⑴ 尿蛋白尿白蛋白检测及临床应用
尿蛋白尿白蛋白检测在早期肾损害诊断中扮演着重要角色,尤其对于常规方法难以检测到的白蛋白尿。常见的检测方法包括放射免疫法、ELASA法等,其中免疫透射比浊法应用广泛,但报告方式各异,有的以每升尿中白蛋白含量表示,有的则以24小时排泄量或白蛋白/肌酐比值呈现。我们对正常人尿白蛋白的正常值进行了统计,并针对高血压、糖尿病患者进行了测定。具体步骤包括使用尿白蛋白和肌酐测定试剂盒,通过凯创公司的产品和瑞士产Cobas MIRA plus全自动生化分析仪进行检测。
研究对象包括健康对照组(70例,无肾病史),糖尿病组(42例)和高血压组(62例),分别测定尿蛋白和肌酐,报告结果以白蛋白/肌酐比值的形式。结果显示,尿蛋白的正常值因计算方法不同而有所差异,如以mg/L计,范围为2.2~41.7 mg/L,均值12.7 mg/L。不同计算方法下的正常范围差异显着,尤其是每升尿白蛋白的报告,受尿量影响大,可能导致正常值范围较宽,可能延误部分异常标本的诊断。
在高血压组中,即使尿蛋白定性阴性,通过眼底改变和心电图改变也可以诊断为Ⅱ期高血压。测量结果显示,随着高血压病期、病程和舒张压的增加,尿白蛋白水平也相应升高。而在糖尿病组,根据病程的长短,尿白蛋白水平明显增加,且治疗情况与结果有显着关联。尿微量白蛋白的测定尽管以24小时标本最理想,但随机尿测定因其简便易行,常被用于临床实践,但需同时测定肌酐以消除尿量变化的影响。
总的来说,尿蛋白尿白蛋白检测是早期肾损害诊断的关键工具,通过不同计算方法和标本类型,可以更准确地评估患者肾功能,对于疾病的早期识别和管理具有重要意义。然而,实际操作中需考虑标本收集的便捷性与准确性之间的平衡。
血液中常会有定量的对人类生命活动不可或缺的蛋白存在。一部分的蛋白会在肾脏的丝球体中过滤进入尿液中,但又会在肾小管被吸收而回到血液中。 因此,若肾脏的机能正常,在尿液中出现的蛋白量只有一点点,但是当肾脏与尿管出现障碍时就会漏出多量的蛋白变成蛋白尿。正常人尿中有微量蛋白,正常范围内定性为阴性,记为(-)。尿中蛋白质含量多达0.15g/24h以上时,称蛋白尿,尿常规定性可出现阳性。
⑵ 24小时微量白蛋白正常值
检测患者出现蛋白尿的几种方式具体如下:
1、24小时尿蛋白定量检测:24小时尿白蛋白的正常值不超过150mg/天;
2、尿蛋白:通过尿常规观察尿里的蛋白质含量。通常蛋白质以(+)、(++)、(+++)表示,或以定量的方式,如0.3g/L、0.5g/L、0.7g/L、1g/L、1.5g/L,或2g/L、3g/L、6g/L等来进行表示;
3、尿微量白蛋白:尿微量白蛋白通常是看某一点的尿微量白蛋白,亦可做24小时的尿微量白蛋白。24小时的尿微量百分百通常不要超过30mg/天。
尿常规蛋白定性为蛋白质阳性,尿微量白蛋白为30-300mg/L,或24小时尿蛋白定量超过150mg/天,均称为蛋白尿。当患者出现蛋白尿时,应进一步寻找引起蛋白尿的原因。
⑶ 如何分辨人血白蛋白
一般检测方法:人血白蛋白为健康人血浆提纯的蛋白制剂,根据蛋白质在酸性条件下加入沉淀剂-10%钨酸钠溶液,使蛋白质沉淀的原理,快速鉴别方法只需样品1ml与10%钨酸钠溶液5ml和0.33mol/L硫酸溶液5ml置于试管中,观察试管中的絮状物(沉淀)即可,假冒的白蛋白一般无絮状物产生,说明其中根本没有蛋白质。按药典收载的免疫扩散试验,假冒产品均不与抗人的血清产生沉淀线,其鉴别结果不呈正结果。两者具有完全的一致性。
PS:送药监局,这个基本没有可行性。不信你就给当地的打个电话试试。不是法院送的,药监局或者其他有资质的医疗鉴定机构,都不会给个人做人血白蛋白鉴定检测的。
⑷ 确定血清白蛋白纯度和生物活性鉴定方法 并且确定所用试剂仪器,急求,谢谢
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量
一、 标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所 测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。
二、 蛋白质含量测定方法 1、 凯氏定氮法 2、 双缩脲法 3、 Folin-酚试剂法 4、 紫外吸收法 5、 考马斯亮蓝法 三、 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 (一)、试剂: 1、 考马斯亮蓝试剂: 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍 蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—2 50,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。 2、 标准蛋白质溶液: 纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15 mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 (二)、器材: 1、722S型分光光度计使用及原理()。 2、移液管使用()。 (三)、标准曲线制作: 试管编号 0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml标准蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂 (ml) 5 5 5 5 5 5 5 摇匀,1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色 A595nm
2、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。 1)、利用标准曲线查出回归方程。 2)、用公式计算回归方程。 3)、或用origin作图 ,测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6 一般相关系数应过0.999以上,至少2个9以上。 4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。 (四)、蛋白质含量的测定: 样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作, 测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。 一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太 大,可以稀释后再测A595nm值,然后再计算。 (五)、注意事项: 1、 玻璃仪器要洗涤干净。 2、 取量要准确。 3、 玻璃仪器要干燥,避免温度变化。 4、 对照:用被测物质以外的物质作空白对照。