过程的大体步骤来看，实验方法与一般实证研究(即经验研究)相类似，通常可分以下几个步骤：

1、在对现实经济生活中各种现象作观察思考并对有关文献进行回顾分析的基础上，确定研究问题；

2、根据理论，作出合乎逻辑的推测，提出假设命题；

3、设计研究程序和方法；

4、搜集有关数据资料；

5、运用这些数据资料对前面提出的假设命题进行检验；

6、解释数据分析的结果，提出研究结论对现实或理论的意义以及可以进一步研究或改进的余地。

在实验研究中特别引人注目的是第3个步骤——实验设计过程，它是实验研究的核心。实验研究用以检验假设的数据是对实验现象观察得到的，因此实验的设计如何直接关系研究成败。

仔细观察已有的实验研究成果，可以发现，在以上步骤的具体实施上，实验方法与经验研究方法还是有所不同的。这一点在第2个步骤中就已经显示出来。

将假设命题具体化为可以检验的模型，与实验设计有直接关系，研究者在对研究结果做出理论预期(即假设)时，必须考虑实验的可实施性;在建立可证伪的检验模型时必须考虑变量的值可以通过实验取得。研究的第4个步骤是数据资料收集，在实验研究中就是实施实验并记录实验情况。

实验研究中用于假设检验的数据来自研究者自己设计的实验，而经验研究应用的数据来自经验，如统计资料或报刊杂志(即现实世界中存在的数据)，这个差别在方法定义时就已经明确。

实验的影响因素

实验设计影响因素

外部环境设计

行为者内因设计

影响因素控制方法

根据行为影响因素变化的特性不同，可将其控制方法区分为组间控制和组内控制。

组间控制方法

组内控制方法

参考资料：网络-实验研究方法

F. 大气环境污染的生物监测方法有哪些各有何特点

用于生物监测的手段很多。大气污染的生物监测手段主要有：①利用指示植物监测大气污染，主要是根据各种植物在大气污染的环境中叶片上出现的伤害症状，对大气污染作出定性和定量的判断。②测定植物体内污染物的含量，估测大气污染状况。③观察植物的生理生化反应,如酶系统的变化、发芽率的降低等，对大气污染的长期效应作出判断。④测定树木的生长量和年轮等，估测大气污染的现状和历史。⑤利用某些敏感植物（如地衣、苔藓等）制成大气污染植物监测器，进行定点观测（见大气污染的生物监测）

G. 高中生物中常见的生物组织物质，它们的检测、鉴定方法，及反应现象

生物实验总结 实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA 绿色，RNA 红色 分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验二 物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹III 橘黄色 脂 肪 + 苏丹IV 红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色反应 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） ★模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 3、蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色) 考点提示： （1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 （2 )还原性糖植物组织取材条件？ 含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 （3)研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。 （4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 （5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 浅蓝色 棕色 砖红色 （6）花生种子切片为何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 （7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片的厚薄不均匀。 （8）脂肪鉴定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三 观察叶绿体和细胞质流动 1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片 2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。 用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。 知识概要： 低倍观察 高倍观察 考点提示： （1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？ 因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。 （2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？ 表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。 （3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？ 进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右。 （4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？ 叶脉附近的细胞。 （5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的？ 仍为顺时针。 （6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？ 否，活细胞的细胞质都是流动的。 （7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？ 视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。 （8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。 实验四 观察有丝分裂 1、材料：洋葱根尖（葱，蒜） 2、步骤：（一）洋葱根尖的培养 （二）装片的制作 制作流程：解离→漂洗→染色→制片 1. 解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液). 时间: 3~5min .目的: 使组织中的细胞相互分离开来. 2. 漂洗: 用清水漂洗约3min. 目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色. 3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min 目的: 使染色体着色,利于观察. 4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来,有利于观察. （三）观察 1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。 2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。 考点提示： （1)培养根尖时，为何要经常换水？ 增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。 （2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？为什么？ 应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。 （3）为何每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？为何？ 因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10时到下午2时；因为此时细胞分裂活跃。 （4）解离和压片的目的分别是什么？压片时为何要再加一块载玻片？ 解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。 （5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？ 压片时用力过大。 （6)解离过程中盐酸的作用是什么？丙酮可代替吗？ 分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。 （7)为何要漂洗？ 洗去盐酸便于染色。 （8)细胞中染色最深的结构是什么？ 染色最深的结构是染色质或染色体。 （9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么？ 因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。 （10）为何要找分生区？分生区的特点是什么？用高倍物镜找分生区吗？为什么？ 染液浓度过大或染色时间过长。 （11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？为什么？ 间期；因为在细胞周期中，间期时间最长。 （12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗？为什么？ 不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。 （13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？为什么？ 不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。 （14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么？ 没有找到分生区细胞；没有找到处于分裂期的细胞；染液过稀；染色时间过短。 实验五 比较酶和Fe3+的催化效率 考点提示： （1）为何要选新鲜的肝脏？因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。 （2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？为什么？应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。 （3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。 （4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？为什么？研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。 （5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？为什么？不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。 实验六 色素的提取和分离 1、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素 各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素 2、步骤： （1）提取色素 研磨 （2）制备滤纸条 （3）画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次 （4）分离色素：不能让滤液细线触及层析液 （5）观察和记录: 结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b). 考点提示： （1）对叶片的要求？为何要去掉叶柄和粗的时脉？绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。 （2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅对实验有何影响？ 为了使研磨充分。不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。 （3）丙酮的作用？它可用什么来替代？用水能替代吗？ 溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。 （4）碳酸钙的作用？不加碳酸钙对实验有何影响？ 保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。 （5）研磨为何要迅速？要充分？过滤时为何用布不用滤纸？ 研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。 （6）滤纸条为何要剪去两角？ 防止两侧层析液扩散过快。 （7）为何不能用钢笔或圆珠笔画线？ 因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。 （8） 滤液细线为何要直？为何要重画几次？ 防止色素带的重叠；增加色素量，使色素带的颜色更深一些。 （9） 滤液细线为何不能触到层析液？ 防止色素溶解到层析液中。 （10）滤纸条上色素为何会分离？ 由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。 （11）色素带最宽的是什么色素？它在层析液中的溶解度比什么色素大一些？ 最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。 （12）滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素？ 胡萝卜素和叶黄素。 （13)色素带最窄的是第几条色素带？为何？ 第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。 实验七 观察质壁分离和复原 1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡 2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。 3、步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水, 另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原) 4、结论: 细胞外溶液浓度 ＞ 细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离 细胞外溶液浓度 ＜ 细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原 知识概要：制片 观察 加液 观察 加水 观察 考点提示： （1）洋葱为何要选紫色的？若紫色过淡怎么办？ 紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化；让阳光照射。 （2）洋葱表皮应撕还是削？为何？ 表皮应撕不能削，因为削的表皮往往太厚。 （3）植物细胞为何会出现质壁分离？ 动物细胞会吗？ 当细胞失去水分时，其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性；动物细胞不会发生质壁分离，因为动物细胞没有细胞壁。 （4）质壁分离时，液泡大小和颜色的变化？复原时呢？ 细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深；当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。 （5）若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么？ 细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长） （6）高倍镜使用前，装片如何移动？ 若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，因为显微镜视野 中看到的是倒像。 （7）换高倍物镜后，怎样使物像清晰？视野明暗度会怎样变化？如何调亮？换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清晰；视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。 （8）所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系？ 目镜越长，放大倍数越小；物镜越长，放大倍数越大。 （9）物像清晰后，物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系？ 物镜与载玻片之间的距离越小，放大倍数越大。 （10)总放大倍数的计算方法？放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数？ 总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积；放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。 （11）放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系？ 放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。 （12） 更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上；更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。 （13）怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度？ ①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液 ②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片 ③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。 实验八 DNA的粗提取与鉴定 考点提示： （1)鸡血能用猪血代替吗？为什么？ 不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。 （2）鸡血中为何要加柠檬酸钠？为何要弃去鸡血细胞的上清液？ 防止血液凝固；因为上清液是血浆，不含细胞和DNA。 （3）胀破细胞的方法？能用生理盐水吗？ 向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破；不能用生理盐水，因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。 （4）该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯？为什么？ 最好用塑料烧杯，因为玻璃烧杯容易吸附DNA。 （5）前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少？为什么？ 第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液；第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液；第三次用两层纱布，既有利于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。 （6）若实验中所得黏稠物太少，其原因是什么？ 第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破；第二次加蒸馏水过多或过少；第一次过滤用了多层纱布；第二次过滤用了一层纱布；使用了玻璃烧杯。 （7）两次加入蒸馏水的目的分别是什么？ 第一次是为了使血细胞吸水胀破；第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA有析出。 （8）实验中搅拌溶液时，为何总要沿一个方向搅拌？ 防止DNA分子受到损伤。 （9）两次析出DNA的方法分别是什么？原理分别是什么？ 第一次是加蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液。 （10)三次溶解DNA的液体分别是什么？原理分别是什么？ 第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0。015mol/L的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0。14mol/L时，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0。015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。 （11)鉴定DNA时为何要用两支试管？其现象分别是什么？ 其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。 实验九 探究酵母菌的呼吸方式 1、原理: 酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水： C6H12O6 ＋ 6O2 ＋ 6H2O 6CO2 ＋ 12H2O ＋ 能量 在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳： C6H12O6 2C2H5OH ＋ 2CO2 ＋ 少量能量 2、装置：（见课本） 3、检测：（1）检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。 （2）检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。 实验十 观察细胞的减数分裂 1、目的要求：通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。 2、材料用具：蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，显微镜。 3、方法步骤： （1）在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。 （2）先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。 4、讨论：（1）如何判断视野中的一个细胞是处于减数第一次分裂还是减数第二次分裂？ （2）减数第一次分裂与减数第二次分裂相比，中期细胞中的染色体的不同点是什么？末期呢？ 实验十一 低温诱导染色体加倍 1、原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。 2、方法步骤： （1）洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内（4℃），诱导培养36h。 （2）剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。 （3）制作装片：解离→漂洗→染色→制片 （4）观察，比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞. 3、讨论：秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍，这两种方法在原理上有什么相似之处？ 实验十二 调查常见的人类遗传病 1、 要求：调查的群体应足够大；选取群体中发病率较高的单基因遗传病。如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等. 2、 方法: 分组调查,汇总数据,统一计算. 3、计算公式：某种遗传病的发病率= *100% 4、讨论: 所调查的遗传病的遗传方式, 发病率是否与有关资料相符, 分析原因. 实验十三 探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用 1、常用的生长素类似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等 2、方法： ①浸泡法：把插条的基部浸泡在配置好的溶液中，深约3cm，处理几小时或一天。处理完毕就可以扦插了。这种处理方法要求溶液的浓度较低，并且最好是在遮荫和空气湿度较高的地方进行处理。 ②沾蘸法：把插条的基部在浓度较高的药液中蘸一下（约5s），深约1.5cm即可。 3、预实验：先设计一组浓度梯度较大的实验进行探索,在此基础上设计细致的实验. 4、实验设计的几项原则: ①单一变量原则(只有溶液的浓度不同)；②等量原则(控制无关变量,即除溶液的浓度不同外,其他条件都相同)；③重复原则(每一浓度处理3~5段枝条) ；④对照原则（相互对照、空白对照）；⑤科学性原则 实验十四 探究培养液中酵母菌数量的动态变化 1、培养酵母菌（温度、氧气、培养液）：可用液体培养基培养 2、计数：血球计数板(2mm×2mm方格,培养液厚0.1mm) 3、推导计算 4、讨论：根据7天所统计的酵母菌种群数量画出酵母菌种群数量的增长曲线；推测影响影响酵母菌种群数量变化的因素。 实验十五 土壤中动物类群丰富度的研究 1、丰富度的统计方法通常有两种：记名计算法和目测估计法 记名计算法：指在一定面积的样地中，直接数出各种群的个体数目，这一般用于个体较大，种群数量有限的群落。 目测估计法：按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少。等级的划分和表示方法有：“非常多、多、较多、较少、少、很少”等等。 2、设计数据收集和统计表，分析所搜集的数据。 实验十六 种群密度的取样调查 考点提示： （1）什么是种群密度的取样调查法？ 在被调查种群的生存环境内，随机选取若干个样方，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。 （2）为了便于调查工作的进行，在选择调查对象时，一般应选单子叶植物，还是双子叶植物？为什么？ 一般应选双子叶植物，因为双子叶植物的数量便于统计。 （3）在样方中统计植物数目时，若有植物正好长在边线上，应如何统计？ 只计算该样方相邻的两条边上的植物的数目。 （4）在某地域中，第一次捕获某种动物M只，标志后放回原处。第二次捕获N只，其中含标志个体Y只，求该地域中该种动物的总数。 MN/Y （5）应用上述标志回捕法的条件有哪些？①标志个体在整个调查种群中均匀分布，标志个体和未标志个体都有同样被捕的机会。②调查期中，没有迁入或迁出。③没有新的出生或死亡。 实验十七 探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替 要求：（1）水族箱必须是密封的，且是透明的，放置于室内通风、光线良好的地方，但要避免阳光直接照射。 （2）组成成分：非生物成分、生产者、消费者和分解者 （3）各生物成分的数量不宜过多，以免破坏食物链 设计实验步骤常用“四步法”。 第一步：共性处理实验材料，均等分组并编号。选择实验材料时要注意应用一些表示等量的描述性语言，如：“生长一致的”，“日龄相同的，体重一致的”等等。分成多少组要视题目中所给的信息而定，（一般情况分两组）。编号最好用A、B、C或甲、乙、丙，而不用1、2、3 避免与实验步骤相混淆。 第二步：遵循单因子变量原则，对照处理各组材料。方法为一组为对照组（往往为处于正常生理状态的），其余为实验组，对照组与实验组只能有一个实验条件不同（单因子变量），其他条件要注意强调出相同来，这是重要的得分点或失分点。至于变量是什么要根据具体题目来确定。 第三步：相同条件培养（饲养、保温）相同时间。 第四步：观察记录实验结果。 实验结果的预测（预期）；首先要根据题目判断该题是验证性实验还是探究性实验，如果是验证性实验，则结果只有一个，即题目中要证明的内容。如果是探究性实验，则结果一般有三种：①实验组等于对照组，说明研究的条件对实验无影响。②实验组大于对照组,说明研究的条件对实验有影响,且影响是正相关。③实验组小于对照组,说明研究的条件对实验有影响,且影响是负相关。 基本全了

H. 如何利用生物传感器，开发微生物快速检验的方法

如何利用生物传感器，开发微生物快速检验的方法
生物传感器是一门由生物、化学、物理、医学、电子技术等多种学科互相渗透成长起来的高新技术。因其具有选择性好、灵敏度高、分析速度快、成本低、在复杂的体系中进行在线连续监测，特别是它的高度自动化、微型化与集成化的特点，使其在近几十年获得蓬勃而迅速的发展。
在国民经济的各个部门如食品、制药、化工、临床检验、生物医学、环境监测等方面有广泛的应用前景。特别是分子生物学与微电子学、光电子学、微细加工技术及纳米技术等新学科、新技术结合，正改变着传统医学、环境科学动植物学的面貌。生物传感器的研究开发，已成为世界科技发展的新热点，形成21世纪新兴的高技术产业的重要组成部分，具有重要的战略意义。 生物传感器在食品分析中的应用包括食品成分、食品添加剂、有害毒物及食品鲜度等的测定分析。
⑴食品成分分析在食品工业中，葡萄糖的含量是衡量水果成熟度和贮藏寿命的一个重要指标。已开发的酶电极型生物传感器可用来分析白酒、苹果汁、果酱和蜂蜜中的葡萄糖。其它糖类，如果糖，啤酒、麦芽汁中的麦芽糖，也有成熟的测定传感器。
Niculescu等人研制出一种安培生物传感器，可用于检测饮料中的乙醇含量。这种生物传感器是将一种配蛋白醇脱氢酶埋在聚乙烯中，酶和聚合物的比例不同可以影响该生物传感器的性能。在目前进行的实验中，该生物传感器对乙醇的测量极限为1nmol/L。
⑵食品添加剂的分析
亚硫酸盐通常用作食品工业的漂白剂和防腐剂，采用亚硫酸盐氧化酶为敏感材料制成的电流型二氧化硫酶电极可用于测定食品中的亚硫酸盐含量，测定的线性范围为0～6的负四次方mol/L。又如饮料、布丁、醋等食品中的甜味素，Guibault等采用天冬氨酶结合氨电极测定，线性范围为2×10的负五次方～1×10的负三次方 mol/L。此外，也有用生物传感器测定色素和乳化剂的报道。

I. 生物监测的特点是什么主要有哪些检测技术和方法

太笼统了，生物监测在很多地方都有不同的意义，不能一概而论，比如我们可以对水源进行生物监测，可以对公共场所卫生情况进行生物监测，可以对制药厂的制药环境进行生物监测，可以对消毒灭菌的效果进行生物监测，等等等等，不胜枚举。
不过大体上应该都可以进行字面理解，采样后进行微生物分析以便进行污染的评价。

J. 我是医院感染管理的新人，医院刚开展感控科，请问医院感染综合性监测怎么做教教我感控科的具体工作。急求

我也是新人、我们医院一般都监测一些重点部门的感染、监测侵入性操作的院内感染、监测手术切口感染率等等，不知道你说的综合性监测是什么，请你说的具体点