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蛋白铜的检测方法

发布时间:2024-11-24 11:19:50

1. 蛋白粉含铜量

研究我国不同地区间各种饲料原料中铜含量分布情况,以及我国畜禽基础饲粮中铜水平,从而为饲粮中合理添补铜提供依据。方法 对采自全国31个省、直辖市和自治区的7大类(谷物籽实、谷物籽实加工副产品、植物性蛋白饲料、动物性蛋白饲料、牧草类、秸秆类和矿物质饲料)37种饲料原料共3 903个饲料样品,经预处理后用MARS6高通量密闭微波消解系统进行微波消解,然后用IRIS Intrepid II等离子体发射光谱仪测定其铜含量。用国家标准物质猪肝粉或黄豆粉作为参照标准,以保证测定结果的可靠性。结果 饲料原料中铜含量测定结果表明:谷物籽实(包括玉米、小麦、稻谷和大麦)平均铜含量为3.95 mg·kg -1(范围为2.50—5.34 mg·kg -1);谷物籽实加工副产品(包括玉米蛋白粉、玉米DDGS、玉米胚芽粕、次粉、小麦麸、小麦DDGS、碎米和米糠)平均铜含量为7.16 mg·kg -1(范围为1.62—12.13 mg·kg -1);植物性蛋白饲料(包括膨化大豆、大豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、亚麻粕和葵花粕)平均铜含量为16.37 mg·kg -1(范围为6.45—30.40 mg·kg -1);动物性蛋白饲料(包括鱼粉、肉粉、水解羽毛粉、肠膜蛋白粉、血浆蛋白粉和血球蛋白粉)平均铜含量为11.14 mg·kg -1(范围为1.90—20.04 mg·kg -1);牧草类(包括羊草、黑麦草、苜蓿和青贮玉米)平均铜含量为7.85 mg·kg -1(范围为4.31—9.92 mg·kg -1);秸秆类(包括玉米秸秆、小麦秸秆、稻秸和甘薯藤)平均铜含量为7.50 mg·kg -1(范围为3.38—13.89 mg·kg -1);矿物质饲料(包括石粉、磷酸氢钙、骨粉和贝壳粉)平均铜含量为6.79 mg·kg -1(范围为3.39—11.45 mg·kg -1)。这37种饲料原料的平均铜含量范围为1.62—30.40 mg·kg -1,而各类饲料原料铜含量分布规律是:植物性蛋白饲料(16.37 mg·kg -1)>动物性蛋白饲料(11.14 mg·kg -1)>牧草类饲料(7.85 mg·kg -1)>秸秆类饲料(7.50 mg·kg -1)>谷物籽实加工副产品(7.16 mg·kg -1)>矿物质饲料(6.79 mg·kg -1)>谷物籽实(3.95 mg·kg -1)。以省(区)为单位比较,发现不同地区间的玉米、小麦和大豆粕的铜含量差异显着(P<0.05)。四川省玉米和大豆粕铜含量最高(分别为2.97和15.74 mg·kg -1),内蒙古自治区最低(分别为1.66和11.72 mg·kg -1);甘肃省小麦铜含量最高(5.61 mg·kg -1),河北省最低(4.02 mg·kg -1)。根据全国各地猪、鸡常用的152个饲料配方计算出基础饲粮中可提供的铜含量为5.07—6.54 mg·kg -1,如根据我国及美国NRC猪、鸡饲养标准中铜营养需要量的要求,基础饲粮中的铜含量基本可提供猪的铜营养需要,可提供鸡大部分铜的营养需要,但上述估算尚未考虑不同饲料原料中铜的利用率。结论 我国不同种类和不同地区饲料原料中铜含量差异较大,全国猪、鸡常用基础饲粮配方中铜含量可提供猪、鸡大部分的铜营养需要量。因此,建议在配制饲粮时,应充分考虑不同地区基础饲粮中的铜含量及其利用率,精准配制饲粮,以满足畜禽高效生产需要,同时减少铜的添加和排放对环境的污染。

2. 蛋白质用什么检验

蛋白质的检测通常使用双缩脲试剂,这是一种专门用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。双缩脲试剂是一种碱性的含铜试液,通常呈现蓝色,其主要成分包括0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜以及酒石酸钾钠。当蛋白质样本与双缩脲试剂反应时,会呈现紫色,这是因为蛋白质分子中含有大量的与双缩脲结构相似的肽键,导致与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。

双缩脲试剂最初是用来检测双缩脲的,但因其具有与蛋白质类似的反应特性,便被广泛用于蛋白质检测。在检测过程中,当底物中存在肽键(如多肽)时,试液中的铜离子与多肽配位,形成络合物,该络合物呈紫色。通过比色法分析,可以在紫外可见光谱中的波长为540nm处检测到颜色变化,从而确定蛋白质浓度。双缩脲试剂的灵敏度范围为5-160mg/ml,能够准确地测定蛋白质含量。

值得注意的是,双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅是为了提供碱性环境,因此可以被其他碱如氢氧化钠所替代。在试剂中加入碘化钾能够延长其使用寿命,而酒石酸钾钠的作用是防止反应生成的络离子析出形成沉淀,进而避免试剂失效。

3. 实验室bca是什么意思

实验室BCA是一种常见的生化分析方法,它主要用于检测体液中的蛋白质含量。BCA全称为Bicinchoninic Acid,中文意思是“双吡啶甲酸”,该方法的原理是利用铜离子与蛋白质中的蛋白质酰基反应生成紫色络合物,然后通过比色法检测其吸光度来确定蛋白质含量。BCA的精度和灵敏度较高,而且操作简便,因此被广泛地应用于生物医学研究及临床诊断领域。


应用实验室BCA方法测定蛋白质含量的步骤如下:将待测样品加入含有BCA试剂的培养基中,然后在37℃下反应一段时间。加入比色剂,再次在37℃下反应。将反应后的试管放入分光光度计中测定吸光度。4.根据标准曲线来计算蛋白质的含量。需要注意的是,在操作实验室BCA过程中,对于样品的处理、预处理等步骤也十分关键,这些步骤的质量将影响到实验的准确性和精度。


实验室BCA方法虽然有着精度高、灵敏度强等优点,但在有些情况下也存在着一定的局限性和缺陷。比如,由于BCA是一种颜色敏感法,可能会受到其他化学分子的干扰,从而导致结果的偏差。因此,在使用实验室BCA方法时,我们必须要对样品进行处理和分析,同时保证操作的准确性和安全性,以获得可靠的结果。另外,在实践中,需要根据具体的研究需求和条件选择合适的实验室BCA方法,并结合其他方法互相印证,从而更好地进行科学研究。

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