血红蛋白检测方法

1. 血红蛋白检测是检测什么的

主要检测的是你是否是贫血的，贫血严重的话，就会引起休克等一系列的疾病的，需要输血稳定的，一旦发现贫血的话，就要引起重视的。。。

2. 血红蛋白(Hb)测定的血红蛋白测定

正常参考值
男：(120～160)g/L；女：(110～160)g/L；新生儿：(170～200)g/L。
临床意义
血红蛋白测定的临床意义同红细胞计数，但在各种贫血时，由于红细胞中的血红蛋白含量不同，二者可以不一致，如缺铁性贫血时红细胞数降低很少有时甚至升高。因此，同时测定红细胞和血红蛋白，对贫血类型的鉴别有重要意义。血红蛋白又称血色素是红细胞的主要组成部分，能与氧结合，运输氧和二氧化碳。

3. 糖化血红蛋白的检测方法

1、阳离子交换色谱法
原理：糖化导致血红蛋白分子表面阳离子丢失。在弱的阳离子交换剂中，例如Biorex70，伴有增加的离子浓度和（或）pH下降，糖化血红蛋白在非糖化血红蛋白前先洗脱。这现象产生了糖化血红蛋白最初的术语“快速血红蛋白”。阳离子交换色谱法可用于小型、微型或大型柱层析方法或部分或全自动的PHLC/FPLC方法。因为，其他翻译后修饰血红蛋白，例如醛亚胺型、甲酰化、乙酰化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和异常血红蛋白电荷交换也不同于正常的HbA0，所以已经列出了许多阳离子交换层析法的干扰因素。使用常规HPLC的方法。分离糖化血红蛋白亚组分是能达到满足需求的临床精密度。然而，已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血红蛋白部分。少数糖化血红蛋白也整合到HbA0主峰中。通过使用特殊的柱原料（poly-CATA）和30～40 min分离时间可以改善分离效果。这些方法可以作为参考步骤但不适合常规使用。所有的阳离子交换色谱法对pH和温度的变化敏感，因此要控制pH和温度。
说明：根据红细胞代谢动力学推测初始HbA1c值大约每日破坏1/120（≈0.83%）。因为糖化在合适的治疗下甚至健康人也产生，故这个理论值在体外不能达到。控制不理想的糖尿病患者通过加强治疗而达到血糖量正常，可以发现HbA1c值最大下降率以大约每10 d下降正常血糖的1%（绝对的）。由于测定糖化血红蛋白方法的精确性，两次测定值HbA1c的差异大约1%就可认为具有临床相关性。因为这些原因，在HbA1c两次测定间至少有2周的时间，推荐4～6周的间隔。
因为升高的糖化血红蛋白值是长期高糖血症的糖尿病患者相当可靠的指示剂，因而是可能诊断糖尿病的。在未治疗的个体，正常的糖化血红蛋白值临床上可以排除明显的糖尿病。但由于它不能检测糖耐量受损，所以作为诊断和（或）筛选目的唯一的参数，使用糖化血红蛋白是存在问题的。
2、电泳法
原理：相比于非糖化血红蛋白，因糖化而变化的总电荷和糖化血红蛋白的等电点变化是琼脂糖凝胶或者pH梯度5.0～6.5的凝胶等电聚焦电泳分离的基础。琼脂糖凝胶电泳的血红蛋白亚组分分辨率很小，而等电聚焦可以更好地使亚组分分离。可能由于试验的自动化程度不足，重要性已经下降。
3、亲和层析法
原理：硼酸结合顺式-羟基。商品化的m-氨基苯硼酸琼脂糖共价结合的亲和柱已可用于微柱分析检测。将血样本中的血红蛋白加到层析柱后，所有的糖化血红蛋白（HbA1和旁链糖化的血红蛋白；总糖化血红蛋白）与硼酸结合而非糖化血红蛋白通过层析柱可被测量。在加入高浓度也包含顺式-羟基的多羟基复合物，例如山梨醇后，糖化血红蛋白与硼酸的结合被替换而从柱子上洗脱下来。亲和层析法对经翻译以后修饰的血红蛋白和病理血红蛋白的影响相对不敏感。利用亲和层析法，仅能测定总糖化血红蛋白。广泛使用的亲和层析方法，允许用经验算法从总糖化血红蛋白值计算出“标准的HbA1c”。
4、免疫分析法
在缬氨酸β-N-末端糖化的血红蛋白提供了一个容易被抗体识别的抗原表位。可以用单克隆抗体或多克隆抗体进行放射免疫分析和免疫酶学分析测定，抗体特异识别β链N-末端糖化的血红蛋白最后4～8个氨基酸组成的抗原表位。异常的血红蛋白或翻译后经修饰的血红蛋白无干扰。
目前的免疫化学试验不仅检测HbA1c，通常也同时检测HbA2c，因为血红蛋白A2糖化δ链的表位是相同的。抗体直接抗β-链的最后四个氨基酸的糖化表位的免疫化学试验也可用进行检测，例如HbS1c。在大多数情况下HbA2c意义不大，虽然镰刀细胞病时可以准确地测定缬氨酸β-N-氨基末端糖化程度，但它仍不能100%代表HbA1c。
5、离子层析法
离子层析法精密度高、重复性好且操作简单, 被临床广泛采用。检测原理由于血红蛋白β-链N 末端缬氨酸糖化后所带电荷不同, 在偏酸溶液中总糖化血红蛋白( GH b) 及H bA 均具有阳离子的特性, 因此经过阳离子交换层析柱时可被偏酸的缓冲液平衡过的树脂来吸附, 但二者吸附率不同, GH b正电荷较少吸附率较低, H bA 正电荷较多吸附率较高。用不同pH 的磷酸盐缓冲液可以分次洗脱出GH b 和H bA, 用KCN 可将H b转化为高铁氰化血红蛋白, 用分光光度计测定。或者得到相应的H b层析谱, 其横坐标是时间, 纵坐标是百分比。HbA1c值以百分率来表示。现在大部分都用全自动测定仪测定。
6、等电点聚集法
是测定GH b的新技术, 它是在聚丙烯酞凝胶中加人载体两性介质的薄板上形成一个由阳极到阴极逐渐增加的pH 梯度, 溶血液中各个组份将移动到各自的等电点的pH 位置上, 这样就得到比一般电泳法更好的分划效果和比较集中的色带, 通过分辨率高的微量光密度仪扫描, 可以准确地测定出各自组份的含量。由于它能够分辨出一级结构不同的HbA、HbAc、HbF、HbS 及HbC等, 可完全避开各种物质的干扰。
7、化学发光法
采用离子捕捉免疫分析法, 应用抗原抗体反应原理, 联以荧光标记物, 通过连接带负电的多阴离子复合物, 吸附到带正电的纤维表面, 经过一系列彻底清洗等步骤后, 测定荧光强度变化率, 计算浓度。采用专用试剂包和免疫发光分析仪,其检测系统易于规范和重复, 可减少操作技术误差, 检测的灵敏度和特异性高, 批内、批间变异系数小, 回收率高, 准确度高, 交叉污染率小, 影响因素少。
8、酶法
原理为用特殊蛋白酶分解Hb, 3~ 5 min内果糖基氨基酸从H b分离, 果糖基氨基酸氧化酶( FAOD )从果糖基氨基酸产生H2O2, H2O2经POD与DA- 64反应, 选择751 nm 测吸光度改变求得GHb浓度。

4. 血红蛋白的检测原理

稀释标本中加入溶血剂，红细胞溶解释放出血红蛋白： HGB+CN-氰化高铁血红蛋白（棕红色） HiCN是一种非常稳定的血红蛋白衍生物，血液中的各种血红蛋白成分均能被转化，其吸收峰为540nm，其进入血红蛋白比色系统，即可报告显示血红蛋白浓度。 氰化高铁血红蛋白比色法，是ICSH和WHO推荐的标准化血红蛋白测定法。 红细胞通过微孔时，形成的相应大小的脉冲，将脉冲的高度叠加，经换算可得红细胞的比积。有的仪器先以单个细胞高度计算红细胞平均体积，再乘以红细胞数，得出红细胞比积。

5. 常见的检测红细胞的手段有哪些

红细胞检查计数、血红蛋白测定、形态检查、比容测定、生物活性检测、ELISA检测、DNA聚全酶链反应、血流变指数检测、甲襞微循环检测、血细胞比容检测等，这些都是常见的关于红细胞的检测手段，但大多数检测方法都是数值，指标性的，一般老百姓也看不懂。
红细胞影像系统此类是通过高分辨的显微镜，很直观的看到红细胞的聚集性、变形性和滚动能力。

6. 糖化血红蛋白仪的检测方法

糖化血红蛋白检测方法很多，常用的有微柱法离子交换层析、亲和层析、高压液相、免疫凝集、离子捕获法、电泳法等。 如毛细管电泳也能分离检测糖化血红蛋白和血红蛋白质的变异体，但目前尚无商品化，具有批量样本通过能力的仪器面世，相当程度地限制了该方法的临床应用。
金标法的糖化血红蛋白仪,CV值小于5%。
综上所述，糖化血红蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一项良好的指标，糖尿病患者应定期检测糖化血红蛋白，并据此制定，修正相关治疗方案。各医院可根据自身标本的多少，选择使用有关糖化血红蛋白的检测仪器，开展该项目的检测。

7. 血红蛋白浓度（HGB）是指血液中血红蛋白的浓度吗如何测定

现在多用血液分析仪做.
最经典的方法当然是氰化高铁血红蛋白法了.但是要求比较严格,还涉及剧毒试剂,不易推广.
沙利法以经淘汰.
还有碱性血红蛋白测定法,也需要比色计.

这有几篇论文介绍
血红蛋白测定方法的发展及评价.pdf

血红蛋白测定方法的发展及评价.pdf (148.77k)

血红蛋白测定现状及其测定方法之管见.pdf

血红蛋白测定现状及其测定方法之管见.pdf (73.24k)

三种血红蛋白测定方法的比较：介绍一种新的血红蛋白测定法

三种血红蛋白测定方法的比较：介绍一种新的血红蛋白测定法.pdf (54.13k)

8. 如何测定病犬的血红蛋白

血红蛋白是红细胞的主要成分，具有运输氧和二氧化碳的功能。测定血红蛋白的方法大致可分为比色法、比重法、血氧法和测铁法4种。但目前临床上常用的是沙利氏目视比色法。用该法测定血红蛋白的基本原理：一定量的血液加入稀盐酸后，生成棕褐色的盐酸高铁血红蛋白，将之与血红蛋白计的标准色柱比色，求得每100毫升血液中的血红蛋白克数或百分数。沙利氏目视比色法的主要器械为血红蛋白计。国产的血红蛋白计，规定以100毫升血液中含血红蛋白14.5克为100%，其测定管的两侧有刻度，从下往上，一侧刻有2～24，表示100毫升血液中血红蛋白的百分数；另一侧刻有20～160，表示100毫升血液中血红蛋白的百分数。其吸血管有容积为20立方毫米的刻度。

测定血红蛋白的方法是先于测定管内加入1/10摩尔浓度盐酸液（亦可用1%盐酸代替）至刻度之处，接着用吸血管吸抗凝血至刻度20立方毫米处，用纱布拭净吸血管尖端附着的血液，迅速地将血液吹入测定管的盐酸内，然后将吸血管在盐酸液内反复吸吹，洗涤数次（防止产生气泡），再轻轻摇动测定管，或用玻璃棒搅拌，使血液与盐酸液混合，静置10分钟之后，慢慢沿测定管壁滴加蒸馏水（或1%盐酸液）随加随用玻璃棒搅拌，直至液体的颜色与标准色柱一致时为止，然后读取测定管内液体凹面的刻度数，即为100毫升血液中血红蛋白的克数或百分数。健康犬血红蛋白的平均值为13.6%克。血红蛋白增多见于机体脱水性疾病，如重剧呕吐、腹泻等；血红蛋白减少则见于各种贫血，如营养不良性贫血、溶血性贫血和再生障碍性贫血等。

测定血红蛋白时应注意：①吸血量要准确，血量直接影响比色的结果；②搅拌要均匀，防止血凝块产生；③放置时间不能随意延长或缩短，因为血液在盐酸液中转化为酸性高铁血红蛋白是逐渐进行的。据测，1分钟可转变为75%，5分钟转变为88%，10分钟转变为95%。因此，放置时间长短直接影响测定结果。另外，为了使测定结果更为准确，可在读数后再加蒸馏水1滴，搅拌混匀再比色，再读数。如色调变淡，以前1次的读数为准；色调不变淡时，则应以后1次的读数为准。

9. 血红蛋白检验是检查什么正常是多少

L：110---150g/男、类型，及贫血程度血红蛋白及红细胞主要是看有没有贫血：120--160g/，正常女;L

10. 血红蛋白如何测定血红蛋白计测出来的准确度高吗

做血常规检查就可以