检测法氏囊卵黄抗体使用方法

❶ 应用高免卵黄抗体治疗鸡病时应注意什么

由于鸡蛋蛋黄与血清中所含抗体的种类和滴度均相近，所以可将蛋黄液用于鸡病的防治上。近年来，抗鸡传染性法氏囊病和抗鸡新城疫高免卵黄抗体的制作和应用相当广泛，并取得了一定的效果，但也存在一些弊端，因此必须注意如下几点：

（1）种雏鸡群不宜使用。多种鸡病病原体是可以在母鸡体内通过蛋垂直传播的，例如鸡传染性脑脊髓炎、病毒性关节炎、鸡传染性贫血、鸡白痢等。而目前国内用于制造高免卵黄抗体的鸡群基本上都不是无特异性病原体的鸡群，因而母鸡体内就有可能带有这种或那种能垂直传播的病原体。即使在加工卵黄抗体过程中添加了一些防腐剂和抗菌药，但只能杀死或抑制部分病原性细菌，而对病毒则无作用。为了避免某些传染病的垂直传播，高免卵黄抗体不应用于种鸡疾病的预防和治疗。

（2）不宜与疫苗接种同期使用。用于制造高免卵黄抗体的母鸡群，一般在开产前均进行过多种疫苗的接种，其蛋黄中含有一定量的多种抗体，会影响疫苗的免疫效果。如在注射高免卵黄抗体之前3～5天内接种过疫苗的，最好在注射卵黄抗体后7～10天再重新接种。另外，在注射卵黄抗体后一周内接种疫苗的效果也不理想。

（3）不宜单纯依赖高免卵黄抗体的防与治。高免卵黄抗体只不过是一种被动抗体，注入鸡体后其有效保护期为10～15天左右。高免卵黄抗体对许多病在早、中期进行治疗，可以取得令人满意的效果，而到晚期治疗效果欠佳。此外，有些鸡的传染病的病原存在不同的血清型，不同血清型的毒株之间不一定都能保护，这就是有时高免卵黄抗体治疗效果欠佳的原因之一。

（4）过期变质、结块的高免卵黄抗体不宜再用。结块、沉淀的卵黄抗体充分摇匀后感观上呈灰黄，如同酸败的玉米粥，静置很快沉淀分层，pH值低于6，检测抗体效价下降或消失，因此不宜再使用。

❷ 卵黄抗体如何制作及应用

卵黄杭体是治疗鸡新城疫（ND）和传染性法氏囊病(IBD）的一种特效药，于20世纪90年代，利用免疫学理论研究生产的新药，具有特异性诊断、治疗和预防作用。目前，已广泛应用于鸡新城疫和传染性法氏囊病的防治上，均收到了良好效果。 制作方法 将新城疫I系苗、传染性法氏囊强毒苗连续注射健康无病产蛋鸡三次，第一次1个免疫量，第二次2个免疫量，第三次3个免疫量。待3周后收集母鸡所产的蛋，无菌术取蛋黄，加灭菌生理盐水稀释成1:20的混悬液，测定效价，加入抑菌剂，然后进行分装，在0℃以下保存备用。 卵黄抗体成分与效价 卵黄抗体也称母源抗体,IgG抗体。是母体血液中小分子抗体IgG通过胎盘、输卵管、滋养层传给后代。保存入卵的蛋黄中，若孵化出鸡雏，则对新城疫、传染性法氏囊有特异的抵抗作用。这种抵抗作用称为抗体，其分子结构称为单体Ig,由2条多肽重链和2条多肽轻链组成。沉淀系数7S，分子量160000 ～180000，含糖2.5%。现已发现有四种IgGT型重链同种异型，也称作四个亚型并含硫的半胱氨酸。具有抗感染、抗菌、抗病毒作用。由于氨基酸排列顺序具有高度可变性，能接触到抗原的物质，并发生特异结合，产生中和作用，从而体现特异作用。 卵黄抗体好与否的标准是用HA和HI试验测定的稀释倍数，称为效价，Iog2的指数越大，效价越高，通常把1:64效价称为高免卵黄抗体，其半衰期为4天左右，因此，用卵黄抗体替代主动免疫时间在2周～4周，应科学选择使用日期，注意半衰期，计算保护期，当降到临界线时，应及时补充。 卵黄抗体的作用 诊断作用：卵黄抗体具有沉淀素的特性，当诊断时，若怀疑鸡群发生传染性法氏囊病，可采取病料5克，加灭菌生理盐水10毫升，研磨，加抗菌剂抑菌，置于冰箱过夜，作为未知抗原，制作备用琼脂板，打成梅花状七孔后，同时加入未知病料抗原和已知的卵黄抗体各一份，约0.5毫升，25℃放置24小时～72小时，出现肉眼可见白色沉淀线，为阳性反应。强阳性反应时,24小时后就可见到沉淀线，即可判定试验鸡群发生了传染性法氏囊病。 治疗作用：当鸡群发生新城疫或传染性法氏囊病时，可立即皮下注射卵黄抗体1～2毫升，肉鸡可口服卵黄抗体2毫升／只，能阻止病毒进入细胞，形成再感染，中和病毒数量，经2小时就可发现鸡群精神好转，食欲增加，粪便恢复正常。目前，是治疗鸡新城疫、传染性法氏囊病的特效药物。 预防作用：卵黄抗体的使用，在免疫学理论中可成为被动免疫。当免疫缺陷、疫苗缺乏及免疫失败时，可利用卵黄抗体注射、口服替代主动免疫接种，发挥抗病作用。 应用方法 解冻．：一般包装有500毫升,250毫升、100毫升瓶装。要把药瓶放在新鲜井水中，浸泡2小时～4小时以上，反复振摇。用肉眼观察，瓶内无冰碴为宜。 注射：可将解冻后的卵黄抗体，在室温下放置半小时，接近室温时（15℃～20℃），再皮下注射1毫升～2毫升。先注射健康鸡群，再注射假定健康群，最后注射病鸡群。注射1只鸡要换1个针头。 口服：将解冻后的卵黄抗体以1:10的比例，加人入凉开水或新鲜井水及适量的抗生素，制成混悬液，让鸡在半小时内饮完，并要备足饮水器，让鸡都有位置饮水。 注意事项 卵黄抗体是生物制品，高温会失效，为方便生产与使用，须冷冻保存和运输，一般在-18℃条件下保存，运输时应特别注意温度变化，冷藏包装运输。 使用卵黄抗体前，一定要了解鸡群是否接种过同种疫苗，并要注意间隔时间；同时，应测定其效价，计算使用量和保护期。 卵黄抗体兑水后，应呈混悬液，不要添加电解质，破坏其结构，使卵黄抗体失效。兑水后饮用时，应先控制饮水，可根据气温高低确定，一般应控制饮水2小时～3小时。 在使用卵黄抗体防治鸡新城疫或传染性法氏囊病时，不得产生依赖思想，同时还要做好卫生、饲养管理和消毒工作，采取综合的防治措施，才能收到满意的效果。

❸ 什么是卵黄抗体

抗血清是按照一定的免疫程序给动物多次接种某种抗原（如病原微生物、疫苗等），使动物产生针对该抗原的高效价的抗体。通过采取被免疫动物的血液提取血清，经过处理制成的一类生物制品。抗血清主要用于传染病的治疗，也可用于紧急预防。

卵黄抗体是利用某种疫（菌）苗按一定程序反复免疫鸡、鸭、鹅等禽类动物，并检测其蛋品卵黄相应抗体滴度达到一定水平后，收集其被免疫禽的蛋品，并经特殊工艺收集其蛋黄所制成的一种生物制品，如新城疫卵黄抗体、传染性法氏囊炎卵黄抗体、鸭病毒性肝炎卵黄抗体等都属此类。它与高免血清一样只限用于相应疫病的治疗和紧急预防接种。

❹ 传染性法氏囊病免疫后还发病，怎么办

必须进行免疫。因为传染性法氏囊病是由病毒引起的雏鸡急性病毒性传染病，以损害机体免疫器官——法氏囊为特征。传染性法氏囊病是一种免疫抑制病，它的发生会导致许多疫苗的免疫失败。

图19 病鸡法氏囊出血变化（山东省农业科学院家禽研究所提供）

（1）流行特点本病发病急，鸡1～100日龄均可发生，21～35日龄多发。感染率可达100%；死亡率不等，一般10%～20%，高者可达40%～50%。一年四季均可发生。经呼吸道、消化道感染本病，经常是通过被污染的饲料、饮水、垫料、粪便、尘土、用具、人员衣服、昆虫等而传播。本病感染雏鸡后导致对其他疫病的抑制，并提高对细菌、病毒的易感性，所以本病对养鸡业危害相当严重。（2）症状本病往往突然发生，潜伏期短，感染2～3天出现临床症状。病鸡表现精神沉郁，头下垂，眼睑闭合，羽毛蓬松，食欲下降或废绝。下痢，呈白色水样稀便，脱水，最后衰竭而死。发病后1～2天病鸡死亡增多，且呈直线上升，4～5天达到死亡高峰，以后迅速下降。病程一般1周，长的可达3周。（3）剖检病死鸡脱水明显，两腿干枯。大腿内侧点状、斑状出血，严重者大腿外侧、胸肌出血。腺胃、肌胃交界处多见出血斑或出血带。肾肿胀、苍白，输尿管变粗、充满白色的尿酸盐。法氏囊肿大，浆膜下水肿，呈胶冻样。法氏囊外观黄色，囊腔内分泌物为紫红色，严重者整个法氏囊呈紫红色，像紫葡萄一样，整个法氏囊出血。（4）免疫接种选择最佳的疫苗和正确的免疫程序，是预防本病的关键性措施。有条件的要用琼脂扩散法测定鸡群阳性率，以确定免疫时间。无条件进行抗体监测的单位可参考下列免疫程序。一是，种鸡未作灭活苗免疫，也没有感染过鸡传染性法氏囊病病毒的种蛋孵出的雏鸡，首免可于10～18日龄，间隔10天后二免，种鸡还应在18～20周龄和40～42周龄注射组织灭活苗，以提高雏鸡母源抗体水平。二是，雏鸡来源于灭活苗免疫过的种鸡后代，可在2周龄和7周龄时活苗饮水。三是，在鸡传染性法氏囊病病毒严重污染地区，使用组织灭活苗。该苗含有地方变异株在内的混合病毒群抗原，具有特异性强、高效、多价、不受母源抗体干扰、无免疫抑制等优点，对鸡传染性法氏囊病毒野毒株免疫覆盖面宽，能提供较好的交叉保护。方法是：7～10日龄弱毒苗饮水，同时或间隔1周灭活苗注射，种鸡再分别于18～20周龄和40～42周龄注射灭活苗。四是，在鸡传染性法氏囊病疫区首免和二免都要用中等毒力活苗饮水免疫。（5）加强饲养管理在料中或水中添加电解多维、维生素C等药物以补充体液，增强体质，防止肉鸡发生腹水；改善环境卫生，提高舍温1～2℃。加强通风换气，并用双链季铵盐或环氧乙烷等消毒剂对舍内外进行喷雾消毒；隔离病禽，消除噪音，避免应激；严格兽医卫生防疫措施。降低饲料中的蛋白含量（减至15%左右），同时料中加入双倍量的电解多维和抗菌素，以增强体质，提高抗应激、抗感染能力，防止继发或并发其他疾病，提高免疫后鸡体内抗体水平和增强细胞免疫能力，降低死亡率。（6）对病鸡和发病鸡群紧急治疗治疗该病时，可视鸡群实际情况而定，但用抗生素防止细菌（如大肠杆菌等）继发感染，用小苏打、乙酰水杨酸钠等肾肿解毒药解除肾肿，用电解多维等药物补充体液，提高机体抵抗力。发病1～2天的鸡群，可肌肉注射鸡传染性法氏囊病高免卵黄抗体（雏鸡1.0～1.4毫升/只；30日龄左右的鸡1.8～2.4毫升/只），这时一定要注意加投防治大肠杆菌病的药物；若是发病超过3天的鸡群，一般不建议注射高免卵黄抗体，最好采用中西结合的方法，加投抗生素以防继发细菌感染。

❺ 卵黄抗体的IgY的形成、作用机理与制备

IgY的性质与哺乳动物的IgG相似。正常鸡IgY的分子量约为180KDa，由两条轻链(2L)和两条重链(2H)组成，分子量分别为60-70KDa和22-30KDa。其等电点约为5.2。
IgY与一般哺乳动物IgG相比，IgY具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶降解能力。
在低于75℃条件下，IgY具有良好的热稳定性。IgY制剂在4℃贮存5年或在室温贮存6个月其活性仍无明显变化或下降，65℃时可保持24h以上，70℃时加热90min后其活性才明显下降60℃，30min条件下巴氏消毒不影响IgY；高于80℃，大部分IgY失去活性。
IgY在pH4.0-11.0时比较稳定，pH3.0-3.5时活性迅速下降，pH12时活性亦有所下降。
IgY对胃蛋白酶有较高的抵抗力，但对胰蛋白酶十分敏感。将胃蛋白酶和IgY在pH2.0温育1h后，几乎所有活性丧失，但在pH4.0时1h后可保持91%的活性，甚至温育10h后仍有63%活性。IgY分别与胰蛋白酶和胰凝乳酶温育8h，活性分别保持39%和41%。 卵黄中的主要成分是蛋白质和脂肪，其比例为1：2。大部分蛋白质都是脂蛋白，存在于卵黄颗粒中，不溶于水，只有卵黄球蛋白(α、β、γ)是水溶性的，而IgY是γ卵黄球蛋白。因此IgY的分离纯化首先需要有效地去除卵黄中的脂类，从水溶性蛋白中分离IgY。
多年来，已建立了许多较为高效而经济的方法，这些方法大多以PEG、硫酸葡聚糖、天然胶，如藻酸钠、角叉聚糖或乙醇沉淀等方法初步纯化蛋白质。
1980年，Polson首先提出聚乙二醇(PEG)两步沉淀法，分别用终浓度为3.5%和12%的PEG分步沉淀，用硫酸铵盐析法去除PEG。1985年，在此基础上提出了冷乙醇沉淀的改进方法，使产量提高，而且能有效地去除残留PEG。1981年Jensensius等提出了硫酸葡聚糖沉淀法(DS法)，PEG法和DS法的产量相当，但提取的IgY制品含有一定量的杂蛋白。Bade和Stegemann(1984)用预冷的丙烷和丙酮(-20℃)沉淀蛋白质并去除脂质，经DEAE柱层析进一步纯化，其IgY抗体活性与用Polson法提纯的IgY之间无明显差别，且稳定性好，经3次以上冻融，抗体活性未见改变。1992年Akita等用水稀释法(WD)提纯IgY，每个卵黄可获得100mg以上的IgY。此后，Akita等比较了WD法、PEG法、DS法和黄原胶法(Xanthan法)的提纯效果，结果表明：WD法产量最高，其次为DS法，WD法更适合大规模生产。
1993年，Horikoshi提出了冷乙醇分级离心的方法，分别用60%、30%、25%的冷乙醇沉淀离心，得到纯度达99%以上的IgY。此法适用于大规模制备IgY。
工业上大规模生产IgY的方法有：超临界二氧化碳气体抽提法、卡拉胶法、硫酸铵盐析法。

❻ 卵黄分层为什么要在酸性，低温条件下进行有什么更好的方法来分离卵黄抗体

在水稀释法中，卵黄液的酸碱度对提取效果影响较大，在pH5.0~5.2时，卵黄抗体的提取率与纯度最高。

❼ 法氏囊卵黄抗体可以治鸽温吗

摘要 在发现鸽子得了鸽瘟之后，一定要及时治疗，把鸽瘟控制住，可参考以下的几种治疗方法。

❽ 如何做好鸡传染性法氏囊病的免疫

鸡传染性法氏囊病最早于1957年在美国特拉华的甘布罗被发现，故又称甘布罗病。该病一年四季均可发生，以20～40日龄鸡多发。临床表现突然发病，病鸡精神沉郁，腹泻，法氏囊肿大、出血，肾肿大和肌肉出血。由于病鸡免疫应答降低，易继发感染大肠杆菌病、新城疫等疾病。

近年来，传染性法氏囊病已不像20世纪80—90年代那样呈区域性的大面积流行，其特征已由爆发型趋向温和型或小区域散发。

对本病的免疫，要把握好4个要点，即了解母源抗体水平、确定合理免疫程序、选择合适毒力的疫苗、正确的免疫接种方法。

有的养殖户认为，免疫程序是固定不变的，只要按程序注射疫苗，就能防止该病的发生；也有的养殖户认为，如果上批鸡免疫疫苗后发病了，这批鸡就提前免疫或者加大免疫剂量、增加免疫次数。有的养殖户干脆配上干扰素或针对传染性法氏囊病的抗病毒药物。

在一些肉鸡养殖密集区，无论免不免疫疫苗，传染性法氏囊病都频频发生，使得一些养殖户对疫苗免疫失去了信心，有的索性就放弃法氏囊病疫苗免疫，依赖注射卵黄抗体来应付，以至一个饲养周期一般要打4～5次。殊不知，这样做的坏处有三：一是有些低劣的卵黄抗体含有大量杂菌、霉菌或者庆大霉素等抗生素，注入后很容易继发细菌病或霉菌病，加剧肾肿，形成肾衰。再者，使用卵黄抗体在发病初期效果明显，中后期则不理想，同时卵黄抗体注入体内后5～7天即消失，需要及时补免或重复注射卵黄抗体，一旦时间差掌握失误，发病的风险依然很大。三是频繁捉鸡会造成对鸡的惊吓和应激反应。

法氏囊病之所以频频发生，使人不知所措，大多是由于免疫不当造成的。若要做好法氏囊病的免疫，应根据当地本病的流行特点、饲养条件与鸡群类型，以及鸡的母源抗体水平来综合考虑。尤为关键的是确定首免日龄。在生产中可参考以下接种方案：

（1）种鸡群，2～3周龄弱毒疫苗饮水，4～5周龄中等毒力疫苗饮水，开产前油佐剂灭活疫苗肌内注射。

（2）商品蛋鸡，14～15日龄弱毒疫苗饮水，24～25日龄中等毒力疫苗饮水。

（3）商品肉鸡可在10～14日龄首免，20～25日龄二免；若母源抗体较高，可在18～24日龄只免疫一次。对于来源复杂或情况不清的雏鸡免疫可适当提前，并进行二次免疫。没有母源抗体或抗体水平偏低的鸡群首免可选用弱毒疫苗，二免时用中等毒力苗。在严重污染区、本病高发区的雏鸡可直接选用中等毒力疫苗。

鸡场一旦发生传染性法氏囊炎，可及时注射高免血清或高免卵黄抗体，每只鸡1～2毫升，一般可收到很好的效果。生产中可应用抗病毒药物进行治疗；同时使用广谱抗生素防止继发感染。

❾ 注射高免卵黄抗体治疗鸡传染性法氏囊病发病时应注意什么

鸡得了传染性法氏囊病时采用高免卵黄抗体进行肌肉注射的方法，可取得较好疗效，但需要注意以下几个问题。

（1）使用正规厂家生产的产品，不能使用三无产品。

（2）高免卵黄抗体应做到低温保存和运输，以4～8℃为宜。

（3）高免卵黄抗体的疗效与其使用时间有关。发病初期的鸡群注射高免卵黄抗体，能明显增强疗效，死亡率控制在2%左右，但发病中、后期使用高免卵黄抗体则不太理想。

（4）不可用高免卵黄抗体替代疫苗，高免卵黄抗体在鸡体内的有效期为7～10天。因此，在注射高免卵黄抗体后7天左右，应加强一次鸡传染性法氏囊病疫苗的免疫。

（5）高免卵黄抗体不能与新城疫或鸡传染性法氏囊病弱毒疫苗同时接种。否则，卵黄抗体与疫苗会发生中和反应，从而导致免疫失败。

（6）注射高免卵黄抗体时，可加入适量的广谱抗生素，以控制细菌污染。

（7）高免卵黄抗体的注射量不宜过大。临诊上最佳注射量为：雏鸡1～1.5毫升/只，成年鸡2～3毫升/只，注射量过大不仅起不到作用，反而会造成不良后果，严重时可导致大批死亡。

（8）连续注射时，要注意更换针头，以防交叉感染，加重病情。

（9）水中添加治肾药物，以利尿酸盐排出。

（10）降低饲料蛋白质水平，用5%麸皮替代5%豆粕，连用3～5天。