核酸最终检测方法

❶ 肛拭子和鼻拭子、咽拭子有什么区别

肛拭子和鼻拭子、咽拭子这三种方式都是检查病毒体的方法，只要的区别就是检查的部门不一样，当然对应的检查效果也会有一定的差别。同样，这三种方法都曾经用于新冠病毒的核酸筛查当中。武汉大学统一对全栋学生都进行了统一肛拭子检测，主要是原因就是霍乱这种病毒危害极大，一定要对于进行更准确的检查方式来确定，才能避免其在人群中的传播。同时由于相比来说发生的霍乱的病例只在一栋楼之中，人数不是很多。而且都有比较固定的场所，这同样也有利于肛拭子这种检验方式的实行。

三、取样便捷程度不同。

即然肛拭子检查是最好的方法，为什么没有在新冠病毒检查中大理采用呢，这其中最重要的原因是这种方法是三种方式中采样最困难的。

在进行咽拭子和鼻拭子检测的时候，大多数情况下，在户外就可采取受试者的分泌物进行检测，无需任务的遮拦。差别是咽拭子这种方式更容易被大家都接受，而且取样也比鼻拭子更快，更安全。鼻拭子的操作一定要有专业的人员进行，否则会给被检查着的鼻粘膜造成伤害。或者由于采样不深而无法达到应有的效果。

而进行肛拭子检测时，考虑到隐私问题，需要在密闭的空间内对受试者进行检测，这就需要在核酸检查点周围建很多密闭的小房子，这无疑需要占用很大的空间和兴建人才，并且消耗大量的财力。

国家在综合考虑这以上三种方式的优劣的基础上，最终选择了用咽拭子做了我国新冠核酸检测的常规方式。

❷ 检测核酸纯度方法

紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的： 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理，掌握测定方法。

原理： 核酸的最大吸收波长为260nm，蛋白质为280nm，在波长260nm时，1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml，单链

寡核苷酸的含量为30μg/ml，可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值

（OD260/OD280），估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除

尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度

大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。

试剂与仪器： 提取的质粒DNA，紫外分光光度仪。

操作步骤：
1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。
2) 取质粒DNA样品2μl，用水稀释100倍，转入分光光度计的石英比色杯中。
3) 在260nm和280nm分别读出样品光密度值。如果样品浓度单位为μg/μl，则样品DNA浓度为OD 值的10倍，即如

OD<SUB>260</SUB>=0.1，则样品浓度即为1μg/μl。
4) 若OD<SUB>260</SUB>/OD<SUB>280</SUB>大于1.8，说明仍有RNA，可以考虑用RNA酶处理样品，若小于1.8，说

明样品中含有蛋白质或酚，应再用酚/氯仿抽提，以乙醇沉淀纯化DNA。