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大批量检测hiv是用的什么方法

发布时间:2022-02-18 03:51:24

⑴ 艾滋病的检测办法是什么

由于AIDS是一种新的疾病,对其了解正在逐步深入。对AIDS的诊断标准、临床分期、症状表现、机会性感染、病程及预后等的认识,均随AIDS研究的不断推进而不断深入。

一、AIDS的潜伏期

HIV从侵入人体到出现AIDS临床症状的时间称为AIDS的潜伏期。最早认为约为几个月到1年,后来大多数专家认为可能是5~8年,最近又发现了少数感染HIV者10多年仍无临床症状者,因此目前提出AIDS的潜伏期长短不一,因人而异,可能与下列因素有关:患者本身的免疫功能、健康状态、HIV的种类、数量、致病强度、感染途径等。

二、AIDS的检测办法及窗口期

对传染病的诊断比较理想的办法是在患者体内检测出该传染病的病原微生物。如疟疾要查到疟原虫,结核要找出结核杆菌。但有些病原微生物一旦侵入人体后,就立即与人体的体细胞融合在一起,因此较难检测到病原微生物本身,则代之以抗原检测。然而感染了HIV后,HIV及抗原检测在临床诊断中均难以实施,目前应用较广泛的是HIV感染者血清特异性抗体的检测。即HIV侵入人体后,与其他病原微生物一样,HIV也能激起人体的免疫系统产生相应抗体(但这种抗体消灭不了HIV病毒),这种特异抗体可在HIV感染者的体液中检测出。从HIV侵入人体到抗体的形成有一个免疫应答过程,这个过程所需的时间就称为“窗口期”。显然,在“窗口期”内,是无法通过检测特异性抗体的方法来检查出HIV的。现在认为大多数受HIV感染者,其“窗口期”在2周到4个月之间。

三、AIDS的分类及主要临床表现

1986年,美国疾病控制中心建议把AIDS的临床表现分为以下四类:

1.急性HIV感染,患者临床表现为一过性的发热、感冒样症状,无特异性,血清HIV抗体阳性。

2.无症状的HIV感染状态,HIV阳性,无任何临床症状,即处于AIDS的潜伏期。

3.持续的全身淋巴结肿大。

4.有非特异性的全身临床症状。这一类包括了多个亚型,如A亚型主要是指发热、腹泻、体重减轻等全身非特异性症状;B亚型主要是指痴呆、周围神经病变等症状。但这一类主要还是表现为所有AIDS者最终都要经历的机会性感染。

所谓机会性感染,是指许多病原微生物对免疫功能无缺损者并不致病,当病人由于某种原因免疫功能受损到一定程度时,这些原本不致病的病原微生物就乘机侵入人体并引起疾病。HIV破坏人体的免疫功能到一定程度时,常引起的机会性感染或称条件性感染有:卡氏肺囊虫性肺炎、隐孢子虫腹泻、疱疹病毒感染、白色念珠菌感染、巨细胞病毒感染、弓形体病、结核、卡波希氏肉瘤等,防不胜防,最终引起患者全身衰竭、死亡。

⑵ 艾滋病检测试纸用的什么检测方法

艾滋病检测试纸的原理是: 艾滋病检测试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂,可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体。所有操作时间约是15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质控对照、无需所有附加药剂。适合于临床检验、无偿献血现场筛查等。
抗体检测
抗体检测
血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围,可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。
确证试剂
筛检实验阳性血清的确证最常用的是Western blot(WB),由于该法相对窗口期较长,灵敏度稍差,而且成本高昂,因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高,WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。
FDA批准的另一类筛检确证试剂是-免疫荧光-试验(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相对简单,整个过程在1-1.5小时内即可结束。此法的主要缺点是需要昂贵的荧光检测仪和有经验的专业人员来观察评判结果,而且实验结果无法长期保存。现在FDA推荐在向WB不能确定的供血员发布最终结果时以IFA的阴性或阳性为准,但不作为血液合格的标准。
筛检试验
筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。2012年,世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。
颗粒凝集实验是另一种操作简单方便,成本低廉的检测方法,该方法结果可通过肉眼判定,灵敏度很高,特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用,缺点是必须使用新鲜样品,特异性较差。
80年代后期发展起来的斑点印迹检测(Dot-blot assay)是一种快速ELISA(Rapid ELISA)方法,这种方法操作极为简便,过程短暂,整个过程多数在5-10分钟内甚至3分钟内即可结束,但该法比ELISA和颗粒凝集试剂昂贵得多。
人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液检测试剂盒(胶体金法)就属于侧向免疫层析法(金免疫)类别,基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20分钟即可定性得出检测结果的快速诊断试剂,用于检测口腔粘膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。可用于自愿咨询检测、不愿采血、晕针患者的初筛。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需进行进一步筛查确认。[3]
【HIV阴性】说明从人体内检测不到HIV抗体,阴性符号以(-)表示。不能说没有感染HIV, 要看是什么时候检测的,在窗口期内,感染者的体内还没有产生HIV抗体,或还没有产生足量的HIV抗体,这时HIV检测是阴性结果,如果在窗口期之后检测的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV阳性】说明从人体内检测到了HIV抗体,阳性符号以(+)表示。
【检测结果不定因素】
感染还处于窗口期:从HIV进入体内到检测这段时间还不够长,因此血清还没有形成典型的抗体反应
艾滋病进展到终末期,抗体水平下降
其他非病毒蛋白抗体的交叉反应:自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输血或器官移植等情况下,身体可以产生一些抗体,其反应与HIVP24核心蛋白抗体引起的反应很相似

抗原检测
病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性,但HIV-1抗体确认阴性者的辅助诊断。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂,试剂必须经过SDA批准注册、在有效期内,其阳性结果必须依据试剂说明书经中和试验确认。HIV-1P24抗原检测的敏感性为30-90%,该结果仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1 P24抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除HIV感染,临床中一般不作为常规诊断项目。

核酸检测
HIV核酸检测可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展等。常用的HIV病毒载量检测方法包括逆转录PCR实验(RT-PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)以及实时荧光定量PCR技术。值得注意的是,每一种HIVRNA定量系统都有其最低检测限,即可以测出的最低拷贝数或国际单位,RNA定量检测时未测出不等于样品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除HIV感染;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV感染的辅助指标,不能单独用于HIV感染的诊断。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的实验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平。
HIV核酸定性检测也可用于HIV感染的辅助诊断,在分析HIV基因亚型和变异等基础研究中应用。通常使用PCR或RT-PCR技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。报告定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外,利用核酸检测方法的高度敏感性,使用集合核酸扩增检测技术和方法,对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测,可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。aware天猫

⑶ 三甲医院艾滋病检测用什么方法

你是问的初筛的试剂试纸以及方法吧。哪怕同样是三甲医院,不同的三甲医院也会使用不同的试剂试纸。由于我有一段时间未关注最新的试剂试纸了,只能根据我之前的记忆告诉你,至少是3代之后的产品,检测的是血液中的抗体载量,确诊试验是检测的抗原载量。其实我这样回答你未必满意,这样跟你说吧,艾滋病这个东西政府是很重视的,现在正规的三甲医院用的试剂试纸以及方法,无论是具体哪一种,金标也好,elisa也好,酶原也好,它们有一个共同点,灵敏度高,也就是说,在度过了窗口期的前提下,几乎不会漏诊(我看过一篇对比实验的文献,漏诊率是0)但是会出现假阳,也就是准确率不够高。所以总结一下,通俗的讲,窗口期之后去检测,是阴性就不用再担心了,是阳性的话还需要多种初筛加确诊,因为有可能是假阳。漏诊是要担责任的,政府又重视,所以现在的试剂试纸灵敏得很,只要是去的正规医疗机构,而且已经度过窗口期,你就不用担心试纸试剂和方法的问题。

⑷ 艾滋病检测用什么方法最好

如果你是在窗口期一周左右,强烈推荐你去上海维斯塔做核酸检测。前提是你要有钱,核酸检测的成本比较高的,大约要1000元左右。如果你高危2个月了,建议你上网买个试纸在家测试下好了,大约150元左右。

⑸ HIV有几种检测方法

一、 酶联免疫吸附试验(ELISA)

目前应用的ELISA法有8种之多。它们的特异性和敏感性超过99%。

二、 颗粒凝集法(PA)

PA为快速、简便的一种筛选方法。如属阳性,应经WB证实。PA不需任何特殊仪器,其结果用肉眼可判别。全过程仅需5分钟。缺点有假阳性,且价格昂贵。

三、快速试剂

(一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法)

雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外,肉眼观察,定性的免疫分析,检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用,本品检测阳性者,需进行进一步筛查确认。

(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂

InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法, 用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。

四、HIV-抗体确认实验

免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。国内常用的确认试验方法是WB。

(一_免疫印迹实验(westernblot,WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法,就HIV的病原学诊断而言,它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法,WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。

确认试验流程:

有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测,如果呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如果呈阳性反应,则报告HIV-1抗体阳性;如果不满足阳性标准,则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带,需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验,呈阴性反应,报告HIV-2抗体阴性;呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性,并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析,

WB的敏感性一般不低于初筛实验,但它的特异性很高,这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化,能够检测针对不同抗原成分的抗体,因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出,初筛试验尽管选择质量较好的试剂,如第三代ELISA,仍会有假阳性出现,必须通过确认试验才能得出准确结果。

(二)免疫荧光实验(IFA)

IFA法经济、简便、快速,曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜,需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响,结果不宜长期保存,IFA不宜在一般的实验室开展和应用。

⑹ HIV的检测步骤有哪些

艾滋病检测种类:血液试纸和唾液试纸两大类。
目前市场上的艾滋病试纸种类主要分为两大类,其中血液试纸主要包括雅培hiv试纸、爱康hiv试纸等。而唾液艾滋病试纸的种类就显得比较单调,其中使用最广泛的就是美国艾卫艾滋病检测试纸,深受很多的高危人群及恐艾症患者的青睐。

专家指出,自从第一例艾滋病毒被确诊以后,全球对于艾滋病毒的研究已经有30多年的历史,而在这些年中也确实取得了十分重大的突破,其中艾滋病试纸研发问世,其所提倡的艾滋病自测就为艾滋病毒的预防奠定了崭新的里程碑。据本站笔者了解得知,艾滋病试纸是一种使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂,可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体,从而准确的判断出患者体内是否含有艾滋病毒,进而了解该患者是否是艾滋病毒感染者。
艾滋病检测试纸优势多,不同艾滋病试纸准确率达99.99%
不同的艾滋病试纸在不同的情况下使用起来具有更高的准确性和方便性。但是这几种常见的HIV检测试纸使用起来主要有以下几个方面的优势:所有操作时间15分钟,所有的检测操作过程简便、出检测结果十分迅速又准确、而且全部都是自带质控对照,检测过程中还不需要使用附加药剂。值得一提的是,自己在家就能够独立完成所有的检测过程,并不再像过去那样一定要到专业的疾控中心检测,这样不但减轻了疑似感染者的心理折磨,而且还出检测结果快速高效,为感染者及时治疗争取了更多有利的时间。
据悉,要想准确知道检测结果,还需要注意的一个问题就是艾滋病检测的最佳时间,而国际上规定以高危发生的日期开始计算,2周后即可检测艾滋病病毒,以6周以后为准。而且如果在检测过程中要想更加准确了解结果,最好是一次性使用多种不同品牌的艾滋病试纸,注意准确率更高,几乎是100%。

⑺ 艾滋病有什么检查方法

艾滋病有几种检测方法?艾滋病的检测方法有很多种,目前应用最广泛的当属艾滋病抗体检测,其他有P24抗原检测、病毒载量检测、CD4+T淋巴细胞检测等等,因为艾滋病抗体一经出现终生携带,只有抗体检测能够用于艾滋病诊断,艾滋病抗体检测也就成为了应用最广泛的一种艾滋病检测方法。
国内外艾滋病抗体检测方法有哪些?目前国外用于 HIV 抗体筛查的方法很多,根据检测原理不同分为酶联免疫吸附法、凝集法和层析法,可对血液、唾液和尿液标本进行常规或快速检测。
常用的艾滋病抗体检测方法有哪些?在实际工作中常用的有酶联免疫吸附试验( ELISA )、明胶凝集试验和各种快速诊断试剂。
自 1985 年第一代 ELISA 试剂问世以来,随着医学技术的飞速发展,包被抗原已从一代的全病毒裂解物发展为目前以基因重组和多肽抗原包被和标记、有着良好敏感性和特异性的三代双抗原夹心试剂,检测亚型包括 HIV-1 、 HIV-2 和 HIV-1 型的 O 亚型,窗口期由 10 周缩短至 3-4 周。为避免窗口期传染,荷兰、法国等国已研制出第四代以重组的多肽抗原和抗 P24 抗体包被的双抗原夹心法试剂盒,可同时检测抗原抗体,使窗口期缩短了 2-3 周,但其临床价值有待评估。
按《规范》要求,我国采供血机构进行血液筛查和各医疗卫生机构常规筛查检测宜采用 ELISA 法,自采自供血的单位必须进行 HIV 抗体检测,在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区或大医院急诊手术前可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛选。对用 ELISA 试剂或快速诊断试剂进行的筛查实验如呈阴性反应,即报告 HIV 抗体阴性;对呈阳性反应的标本,筛查实验室应用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告 HIV 抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确认。筛查试剂必须是 HIV-1/2 混合型、经国家药品监督管理局( SDA )注册批准、批批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。
艾滋病抗体确证实验方法:
HIV 抗体筛查呈阳性反应的标本由于存在假阳性的可能,必须做确认试验。国际上有 3 种确认试验方法,包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用。确认试剂必须经 SDA 注册批准。免疫印迹试剂有 HIV-1/2 混合型和单一型

⑻ 有什么快速检测艾滋病的方法

艾滋病是人类免疫缺陷病毒感染引起的。临床常用的HIV抗体检测方法驻要有:酶联免疫吸附法、明胶颗粒凝集试验、免疫荧光检测法、免疫印迹检测法、放射免疫沉淀法。其中前三项常用于筛选试验,后二者用于确诊试验。目前大多采用荧光检测法进行筛查。

⑼ 常用的艾滋病检测方法有哪些

常用的艾滋病检测有:

  1. 抗体检测:HIV-1/HIV-2抗体检测是HIV 检测的金标准。经筛查试验(初筛和复检)确证试验两步。初筛实验室主要是采用酶联免疫试验、化学发光法或免疫荧光法试验。确认实验室进行复检主要是检测血清gp24及gp120抗体,灵敏度达99%,抗体初筛检测结果还要用免疫蛋白印迹法检测确认即确认试验。

  2. 抗原检测:抗HIVp24抗原单克隆抗体制备试剂,用酶联免疫法测血清HIVp24抗原。有助于抗体产生窗口期和新生儿早期感染的诊断。

  3. 病毒载量测定:病毒载量的测定可了解疾病进展,提供病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整以及为早期诊断提供参考。可用荧光定量PCR扩增技术。

⑽ 疾控中心检查hiv是用的什么方法是第几代。

一般都是3 或4代。通常要在2—12周后才能在血液中检测出病毒抗体,这段时间称为窗口期,但此时被感染者已具有传染性,所以病毒抗体检测阴性者,3个月后要进行复查。

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