检测受体的密度和数量用什么方法

① 用什么检查方法确定帕金森这种疾病

生活中人们出现手抖的症状会误以为就是患上了帕金森疾病，其实仅仅凭借手抖是不能判断老年人就患上帕金森疾病的，还应该前往正规医院经过全面的检查才能确诊，早期的帕金森病确诊至关重要，如果早期没有得到一个及时的确诊，或者是由于误诊而导致错过早期治疗的最佳时间，虽说中晚期可通过脑立体定向手术治疗，但长期没有得到正确治疗导致的并发症，手术效果也没有早期的好。所以早期的确诊非常重要，那么如何确诊帕金森病呢，确诊帕金森病需要做哪些检查呢？
一、主要有分子生物学检查。这种检查方法采用的是高效液相色谱，通过这个色谱可有效地检测到患者的脑脊液及尿中HVA含量降低。基因检测采用DNA印迹技术，PCR、序列分析等在少数家族性病人可能会发现基因突变。
二、功能显像检测。采用PET或spect与特定的放射性核素检测。如6-(18氟)-左旋多巴(6-fd)研究多巴胺的代谢，可获得有关多巴胺受体的密度及亲和力的信息，并发现帕金森病人脑内多巴胺代谢功能显着降低，这也是一种检查方法之一。疾病早期可发现d2型多巴胺受体活性早期超敏(代偿期)，后期低敏(失代偿期)，以及多巴胺递质合成减少，对早期诊断、鉴别诊断及病情进展监测均有价值。但造价昂贵，尚未广泛用于临床实践中。
三、脑CT、MRI检查。检查帕金森病的这个检查一般无特征性所见。老年病人可有不同程度脑萎缩、脑室扩大，部分病人伴脑腔隙性梗死灶，个别出现基底节钙化。近来有学者证明MRI中帕金森病人于TL加权象可见白质高信号，且出现于半卵圆中心的前部及侧脑室前角周围白质。
四、血脑脊液检查。可检出多巴胺水平是否降低，其代谢产物高香草酸浓度降低。5-羟色胺的代谢产物与羟吲哚醋酸含量减低;多巴胺怍腔附档脑脊液中生长抑素明显降低及氨基丁酸水平减低等。
五、常规实验室检查。常规实验室检查是帕金森患者一定要做的检查项目。一般均在正常范围，个别可有高脂血症、糖尿病、异常心电图等改变。
以上这些是医院会进行的确诊帕金森病的检查项目，提醒大家对于帕金森病一定要做到早发现早治疗，及时的确诊对以后的治疗会有大大的帮助。

② 细胞膜受体的数量和分布

一种细胞膜可以含有几种不同的受体，如脂肪细胞膜上含有肾上腺素、胰高血糖素、胰岛素等近10种激素受体。它们的数目互不相同。同一受体在不同细胞膜上的受体数目也是不同的。一般的受体的密度为103～104个/细胞，但电鳐电器官上的乙酰胆碱的受体的密度和数量较大，分别为104～105微米2或1011个/细胞。受体的数目在正常生理条件下是恒定的，但由于细胞生理状态不同（如生长速度，分化程度，细胞周期等）和外界环境变化的影响，也会发生一定的改变。
受体在膜上的分布是不均匀的，经常相互聚集形成“簇”的形式。

③ 高中生物里所有涉及到的方法 和抽样方法 和他的用法 高分求整理

样方法和标志重捕法分别是调查群落中植物和动物种群密度的常用方法。
样方法
（1）取样调查中的两个概念
①样 方： 样方也叫样本，从研究对象的总体中抽取出来的部分个体的集合，叫做样方。
②随机取样： 在抽样时如果总体中每一个个体被抽选的机会均等，且每一个个体被选与其他个体间无任何牵连，那么，这种既满足随机性，又满足独立性的抽样，就叫做随机取样(或叫做简单随机取样)。随机取样不允许掺入任何主观性，否则，就难以避免调查人员想获得调查属性的心理作用，往往使调查结果偏大。
③适用范围：植物种群密度，昆虫卵的密度 ，蚜虫、跳蝻的密度等。
（2）常用取样
①点状取样法
点状取样法中常用的为五点取样法，如图A，当调查的总体为非长条形时，可用此法取样。在总体中按梅花形取5个样方，每个样方的长和宽要求一致。这种方法适用于调查植物个体分布比较均匀的情况。
②等距取样法
当调查的总体为长条形时，可用等距取样法，如图B，先将调查总体分成若干等份，由抽样比率决定距离或间隔，然后按这一相等的距离或间隔抽取样方的方法,叫做等距取样法。例如，长条形的总体为100 m长，如果要等距抽取10样方，那么抽样的比率为1/10，抽样距离为10 m，然后可再按需要在每10 m的前1 m内进行取样，样方大小要求一致。

样方法具体步骤如下：

①确定调查对象；

②选取样方：必须选择一个该种群分布较均匀的地块，使其具良好的代表性；

③计数：计数每个样方内该种群数量；

④计算：取各样方平均数。

在调查动物的种群密度时,一般多采用标志重捕法(捉放法)。就是在一个有比较明确界限的区域内,捕捉一定数量的动物个体进行标志,然后放回,经过一个适当时期(标志个体与未标志个体重新充分混合分布)后,再进行重捕。根据重捕样本中标志者的比例,估计该区域的种群总数,可计算出某种动物的种群密度。
标志重捕法的前提是,标志个体与未标志个体在重捕时被捕的概率相等。
在标志重捕法中,标志技术极为重要,在操作中应注意以下几点。
1.标志物和标志方法必须对动物的身体不会产生对于寿命和行为的伤害。如选用着色标志时,要注意色素无害而溶剂可能有毒如果用切趾、剪翅等方法标志动物时,不能影响被标志动物正常的活动或者导致疾病、感染等。
2.标志不能过分醒目。因为过分醒目的个体,在自然界中有可能改变与捕食者之间的关系,最终有可能改变样本中标志个体的比例而导致结果失真。
3.标志符号必须能够维持一定的时间,在调查研究期间不能消失。
标志重捕法的应用比较广泛,适用于哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类、鱼类和昆虫等动物。
与植物种群密度的调查相比,动物种群密度的取样调查要困难得多,而且又费时间。如果要学习这种调查方法,而条件又不允许时,则可以试一下“模拟捉放法,其原理相同。

④ 细胞增殖检测：MTT法

MTT分析法是一种基于活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide（MTT）的细胞增殖检测方法。MTT是一种黄色化合物，可作为氢离子受体，在活细胞线粒体中，通过琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下开裂tetrazolium环，生成蓝色的formazan结晶。formazan的生成量直接与活细胞数量成正比，而死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，无法还原MTT，因此不会生成formazan。

MTT还原生成的formazan结晶可以在含有特定比例的N,N-二甲基甲酰胺和十二甲基磺酸钠（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，通过酶标仪在490 nm波长下测定光密度OD值，以反映活细胞数量。DMSO同样可用于溶解formazan结晶。

进行MTT实验时，需将细胞接种在96孔板中，每孔加含10%胎牛血清的培养液，并在特定条件下培养3-5天。培养后，每孔加入MTT溶液，继续孵育，然后去除培养上清液，用DMSO溶解formazan结晶。最后，使用酶联免疫监测仪在490 nm处测定各孔光吸收值，绘制细胞生长曲线。

实验过程中需注意选择适当的细胞接种浓度，避免血清干扰，设置空白对照，并确保MTT吸收度在0-0.7之间。IC50表示药物浓度达到50%抑制率的浓度，通过调整药物浓度并计算抑制率绘制图表，即可得出IC50值。

举例说明，各组药物浓度分别为0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001倍，通过计算得出抑制率，并代入公式计算IC50值。公式为：lgIC50 = Xm - I（P - （3 - Pm - Pn）/4），其中Xm、I、P、Pm、Pn分别表示最大剂量的对数、最大剂量与相邻剂量的对数比、阳性反应率之和、最大阳性反应率和最小阳性反应率。

在进行MTT实验时，应根据具体需求调整培养基、MTT和DMSO的量，确保细胞浓度合适。实验时应考虑细胞的生长情况，确保细胞能基本长满96孔板的80-90%。同时，点板时应确保细胞消化成单个细胞，并均匀分布，以减少实验结果的变异性。实验过程中的注意事项还包括避免培养过程中的水分蒸发，正确添加MTT和DMSO，并确保在检测MTT时选择合适的波长进行分析。

综上所述，MTT法是细胞增殖检测中的一种有效方法，通过精确控制实验条件和参数，可以获得准确的细胞活力和增殖情况数据。在实验过程中，需注意细胞培养、MTT添加、反应时间、检测波长等关键步骤，以确保实验结果的可靠性。如果遇到问题，可以考虑替换为CCK-8实验，尽管其费用稍高，但操作更为简便。

⑤ 动物实验|五种常见的小动物活体成像技术

动物活体成像技术在科学研究中扮演着重要角色，用于无损伤地观察生物过程，从组织、细胞到分子水平进行定性和定量研究。随着小动物成像技术的发展，多种专业设备为临床前研究提供了有力工具。小动物活体成像技术主要分为五大类：可见光成像、核素成像、CT、MRI和超声成像。本文将对每种技术的特点、应用及优缺点进行探讨，并展望未来发展趋势。

可见光成像技术利用生物发光或荧光技术，实现体内非侵入性成像。生物发光技术基于荧光素酶基因标记，荧光成像则采用荧光报告基因或染料进行标记。可见光成像优势在于低能量、无辐射和高检测灵敏度，广泛应用于监控生物体内细胞活动、基因行为等。然而，其二维成像限制了绝对定量的能力。未来发展趋势包括寻找更高量子效率的荧光团、改进重建算法和拓展新型光学成像技术。

核素成像技术，如PET和SPECT，利用放射性核素进行功能显像。小动物专用设备因其高分辨率特性而受到青睐。其优势包括广泛的标记范围、绝对定量能力、高灵敏度、断层及三维信息获取、动力学资料的快速获取以及应用范围的广泛性。小动物PET设备利用医用回旋加速器生成的正电子放射性核素，通过有机合成等方法制备显像剂，应用于新型显影剂的开发和动态成像研究。小动物SPECT设备使用长半衰期放射性核素，应用于生理功能监控、代谢过程示踪和受体密度定量等。未来发展方向是提高系统灵敏度和图像质量，扩展应用领域。

CT技术作为解剖学成像手段，在小动物研究中展现出独特优势，如在骨和肺部组织检查中的应用。小动物CT设备能够实现离体动物组织的无损三维检测，同时也具备对活体小动物的硬组织成像能力。尽管血管和内脏软组织成像需要借助造影剂增强对比，但CT技术在结构成像领域有着不可替代的地位。

MRI技术利用能量衰减绘制内部结构图像，具有无电离辐射、高软组织分辨率、无需对比剂显示血管结构等独特优势。小动物MRI在软组织分辨能力、微米级分辨率及低毒性方面表现出色，但敏感性较低。未来发展方向是结合多模式平台，如小动物MRI/PET，以获取更全面的信息。

超声技术基于声波传播形成图像，具有无辐射、操作简单、价格便宜等优点。在小动物研究中，超声主要用于生理结构易受外界影响的膀胱和血管成像。尽管成像深度有限，且可能受组织结构影响产生伪像，但超声技术因其优势仍在特定领域得到广泛应用。

多模态成像平台，如小动物PET/CT和PET/MR，将不同成像技术的优势结合，提供生物功能信息与解剖结构信息的综合分析。这些设备通过融合技术，提高了图像质量、减少了误差，并在研究中实现高准确性的显像。多模态成像平台是动物活体成像技术的发展趋势。

综上所述，小动物活体成像技术通过不同成像方法的综合应用，为科学研究提供了多样化的观察工具，极大地促进了生命科学领域的研究进展。随着技术的不断进步和多模态平台的融合，未来小动物活体成像技术将展现出更加广泛的应用前景和更高的研究价值。