大肠菌群mpn检测方法

⑴ 大肠杆菌试验MPN法的特点

MPN计数又称稀释培养计数，适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势，但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰，
并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。本法特别适合于测定土壤微生物中的特定生理群（如氨化、硝化、纤维素分解、固氮、硫化和反硫化细菌等。）的数量和检测污水、牛奶及其他食品中特殊微生物类群（如大肠菌群）的数量，缺点是只适于进行特殊生理类群的测定，结果也较粗放，只有在因某种原因不能使用平板计数时才采用。

⑵ 大肠菌群MPN计数法

不能换算，因为MPN法算出来的是活细菌的数量，而平板计数法是死的活的一起计数，平板计数法的结果一般比MPN法大。

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⑶ 食品中的大肠杆菌的检测方法

1. 培养基配置

2. 检样、稀释

3. 乳糖胆盐发酵管观察：（36摄氏度24小时）

   3.1不产气 大肠杆菌阴性

   3.2产气伊红美蓝琼脂倒平板

   3.2.1G染色，G阳性，说明大肠杆菌阴性

   3.2.2乳糖发酵管（36摄氏度24小时），同样不产气，大肠杆菌阴性

⑷ 大肠杆菌与大肠菌群检测方法

进入无菌室步骤
1． 进入无菌室前应打开紫光灯进行灭菌，时间为0。5—1小时。
2． 关灯后0•5小时后放可进入。
3． 进入更衣间更换衣服，佩带口罩、帽子、鞋套
实验步骤
1， 进入无菌室后，先把酒精灯点燃，然后在用酒精棉进行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脱脂棉中制成）
2， 准备双料管3根，单料管6根，培养皿7个。
3， 直接从原液中吸取10ml放入双料管，（3根每根各10ml）
4， 再吸取原液1ml放入单料管中（3根每根各1ml）
5， 再吸取原液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
6， 再吸取原液1ml放入盐水管中制成－1梯度的样液
7， 更换一根吸管，从－1梯度的样液吸取1ml样液放入单料管中（3根每根各1ml）
8， 再吸取－1梯度样液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
9， 再把每个培养皿中到入营养琼脂平铺底部摇允（注另作3个培养皿：空气空白，把培养皿打开十分钟倒入营养琼脂平铺底部摇匀。琼脂空白，把培养皿中倒入营养琼脂平铺底部摇匀。盐水空白，吸1ml生理盐水放入培养皿中，倒入营养琼脂平铺底部摇匀。）
10， 把全部作好的放入培养箱中，温度36C＋－1×C，大肠24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培养皿中的琼脂凝固后反转过来放入培养箱中）
11， 梯度：－1梯度为1ml原液加入9ml生理盐水配成
－2梯度为1ml－1梯度样液加入9ml生理盐水配成
－3梯度－4梯度配制方法和－1、－2梯度的配制方法一样
12， 如果大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形然后放入培养箱中36C，24H＋－2H 。（接种笔在每次使用前必须在酒精灯上消毒。所画之形不能划破伊红美兰琼脂表面）
13， 取出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中 ，然后再培养36C＋－1C，24H＋＋－2H。
14， 再在伊红美兰平板之字形上挑菌，放到载玻片上作镜检。（方法见标准）
15， 只有镜检成紫红色和乳糖复发酵管产气同时成立的情况下，才能断定这根管是不合格。
16， 清洗消毒这根试管前必须进行消毒霉菌，121C，0。5小时同时不能放气。

⑸ 大肠菌群测定的MPN法结果计算

食材明细蛇肉1000克盐2勺生姜5克葱花2克枸杞5克蛇油2勺胡椒粉1勺蛇汤的做法步骤 1、蛇要趁着新鲜赶紧清洗好；熬出的汤汁才会健康营养又鲜美。
2、将蛇用清水洗净；两手稍微用力的拉扯蛇皮和蛇肉使之分离。
取出蛇胆，注意蛇胆不要弄破。
否则蛇感染后会很苦的。
道理和鱼胆一样，拉出蛇肚子里的内脏。
将蛇皮和蛇肉用手拉扯分开。
3、洗净处理好的蛇肉放入干净的碟中备用。
蛇皮放蛇皮放在一边另外做凉拌菜。
将洗净的蛇肉用剪刀剪成五至六公分长。
4、将蛇肉放入热水中，煮至水开；倒掉煮出的泡沫及水；洗净蛇段备用。
将蛇油放入干锅中，小火熬成油倒掉油渣；生姜用蛇油爆香。
加入几人份的水后；分别放入蛇肉；蛇内脏；黑木耳倒入料酒后；按下老火汤的键；要煲汤三小时。
5、汤煲好后；放入适量的盐，胡椒粉；盛入汤碗中撒上枸杞；葱花。
蛇汤味道极其鲜美；而且瘦身排毒养颜滋补，蛇肉属于凉性；是一款极好的夏季健康养颜的滋补汤。
吃蛇肉好吗
好吃啊，汤鲜味美！ 蛇肉性味甘咸平，含有蛋白质、脂肪、多种无机盐、糖类、钙、磷、 铁、锌及维生素A、维生素B1-维生素B2等成分。
具有补气血，祛风邪，通经络的作用。
适宜人群： 适宜体质虚弱，气血不足，营养不良者食用；风湿痹痛，四肢麻木，风湿及类风湿性关节炎，脊柱炎患者食用；大疯痢疾，过敏性皮肤病，末梢神经麻痹者食用；骨结核，关节结核，淋巴结核之人食用。
不适宜人群： 孕妇慎用。
还有蛇肉与萝卜同食，会中毒。
一岁小孩能否吃蛇肉我家宝宝刚一周岁,别人都说蛇肉好吃,不知小孩...
有的人说小孩吃了蛇肉汤可以皮肤光滑、不长疖子。
但要注意蛇患有许多疾病，有的蛇有寄生虫，有的蛇患有肝炎、癌症等。
因此，不建议宝宝食用蛇肉。
一般1岁多的孩子才可以吃少量蛇汤。
还是稳妥一点吧，毕竟太小了。
如果天太热有点上火，可以吃点石蛙肉，还有鸽子蛋也是凉的。

⑹ 大肠杆菌的检测方法

多管发酵法。

多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法，这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h，而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶，从而释放出荧光产物，进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。

在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵，分离培养试验，利用伊红美蓝培养皿分离，接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵，最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高，成本低，但是检测时间较长，容易受其他条件干扰，进而影响到测定结果的精确度。

(6)大肠菌群mpn检测方法扩展阅读：

注意事项：

1、检样时注意无菌操作。

2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水，接种时可采用九管法，设置三个梯度，分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL，每一个稀释度的试管应充分混匀。

3、每次实验需要有阴性对照。

4、使用小倒管培养基配制时，为排净气泡，灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧，灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、

5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0，取出培养基放到冰箱冷却，效果会比较好。

⑺ 请教：MPN计数法测大肠菌群怎样检索MPN表

首先通过培养和证实试验，获得相邻的三个稀释度有多少个阳性培养管，然后将这一个数值组合去查询MPN表，就可以获得MPN数值。
例如，相邻的三个稀释度的阳性管数分别是3、1、0
那么就在MPN表上寻找310组合所对应的MPN数值，即可。

⑻ 大肠菌群的检测方法

进入无菌室步骤
1．进入无菌室前应打开紫光灯进行灭菌，时间为0。5—1小时。
2．关灯后0•5小时后放可进入。
3．进入更衣间更换衣服，佩带口罩、帽子、鞋套
实验步骤
1，进入无菌室后，先把酒精灯点燃，然后在用酒精棉进行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脱脂棉中制成）
2，准备双料管3根，单料管6根，培养皿7个。
3，直接从原液中吸取10ml放入双料管，（3根每根各10ml）
4，再吸取原液1ml放入单料管中（3根每根各1ml）
5，再吸取原液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
6，再吸取原液1ml放入盐水管中制成－1梯度的样液
7，更换一根吸管，从－1梯度的样液吸取1ml样液放入单料管中（3根每根各1ml）
8，再吸取－1梯度样液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
9，再把每个培养皿中到入营养琼脂平铺底部摇允（注另作3个培养皿：空气空白，把培养皿打开十分钟倒入营养琼脂平铺底部摇匀。琼脂空白，把培养皿中倒入营养琼脂平铺底部摇匀。盐水空白，吸1ml生理盐水放入培养皿中，倒入营养琼脂平铺底部摇匀。）
10，把全部作好的放入培养箱中，温度36C＋－1×C，大肠24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培养皿中的琼脂凝固后反转过来放入培养箱中）
11，梯度：－1梯度为1ml原液加入9ml生理盐水配成
－2梯度为1ml－1梯度样液加入9ml生理盐水配成
－3梯度－4梯度配制方法和－1、－2梯度的配制方法一样
12，如果大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形然后放入培养箱中36C，24H＋－2H。（接种笔在每次使用前必须在酒精灯上消毒。所画之形不能划破伊红美兰琼脂表面）
13，取出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中，然后再培养36C＋－1C，24H＋＋－2H。
14，再在伊红美兰平板之字形上挑菌，放到载玻片上作镜检。（方法见标准）
15，只有镜检成紫红色和乳糖复发酵管产气同时成立的情况下，才能断定这根管是不合格。
16，清洗消毒这根试管前必须进行消毒霉菌，121C，0。5小时同时不能放气。

⑼ 大肠菌群检测方法

GB 4789.3-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》中的规定操作步骤：

1、乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

2、分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。

3、证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。

SN0169-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》规定操作：

1、推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

2、证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值。

(9)大肠菌群mpn检测方法扩展阅读：

大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。

粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在，因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。