1、焦磷酸测序法
测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。
焦磷酸测序法适于对已知的短序列的测序分析,其可重复性和精确性能与SangerDNA测序法相媲美,而速度却大大的提高。
焦磷酸测序技术产品具备同时对大量样品进行测序分析的能力。为大通量、低成本、适时、快速、直观地进行单核苷酸多态性研究和临床检验提供了非常理想的技术操作平台。
2、微数字聚合酶链反应
该方法为将样品作大倍数稀释和细分,直至每个细分试样中所含有的待测分子数不超过1个,再将每个细分试样同时在相同条件下聚合酶链反应后,通过基因芯片逐个计数。该方法为绝对定量的方法。
3、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术
聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。该法一般用于检测已知的突变位点。
因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中兇手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。
由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年,PCR已发展到第三代技术。1976年,台湾科学家钱嘉韵,发现了稳定的Taq DNA聚合酶,为PCR技术发展也做出了基础性贡献。
PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右)。
DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。
4、高效液相色谱法
该方法是基于发生错配的杂合双链DNA与完全匹配的纯合双链DNA解链特征的差异而进行检测的,可检测出含有单个碱基的置换、插入或缺失的异源双链片段。
与测序法相比,该法简单、快速,不仅可用于已知突变的检测,还可用于未知突变的扫描。但只能检查有无突变,不能检测出突变类型,结果判断容易出错。
5、单链构象异构多态分析技术
依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,构象不同导致电泳的迁移率不同,从而将正常链与突变链分离出来。与测序法相比,灵敏性更高。
‘贰’ SNP检测方法有哪些
但不管哪一种方法,首先必须进行靶序列的扩增,然后才能进行其它检测。传统的SNP检测方法是采用一些已有的成熟技术,如DNA测序、限制性酶切片段长度多态性(RFLP)、单链构象多态性(SSCP)、等位基因特异 的寡聚核苷酸杂交(ASO)等。这些技术虽在某种程度上能完成对SNP的检测,但由于它们必须通过凝胶电泳进行检测,因此,距快速、高效、自动化的目标还 相差甚远。传统的RFLP只能检测到SNP的一部分,测序技术既费时费力,又不易实现自动化,而且DNA链的二级结构还容易造成人工假相,使测序结果出现 偏差,不适宜于SNP的检测;SSCP则很难满足自动化的需要,难以大规模开展工作。因此,这些方法均未被广泛采用。DNA芯片技术是近年来新开发的一种DNA序列变异检测工具。DNA芯片(DNA chip),也称生物芯片(biochip),其大小与计算机上的CPU芯片相似,约1 cm2或更大些,以玻璃、硅、聚丙烯等作 为载体基片,芯片上铺了一层肉眼看不见的DNA纤维“地毯”,即具有特定碱基序列的探针。待测基因经提取后,被切成长短不一的片段,经荧光化学物质标记 后,注射到嵌有芯片的载片上。
‘叁’ 我家里面有个水库,想检测一下水库的水质看看缺什么东西,请问到哪去检查
水质检测,国联质检就可以做,权威的检测机构
‘肆’ 水库漏水检测
这种情况你还是需要找专人去解决的,因为专人掘掘砖问题,大部分人是没有办法帮你的,因为你这个问题是特别专业,有技术含量的
‘伍’ 水库水样分析常规检测指标有哪些
水污染物排放总量监测技术规范
水质-1,2-二氯苯、1,4-二氯苯、1,2,4-三氯苯的测定(气相色谱法)
水质-甲基肼的测定(对二甲氨基苯甲醛分光光度法)
水质-pH值的测定(玻璃电极法)
水质-氨氮的测定(气相分子吸收光谱法)
水质-铵的测定 (水杨酸分光光度法)
水质-铵的测定(纳氏试剂比色法)
水质-铵的测定(蒸馏和滴定法)
水质-钡的测定(电位滴定法)
水质-钡的测定(原子吸收分光光度法)
水质-苯胺类化合物的测定(N-(1-萘基)乙二胺偶氮分光光度法)
水质-苯并(a)芘的测定(乙酰化滤纸层析荧光分光光度法)
水质-苯系物的测定(气相色谱法)
水质-吡啶的测定(气相色谱法)
水质-丙烯腈的测定(气相色谱法)
水质采样 样品的保存和管理 技术规定
水质分析方法国家标准汇总
‘陆’ 检测超过15米的小型水库应设置什么监测和什么监测
摘要 小型水库枢纽由挡水坝、溢洪道、放水建筑物三个部分组成,通常称为水库的“三大件”。挡水坝是横拦河道的挡水建筑物,用于拦蓄水量,抬高水位。溢洪道是排泄洪水的建筑物,保证大坝安全。
‘柒’ 在WGS检验程序,列出至少五个在抽箱过程中应遵循的关键点是什么
人类基因组中的变异和人类的演化、疾病风险等方面都有着密切的联系。当前二代短读长高通量测序技术(NGS),虽然能够让测序成本大大降低,但这种短读长的测序方法也给基因组的变异检测(特别是结构性变异检测)带来了不小的挑战。SNP和Indel大家应该都见得比较多了,因此在这篇文章里我将主要讨论常见结构性变异的检测方法和有关软件以及它们的一些优缺点。
变异的分类
在开始之前,有必要先梳理一下人类基因组上的变异种类,按照目前业界的看法可以分为如下三个大类:
单碱基变异,即单核苷酸多态性(SNP),最常见也最简单的一种基因组变异形式;
很短的Insertion 和 Deletion,也常被我们合并起来称为Indel。主要指在基因组某个位置上发生较短长度的线性片段插入或者删除的现象。强调线性的原因是,这里的插入和删除是有前后顺序的与下述的结构性变异不同。Indel长度通常在50bp以下,更多时候甚至是不超过10bp,这个长度范围内的序列变化可以通过Smith-Waterman 的局部比对算法来准确获得,并且也能够在目前短读长的测序数据中较好地检测出来;
基因组结构性变异(Structure Variantions,简称SVs),这篇文章的重点,通常就是指基因组上大长度的序列变化和位置关系变化。类型很多,包括长度在50bp以上的长片段序列插入或者删除(Big Indel)、串联重复(Tandem repeate)、染色体倒位(Inversion)、染色体内部或染色体之间的序列易位(Translocation)、拷贝数变异(CNV)以及形式更为复杂的嵌合性变异。
值得一提的是,研究人员对基因组的结构性变异发生兴趣,主要还是由于在研究中发现:
SVs对基因组的影响比起SNP更大,一旦发生往往会给生命体带来重大影响,比如导致出生缺陷、癌症等;
有研究发现,基因组上的SVs比起SNP而言,更能代表人类群体的多样性特征;
稀有且相同的一些结构性变异往往和疾病(包括癌症)的发生相互关联甚至还是其直接的致病诱因。比如,《我不是药神》电影中提到的慢粒白血病,它就和基因组的结构性变异直接相关。它是由于细胞中的9号染色体长臂与22号染色体长臂相互易位,导致ABL基因和BCR基因融合,形成了一个会导致ABL异常表达的小型染色体(称为费城染色体)发生的。这是一个典型的结构性变异致癌的例子。
‘捌’ 如何检测数据变异大小差异的统计
差异分析过程与方法如下:
1、均值描述—Means过程
定义:Means过程是SPSS计算各种基本描述 统计量的过程。Means过程其实就是按照用户指 定条件,对样本进行分组计算均数和标准差,如 按性别计算各组的均数和标准差。
2、t检验
t检验就是检验统计量为t的假设检验。 用于检验两个变量之间的差异。
假设检验的一般步骤: ? 根据实际问题提出原假设H0与备择假设 H1。 ? 选择统计量t作为检验统计量,并在H0成立的条件下确定t的 分布。 ? 选择显着性水平 ,并根据统计量t的分布查表确定临界值及 H0的拒绝域。 ? 根据样本值计算统计量的值,并将其与临界值作比较。 ? 下结论:若统计量的值落入拒绝域内,就拒绝H0;否则,不 拒绝H0。
3、方差分析
方差分析基本概念
方差分析是R.A.Fister发明的,用于两个及两个以上样 本均数差别的显着性检验。方差分析方法在不同领域的各个 分析研究中都得到了广泛的应用。从方差入手的研究方法有 助于找到事物的内在规律性。
‘玖’ 水库漏水怎么检测到漏水的地方
现在都用物探方法检测!主要有高密度电磁法、E-4以及V8等物探方法。少量且缓慢的渗水很难检测到,稍大点的都能检测出来。地质勘探单位有些能做!或者搜索“云南核工业209打水井”能找到他们联系方式,因为它还能找地下冷热水以及做出地层的剖面,因此开采地下水的单位有些也能做。图片下有联系方式不知能否插入!