卵黄抗体效价用什么方法检测

Ⅰ 制备免疫血清时，为检测抗体效价，家兔最常用的采血方法是

正确答案:B
解析：制备免疫血清时，免疫家兔后，常采用耳缘静脉采血来检测家兔产生抗体的效价
。

Ⅱ 抗体效价的检测方法

多采免疫双向扩散法
【基本原理】
*指抗原和抗体在同一凝胶内都扩散，彼此相遇后形成特异性的沉淀线。
-将抗原与抗体分别加入同一凝胶板中两个相隔一定间距的小孔内，使两者进行相互扩散，当抗原抗体浓度之比相适宜时，彼此相遇形成一白色弧状沉淀线。
*优缺点：简便，但敏感性较低，易出现假阴性结果。
免疫双向扩散法的操作步骤
*将玻璃板用水洗净后用75%乙醇冲洗，晾干后放在水平台上备用。
*将1%agar 融化后，置56℃水浴。
*在玻璃板上铺胶，约1.5mm 厚，凝固后打孔(直径 3rnm)，孔间距10mm。
l 抗血清(抗体预先作系列倍比稀释即ml 抗原样品，周围孔内每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。
*凝胶板置湿盒内，室温扩散24h。
*观察结果。
凝聚胺法测定孕妇血清IgG抗-A（抗-B）效价的方法待检血清与0.2 mol/L 2?硫基乙醇(2?Me)在试管内等量混合，放入37℃水浴1 h以破坏血清中的IgM抗体，吸取处理后的血清用生理盐水倍比稀释，稀释度分别为2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024，然后每管加入相应的3%～5%红细胞悬液，置37℃水浴30 min，观察是否凝集，不凝集者用生理盐水洗涤3次，然后加入低离子盐水介质(LIM液)，混匀，滴入2滴凝聚胺，混匀后3 000 r/min离心30 s，扣摇肉眼可见明显的凝集(无凝集者须重做)，再加入2滴重悬液，轻摇，观察凝集是否消失，凝集1 min内不消失者表示受检者血清中含有IgG型抗?A(抗?B)。
抗体效价检测的其它方法
*环状沉淀试验，需较多的抗血清，现已很少用；
*对流免疫电泳，比琼脂免疫双扩散法敏感，较简便、实用；
*酶联免疫吸附试验 (ELISA)。
通常抗体效价低于1：128是没有问题的，有些孕妇高达1：256以上，而且抗体效价最好1个月查上一次，有时候会有所变化。

Ⅲ 卵黄抗体如何制作及应用

卵黄杭体是治疗鸡新城疫（ND）和传染性法氏囊病(IBD）的一种特效药，于20世纪90年代，利用免疫学理论研究生产的新药，具有特异性诊断、治疗和预防作用。目前，已广泛应用于鸡新城疫和传染性法氏囊病的防治上，均收到了良好效果。 制作方法 将新城疫I系苗、传染性法氏囊强毒苗连续注射健康无病产蛋鸡三次，第一次1个免疫量，第二次2个免疫量，第三次3个免疫量。待3周后收集母鸡所产的蛋，无菌术取蛋黄，加灭菌生理盐水稀释成1:20的混悬液，测定效价，加入抑菌剂，然后进行分装，在0℃以下保存备用。 卵黄抗体成分与效价 卵黄抗体也称母源抗体,IgG抗体。是母体血液中小分子抗体IgG通过胎盘、输卵管、滋养层传给后代。保存入卵的蛋黄中，若孵化出鸡雏，则对新城疫、传染性法氏囊有特异的抵抗作用。这种抵抗作用称为抗体，其分子结构称为单体Ig,由2条多肽重链和2条多肽轻链组成。沉淀系数7S，分子量160000 ～180000，含糖2.5%。现已发现有四种IgGT型重链同种异型，也称作四个亚型并含硫的半胱氨酸。具有抗感染、抗菌、抗病毒作用。由于氨基酸排列顺序具有高度可变性，能接触到抗原的物质，并发生特异结合，产生中和作用，从而体现特异作用。 卵黄抗体好与否的标准是用HA和HI试验测定的稀释倍数，称为效价，Iog2的指数越大，效价越高，通常把1:64效价称为高免卵黄抗体，其半衰期为4天左右，因此，用卵黄抗体替代主动免疫时间在2周～4周，应科学选择使用日期，注意半衰期，计算保护期，当降到临界线时，应及时补充。 卵黄抗体的作用 诊断作用：卵黄抗体具有沉淀素的特性，当诊断时，若怀疑鸡群发生传染性法氏囊病，可采取病料5克，加灭菌生理盐水10毫升，研磨，加抗菌剂抑菌，置于冰箱过夜，作为未知抗原，制作备用琼脂板，打成梅花状七孔后，同时加入未知病料抗原和已知的卵黄抗体各一份，约0.5毫升，25℃放置24小时～72小时，出现肉眼可见白色沉淀线，为阳性反应。强阳性反应时,24小时后就可见到沉淀线，即可判定试验鸡群发生了传染性法氏囊病。 治疗作用：当鸡群发生新城疫或传染性法氏囊病时，可立即皮下注射卵黄抗体1～2毫升，肉鸡可口服卵黄抗体2毫升／只，能阻止病毒进入细胞，形成再感染，中和病毒数量，经2小时就可发现鸡群精神好转，食欲增加，粪便恢复正常。目前，是治疗鸡新城疫、传染性法氏囊病的特效药物。 预防作用：卵黄抗体的使用，在免疫学理论中可成为被动免疫。当免疫缺陷、疫苗缺乏及免疫失败时，可利用卵黄抗体注射、口服替代主动免疫接种，发挥抗病作用。 应用方法 解冻．：一般包装有500毫升,250毫升、100毫升瓶装。要把药瓶放在新鲜井水中，浸泡2小时～4小时以上，反复振摇。用肉眼观察，瓶内无冰碴为宜。 注射：可将解冻后的卵黄抗体，在室温下放置半小时，接近室温时（15℃～20℃），再皮下注射1毫升～2毫升。先注射健康鸡群，再注射假定健康群，最后注射病鸡群。注射1只鸡要换1个针头。 口服：将解冻后的卵黄抗体以1:10的比例，加人入凉开水或新鲜井水及适量的抗生素，制成混悬液，让鸡在半小时内饮完，并要备足饮水器，让鸡都有位置饮水。 注意事项 卵黄抗体是生物制品，高温会失效，为方便生产与使用，须冷冻保存和运输，一般在-18℃条件下保存，运输时应特别注意温度变化，冷藏包装运输。 使用卵黄抗体前，一定要了解鸡群是否接种过同种疫苗，并要注意间隔时间；同时，应测定其效价，计算使用量和保护期。 卵黄抗体兑水后，应呈混悬液，不要添加电解质，破坏其结构，使卵黄抗体失效。兑水后饮用时，应先控制饮水，可根据气温高低确定，一般应控制饮水2小时～3小时。 在使用卵黄抗体防治鸡新城疫或传染性法氏囊病时，不得产生依赖思想，同时还要做好卫生、饲养管理和消毒工作，采取综合的防治措施，才能收到满意的效果。

Ⅳ 求助ELISA测定抗体效价方法

我用的是间接ELISA，以下自我的毕业论文：
将抗原用包被液稀释至约10 ?g/mL；分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释，稀释梯度从1：200，1：400至1：204800，二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450)，计算阳性血清与阴性血清的吸光度之比(P/N)，当P/N＜1.5时为阴性，当P/N≥1.5而＜2.1为可疑，当P/N≥2.1为阳性，将P/N≥2.1时所对应的抗体最高稀释倍数作为抗体的效价。

Ⅳ 应用高免卵黄抗体治疗鸡病时应注意什么

由于鸡蛋蛋黄与血清中所含抗体的种类和滴度均相近，所以可将蛋黄液用于鸡病的防治上。近年来，抗鸡传染性法氏囊病和抗鸡新城疫高免卵黄抗体的制作和应用相当广泛，并取得了一定的效果，但也存在一些弊端，因此必须注意如下几点：

（1）种雏鸡群不宜使用。多种鸡病病原体是可以在母鸡体内通过蛋垂直传播的，例如鸡传染性脑脊髓炎、病毒性关节炎、鸡传染性贫血、鸡白痢等。而目前国内用于制造高免卵黄抗体的鸡群基本上都不是无特异性病原体的鸡群，因而母鸡体内就有可能带有这种或那种能垂直传播的病原体。即使在加工卵黄抗体过程中添加了一些防腐剂和抗菌药，但只能杀死或抑制部分病原性细菌，而对病毒则无作用。为了避免某些传染病的垂直传播，高免卵黄抗体不应用于种鸡疾病的预防和治疗。

（2）不宜与疫苗接种同期使用。用于制造高免卵黄抗体的母鸡群，一般在开产前均进行过多种疫苗的接种，其蛋黄中含有一定量的多种抗体，会影响疫苗的免疫效果。如在注射高免卵黄抗体之前3～5天内接种过疫苗的，最好在注射卵黄抗体后7～10天再重新接种。另外，在注射卵黄抗体后一周内接种疫苗的效果也不理想。

（3）不宜单纯依赖高免卵黄抗体的防与治。高免卵黄抗体只不过是一种被动抗体，注入鸡体后其有效保护期为10～15天左右。高免卵黄抗体对许多病在早、中期进行治疗，可以取得令人满意的效果，而到晚期治疗效果欠佳。此外，有些鸡的传染病的病原存在不同的血清型，不同血清型的毒株之间不一定都能保护，这就是有时高免卵黄抗体治疗效果欠佳的原因之一。

（4）过期变质、结块的高免卵黄抗体不宜再用。结块、沉淀的卵黄抗体充分摇匀后感观上呈灰黄，如同酸败的玉米粥，静置很快沉淀分层，pH值低于6，检测抗体效价下降或消失，因此不宜再使用。

Ⅵ 如何检测中和抗体效价

北京德元国际科技公司代做抗体效价检测，用ELISA法

Ⅶ ELISA方法检测抗体效价的时候为什么要加入二抗啊。。。用酶标记有什么作用

因为二抗有标记物，标记的酶是为了让底物显色的，以表示是否检测到了抗体，显色表明阳性，不显色表明阴性，有时还可以定量。

Ⅷ 怎样制作和保存鸭肝卵黄抗体

采用雏鸭病毒性肝炎活疫苗，或用死于鸭病毒性肝炎的脏器组织灭活苗，免疫接种健康产蛋母鸭，2周后重复1次，待卵黄抗体达到一定效价时，收集鸭蛋，在无菌操作下取卵黄匀浆稀释过滤，制备而成高免卵黄抗体。性状为呈淡黄色卵黄混悬液。用于预防和治疗雏鸭病毒性肝炎。雏鸭预防量为每只皮下或肌内注射0.5毫升，治疗量为1～2毫升。放置在-15℃冷冻保存，2年内有效；2～8℃冷藏保存，3个月内有效。

Ⅸ 什么是卵黄抗体

抗血清是按照一定的免疫程序给动物多次接种某种抗原（如病原微生物、疫苗等），使动物产生针对该抗原的高效价的抗体。通过采取被免疫动物的血液提取血清，经过处理制成的一类生物制品。抗血清主要用于传染病的治疗，也可用于紧急预防。

卵黄抗体是利用某种疫（菌）苗按一定程序反复免疫鸡、鸭、鹅等禽类动物，并检测其蛋品卵黄相应抗体滴度达到一定水平后，收集其被免疫禽的蛋品，并经特殊工艺收集其蛋黄所制成的一种生物制品，如新城疫卵黄抗体、传染性法氏囊炎卵黄抗体、鸭病毒性肝炎卵黄抗体等都属此类。它与高免血清一样只限用于相应疫病的治疗和紧急预防接种。