‘壹’ 9种常见的原料药晶型检测方法
药物分子通常以盐类、多晶、共晶、无定形、水合物和溶剂合物等形式存在，不同晶型在晶体结构、稳定性、可生产性和生物利用度等方面存在显着差异，直接影响药物的疗效和可开发性。
评估并选择最佳药物晶型进行研发至关重要，以避免在临床后期发生晶型变化导致的上市延误和经济损失，甚至因晶型变化导致药物被迫撤市。药物晶型研究和药物固态研发在制药业中具有举足轻重的地位。
1、X-射线衍射法（X-ray diffraction）
该方法是研究药物晶型的主要手段，用于鉴别晶态和非晶态，确定晶体品种，区分混合物和化合物，测定药物晶型结构和晶胞参数，以及比较不同晶型。粉末衍射和单晶衍射是其两种形式，其中粉末衍射最常用。
2、红外吸收光谱法
通过药物分子中化学键的差异，红外光谱可用于研究药物多晶型。常用样品制备方法有KBr压片法、石蜡糊法、漫反射法和衰减全反射法。考虑到可能的晶型改变，石蜡油糊法和DRIFT是常用选择。
3、熔点法和显微镜法
药物晶型的不同可能导致熔点差异，热载台显微镜可用于观察晶体的相变、熔化、分解和重结晶过程。熔点差异是初步检测多晶型存在的方法之一，但需结合其他方法进行确认。
4、热分析法
包括差示扫描量热法、差热分析法和热重分析法，用于分析不同晶型在升温或冷却过程中的吸、放热差异。
5、偏光显微镜法
主要用于透明固体药物的观测，通过调整偏光镜的角度，可观察晶体在不同角度下的隐失和闪亮现象，从而决定晶体所属的晶型。
6、核磁共振法
不同晶型结构中分子原子所处化学环境的细微差异导致其在核磁共振谱图上出现不同的响应，通过比较不同晶型的谱图，可判断药物是否存在多晶现象。
7、扫描隧道显微镜法
能够直接观察晶体表面的原子排列状态和物理化学特性，用于研究晶体的晶格、原子排列、晶面缺陷等。
8、溶解度方法
不同晶型的自由能不同，导致溶解度不同。通过测定各晶型在不同温度下的溶解度，可区分不同晶型并确定其热力学转变温度。
9、计算机辅助预测
在已知固体药物结构的前提下，利用商业程序Polymorph Predictor预测不同洁净条件下的最可能生成的晶型。
10、其他方法
通过密度、折光率等物理性质的差异，以及使用磁性异向仪、膨胀计等仪器，或观察药物颜色，进行不同晶型的确定。随着技术进步，新的方法可用于药物晶型研究。
不同晶型确定方法的综合运用，可全面认识药物晶型。红外与热显微镜法，以及差示扫描量热法与热台显微镜法的联用，体现了这一思路。
‘贰’ 叶酸的药物鉴别
方法名称：叶酸原料药－叶酸－高效液相色谱法。应用范围：该方法采用高效液相色谱法测定叶酸原料药中叶酸的含量。该方法适用于叶酸原料药。 供试品经氨溶液溶解后，用水定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm处检测叶酸的峰面积，计算出其含量。试剂： 1. 甲醇2．磷酸二氢钾...3． 0.5mol/L四丁基氢氧化铵的甲醇溶液4．1mol/L磷酸溶液5. 氨试液6. 0.5%氨溶液仪器设备：1. 仪器1．1 高效液相色谱仪⒈ 2 色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。1．3 紫外吸收检测器2． 色谱条件2．1 流动相：以磷酸盐缓冲液（pH5.0)(取磷酸二氢钾 2.0g，加水约650ml溶解，加0.5mol/L四丁基氢氧化铵的甲醇溶液15ml、1mol/L磷酸溶液7ml与甲醇270ml，放冷，用1mol/L磷酸溶液或氨试液调节pH值至5.0，用水稀释至1000ml）2．2 检测波长：280nm流速：每分钟1.2ml2．3 柱温：室温试样制备：避光操作1. 对照品溶液的制备取叶酸对照品约10mg，精密称定，置50mL量瓶中，加0.5%氨溶液约30mL溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。2． 供试品溶液的制备取供试品约10mg，同上操作。注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。操作步骤：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长280nm处测定叶酸（C19H19N7O6）的峰面积，计算出其含量。参考文献：中华人民共和国药典，国家药典委员会编，中国医药科技出版社，2010版(第一增补本），p.330。
‘叁’ 烟酸原料药的鉴别试验的注意事项
1. 烟酸，亦称为维生素B3，是一种白色晶体或白色结晶性粉末，具有耐热性并能升华。它还被称为尼克酸或抗糙皮病因子。在人体内，烟酸包括其衍生物烟酰胺或尼克酰胺。烟酸是人体必需的13种维生素之一，属于水溶性维生素，并归属于维生素B族。
2. 烟酸的鉴别试验包括以下几个步骤：
- 取一定量的烟酸样品，加入2,4-二硝基氯苯并研磨成粉末。取10毫克该粉末放入试管中，使用文火加热至完全熔化，然后继续加热数秒钟后冷却。
- 向冷却后的混合物中加入3毫升氢氧化钾的乙醇试液(TS-190)。观察到应出现深红色。
- 将大约50毫克的烟酸样品溶于20毫升水中，使用0.1mol/L氢氧化钠溶液中和至石蕊试纸显示中性，然后加入3毫升硫酸铜试液(TS-78)。应逐渐形成蓝色沉淀。
- 对经过105℃干燥1小时的试样的矿物油分散体进行红外吸收光谱分析。其峰值波长应与同样处理的药典级参比标准样品相匹配。
- 配制浓度为20μg/ml的烟酸水溶液，在1厘米的池中测定其237nm和262nm波长处的吸光度，以水作为空白对照液。计算A237/A262的比值，结果应在0.35至0.39之间。