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免疫球蛋白的检测方法

发布时间:2022-01-07 18:53:10

❶ 人体免疫球蛋白

我父亲2000年肺穿孔,肺结核住院,当时已经到咳血的程度。非常严重。后来在医院治好后,出院前打了人体免疫球蛋白。住院前体重严重下降,基本可以说是皮包骨。出院后因结核病人需要在平时饮食中补充营养,大概一年不到体重恢复到正常水平,脸上略显发福。在后来的10年,也就是2010年止。肺结核及其他炎症都为发生,客观的说这个人体免疫球蛋白还是对肺结核免疫低的人群有一定提高作用。在第一次住院到2010年间因父亲抽烟和喝酒的原因,导致肺穿孔,肺积水,胸膜炎增厚再次住院。到今天一共7次,今年9月按惯例来了一次出院后,大前天因空气质量和天气骤冷导致呼吸困难又来进来了,还用上呼吸机了。来一次身体就要差,医生说是肺功能失常最严重的级别,恢复不了的,之前就要求医生跟我父亲再打一次人体免疫球蛋白的,但是医生都是不建议打。因为存在一定安全性(药本身的供给体)自身可能也会有耐药性(或药品质量的好坏是非能到达第一次的效果现在很难说)。我也咨询过我做护士的同学,她的建议也是不要打,因为不知道供给体是否健康(我的理解是担心不是正规渠道生产的吧)她说提高免疫力还不如吃胎盘,起码知道供给者的健康状况。医院有熟人就可以了。(关于吃人肉是不是可以提高人体免疫力我不知道也不讨论),到目前我对人体免疫球蛋白还是抱好感的,因为确确实实对我父亲是起了很大作用,只怪我父亲透支身体,烟酒不戒也不在意营养的补充。所以今天再打一针人体免疫也为迟已晚。这东西对于你我正常人或者未到达免疫力低下者都不需要使用,但确确实实对我父亲当时对病毒没有抵抗能力的人却是一根救命良药。

如何用实验证明抗体是免疫球蛋白求技术帝!!给个大概的思路也好~谢谢了!

做一下免疫球蛋白电泳实验吧:
免疫电泳—免疫球蛋白鉴定
免疫电泳是将电泳与双向琼脂扩散相结合的一种抗原分析方法。根据抗原中各蛋白质组分的电荷和分子量大小不同,在电场作用下有不同的迁移率,从而可将混合物中各种不同组分分开。实验时,将被检抗原样品先放在琼脂板的小孔中进行电泳分离,再在其平行方向开槽,加入已知抗体,进行双向扩散。当相应抗原、抗体比例合适时,即形成白色沉淀弧,根据沉淀弧的数量、位置和形态,即可分析样品中所含的抗原成分及其性质。
二、器材与试剂
1.器材
电泳仪、电泳槽
打孔器、挖槽刀和图形卡
载玻片、定量吸管和吸耳球
毛细管
有盖搪瓷湿盒
煮沸水浴箱
2.试剂
(1)1.2%琼脂凝胶(2)生理盐水(3)抗原(4)抗体(5)pH8.6, 0.05M巴比妥缓冲液
(三)操作步骤:
用定量吸管吸取热琼脂3.5ml,平铺于载玻片上。待凝固后,按图形卡,用打孔器打孔,用针挑去孔内琼脂。
用毛细管将抗原(血清)加入小孔中,将琼脂板放入pH8.6, 0.05M巴比妥缓冲液的电泳槽中,两端用四层纱布搭桥,电泳时电压可调至110V,电泳45~60分钟。
从电泳槽中取出琼脂板,用刀片按图在两孔之间挖一小槽,用针挑去槽内琼脂,在槽内加入抗抗全血清抗体。
将载玻片置于搪瓷湿盒内,进行扩散24~48小时后观察结果。
四、操作注意事项
浇载玻片时,琼脂面要尽量铺平。
加样时应一次加满,并防止样品溢出孔外。
五、实验结果记录与分析
画出各孔间的沉淀线位置、数量、形态,并予以简要的说明。

❸ 免疫学检验最常用的方法拜托各位了 3Q

以下是几种常用的免疫学技术: 1.免疫荧光技术 免疫荧光技术是利用荧光素标记的抗体(或抗原)检测组织、 细胞或血清 中的相应抗原(或抗体)的方法。由于荧光抗体具有安全、 灵敏的特点,因此已 广泛应用在免疫荧光检测和流式细胞计数领域。 根据荧光素标记的方式不同,可 分为直标荧光抗体和间标荧光抗体。 间标荧光抗体中一抗并不直接连接荧光素, 而是先将一抗结合到蛋白,然后带有荧光素的二抗再结合至一抗。 通过二抗的结 合,能将信号进行放大,因此能在一定程度上提高检测的灵敏度, 但是随之带来 的高背景也降低了检测的特异性。近年来, 随着荧光素和荧光检测技术的不断进 步,荧光检测的灵敏度已经接近同位素检测的水平, 直接标记的荧光抗体逐渐取 代间接标记抗体。这些标记了荧光素的抗体直接结合至抗原, 大大提高了检测的 特异性,使检测的结果更加准确可靠。荧光检测技术的发展, 使得免疫荧光技术 在传染病诊断上有广泛的用途,如在细菌、病毒、 螺旋体感染的疾病,检查IgM 抗体,做为近期接触抗原的标志。 利用单克隆荧光直接标记抗体鉴定淋巴细胞的 亚类。通过流式细胞仪,针对细胞表面不同抗原, 可以同时使用多种不同的荧光 抗体,对同一细胞进行多标记染色。 2.放射免疫检测 放射免疫检测技术是目前灵敏度最高的检测技术, 利用放射性同素标记抗 原(或抗体),与相应抗体(或抗原)结合后, 通过测定抗原抗体结合物的放射 性检测结果。放射性同位素具有pg 级的灵敏度,且利用反复曝光的方法可对痕 量物质进行定量检测。 但放射性同位素对人体的损伤也限制了该方法的使用。 3.酶联免疫吸附试验(ELISA) 酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法。 该方法是将二抗标记上 酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来, 根据酶作用底物后的 显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng 水平。常见用于标记的酶有辣 根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)等。 由于酶联免疫法无需特殊的仪器, 检测简单,因此被广泛应用于疾病检测。常用的方法有间接法、 夹心法以及BAS -ELISA。间接法是先将待测的蛋白抱被在孔板内, 然后依次加入一抗、标记了 酶的二抗和底物显色,通过仪器(例如酶标仪)定量检测抗原。 这种方法操作简 单但由于高背景而特异性较差。目前已逐渐被夹心法取代。 夹心法利用二种一抗 对目标抗原进行捕获和固定, 在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性。近 年来,抗原的定量检测技术也不断推陈出新。近年来, 在夹心法ELISA 的基础上, 开发了多抗原检测试剂盒, 能同时检测微量液相样本中多个抗原含量。这项技术 的应用大大缩短了诊断的时间,提高诊断的可靠性和及时性。 4.免疫金胶体技术 胶体金技术经过30 多年的发展到现在已日趋成熟,该方法是将二抗标记上 胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应, 最终将胶体金标记的二抗吸附于渗 滤膜上,此方法简单,快速,广泛应用于临床筛查。

❹ 可作为免疫球蛋白异常增殖性疾病确证的检测方法不包括

正确答案:C
解析:免疫球蛋白异常增殖病的检测,常用的免疫学方法有:血清区带电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、血清免疫球蛋白定量

❺ 免疫学的检测方法

免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫。

❻ 免疫球蛋白的检测方法

异常血清免疫球蛋白检测方法学探讨(vip资料)
需付费下载

保健食品检验方法--ig检验
sfda网站和保健食品相关网站上都可以检索到。

关于牛初乳及其制品中免疫球蛋白G的检测方法

溶液配制:

1) 缓冲液A: 0.05mol.L-1磷酸二氢钠溶液(pH6.5);

2) 缓冲液B: 0.05mol.L-1甘氨酸溶液(pH2.5);

3)IgG贮液:sigma公司IgG配成浓度约4mg.mL-1溶液,冷冻浓缩至200mL。

样品制备和检测:取一定量牛初乳粉,溶解于缓冲液A,制成浓度2mg/mL的溶液,用0.45mm微滤器过滤后进样。按下表方案使用缓冲液B梯度洗脱。控制不同进样体积(25~200mL)产生标准响应曲线(5mg到70mg)。IgG贮液用缓冲液A稀释后,制成IgG标准曲线(4~40mg)。通过280nm处吸收值监测洗脱液蛋白浓度。

表1 蛋白质G亲合HPLC的梯度洗脱条件

时间(min) 流速(ml/min) %A %B 梯度
0 1.0 100 0 -
0.5 1.0 100 0 -
1.0 2.0 100 0 线性
1.5 2.0 0 100 -
4.0 2.0 0 100 线性
5.0 1.0 100 0 -
7.0 1.0 100 0 -

具体操作可参阅国标GB/T 5009.194- 2003和曹劲松《初乳功能性食品》第10章。

3、 RID与HPLC的比较

一般地,HPLC检测结果将高于RID检测结果。

我们实验室对比研究了牛初乳IgG抗原决定簇部位(或第二抗体结合部位)和蛋白质G结合部位的变性动力学,证实:在实验温度(69℃~81℃)范围内,IgG分子上蛋白质G结合部位在热处理过程中更为耐热,或者说IgG抗原决定簇部位相对更为热敏感。从而,揭示了上述现象的本质:RID测到的IgG在整体变性程度上低于HPLC测到的IgG。因此,国外一些将RID和ELISA方法测定的IgG含量视为“免疫活性IgG”是比较科学的。

在各温度下IgG分子上蛋白质G结合部位变性反应各温度下的D值均比IgG分子上第二抗体结合部位变性反应的相应温度下的D值大,说明IgG分子上蛋白质G结合部位在热处理过程中要比IgG抗原决定簇部位更为耐热。该温度范围内IgG分子上抗原决定簇部位热变性活化能(270.55kJ/moL)大大低于IgG分子上蛋白质G结合部位热变性活化能(316.42kJ/moL)。在该温度范围内IgG分子上第二抗体结合部位变性反应的Z值为9.34℃,IgG分子上蛋白质G结合部位变性反应的Z值为7.25℃,可认为:IgG分子上第二抗体结合部位的稳定性在上述温度范围内相对恒定,而蛋白质G结合部位的稳定性相对容易随温度发生变化。在酸性乳清溶液中,也获得类似的研究结论。
上述研究结果即将发表于《Journal of Agricultural and Food Chemistry》和《Journal of Food Science》。

4、其它

随着未来技术的发展,并不排除其它可能的IgG检测方法。例如ELISA法,国内已经建立,而且有国外公司可提供试剂盒。

❼ 在诊断单克隆丙种球蛋白病时血清免疫球蛋白定量分析推荐的方法是

正确答案:D
解析:目前血清免疫球蛋白和轻链的定量检测以免疫比浊法为主,并有专门的测定设备,使得免疫球蛋白和轻链定量更加准确可靠,成为诊断疾病、判断病情和观察治疗效果的重要手段
。因此,本题最佳答案是D

❽ 细胞免疫功能测定的常用方法

正确答案:A
解析:免疫系统功能分为体液免疫和细胞免疫
。体液免疫包括:补体、甘露聚糖结合素、急性期蛋白、干扰素、免疫球蛋白
。B、C、D、E均为体液免疫的测定
。细胞免疫包括:中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、树突细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞
。故选A

❾ 如何看免疫球蛋白的化验报告

免疫球蛋白是指存在于血浆中的一类具有免疫功能的球蛋白,它是抗体的表现形式和物质基础,是由浆细胞和B淋巴细胞产生。人体存在的免疫球蛋白每日约更换1/4。健康成人每日合成1.2-5克,当发生感染时,合成可增加7倍,临床上很多疾病免疫球蛋白都发生明显变化,所以有的病人需做免疫球蛋白检查。
免疫球蛋白分为五种,分别是免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)、和免疫球蛋白E(IgE)。通常由于IgD临床意义不大,IgE的含量少只有IgG的一百万分之一,所以此两项不测或用其它的方法检测。
免疫球蛋白增高时可见于多发性骨髓瘤,自发的冷球蛋白血症,重链病、轻链病,慢性细胞白血病,淋巴瘤,感染,自身免疫病,慢性活动性肝炎,寄生虫病,艾滋病等疾病。免疫球蛋白减少可见于先天性免疫缺陷,胃病,性联丙种球蛋白缺乏症,恶性肿瘤,免疫抑制性药物,蛋白质丢失,营养不良,原发性胆汁性肝硬化等疾病。

❿ 免疫球蛋白检测的方法有几种速率散射比浊法和单向扩散法的优缺点是

速率散射比浊法、单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和免疫透射比浊法等

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