㈠ elisa有几种类型,原理是什么
1、类型
夹心法常用于检测大分子抗原,将具有专一性的抗体固着于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体,重复两次,洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果。
间接法常用于检测抗体,将已知的抗原固着于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原,重复两次。洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器测定塑胶盘中的吸光值,以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,将具有专一性的抗体固着于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体;加入待测检体、带有酶的抗原,与塑胶孔盘上的抗体专一性键结。塑胶孔盘上固着抗体数量有限,检体中抗原量越多,带有酶的抗原可键结固着抗体就越少。
2、原理
在测定时把受检标本和酶标抗原或抗体,按不同步骤与固相载体表面抗原或抗体起反应。用洗涤方法使固相载体上的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。
(1)采用专一抗体检测的方法扩展阅读:
Elisa应用
Elisa生物试验敏感性高,特异性强,重复性好。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。