⑴ 内毒素实验一定要做鲎试剂复核实验和干扰实验吗
您好，中国药典二部附录中的细菌内毒素检查法中对这些有明确规定到，当使用新批次的鲎试剂时需要对其灵敏度进行复核，偏差范围在50-200%，以厂家标识的灵敏度为准。复核后可以使用了，以后使用同批次鲎试剂就不要进行复核了。
当检测的样品是新样品或样品的生产工艺，原料等有改变的话，检测该样品前需要先进行干扰实验，在确定样品没有干扰或经过一定的处理后对鲎试剂检测内毒素的实验没有干扰了，才可以进行样品的常规检测，这样检测出来的结果才是准确。之后检测同一样品就不要在做干扰试验。
⑵ 内毒素测定内毒素测定方法
内毒素测定方法主要包括凝胶法和多种定量检测方法。
首先，凝胶法是基于鲎试剂与内毒素之间的凝集反应。通常，鲎试剂的规格为0.1ml/支或0.5ml/支，使用时需用除热原水溶解。操作时，通过观察是否有凝胶形成来判断反应终点。这种方法简便易行，经济实惠，无需专用设备，适用于定性或半定量检测。
其次，动态浊度法和终点浊度法是通过测量内毒素对光或光线的散射程度，随时间变化的浊度变化来定量检测内毒素。这种方法提供了连续的测量过程，精度较高。
动态显色法与终点显色法则利用内毒素与特定试剂反应后产生的颜色变化，通过对比标准曲线来确定内毒素的含量，是一种更为精确的定量检测手段。
总的来说，以上这些方法各有特点，凝胶法适合初步筛查，而动态浊度法和显色法则适用于需要精确定量的数据分析。
细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（LipopolySaccharide,LPS）和蛋白的复合物，当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。内毒素大量进入血液就会引起发热反应—“热原反应”。内毒素与多种感染疾病密切相关，病情恶化往往伴随着内毒素含量的增加，病情缓解也常伴随着内毒素含量的减少。因此，快速检测（1小时）血液、脏器内毒素含量可以为临床相关疾病的诊断预后提供参考。
⑶ 中国药典和美国药典中的细菌内毒素检测法的不同点是什么
1、细菌内毒素工作标准品（CSE）
CP： 对CSE的用途及效价进行定义“细菌内毒素工作标准品中每1ng细菌内毒素的效价应不小于2EU，不大于50EU”
USP：未提到CSE
2、细菌内毒素检查用水
CP ： 与灵敏度为0.03EU/ml或更高灵敏度的鲎试剂在37±1℃条件下24小时不产生凝集反应的灭菌注射用水；
USP：与鲎试剂在限定的灵敏度下不发生反应的灭菌注射用水或其它水。
3、实验用具的准备
CP：实验所用器皿需经处理，除去可能存在的外源性内毒素，常用的方法是250℃下干烤至少1小时，也可用其它确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。
USP：使用经验证的除热原程序对所有玻璃器皿和遇热稳定的材料在热空气烘箱中进行除热原，常用的最低温度和最少的时间是250℃下30分钟。
4、内毒素标准品贮备液和标准品溶液的制备
CP： 未提到
USP：RSE的效价定为10,000USP EU/支，用5ml鲎试剂检查用水复溶1支RSE的全部内容物，用漩涡混合器间歇混合30分钟，并用此原液作系列稀释，将原液置于冰柜中保存不超过14天，作以后的稀释之用，在使用前用漩涡混合器强力混合不少于3分钟，在作下一步稀释前需对前面的稀释液混合不少于30秒，不要贮存稀释液，因为没有数据能证明其不会因为吸附作用而失去活性。
5、供试品溶液的制备
CP：|某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提 用LRW复溶或稀释药品或抽提医疗器械，某些物质可能更适于用其它水性溶液来溶解、稀释或抽提。
对于过酸、过碱或本身有缓冲能力的供试品需调节被测溶液（或其稀释液）的pH值，一般要求供试品溶液的pH值在6.0-8.0的范围内。
USP：用LRW复溶或稀释药品或抽提医疗器械，某些物质可能更适于用其它水性溶液来溶解、稀释或抽提。
6、内毒素限值的建立
CP：药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定：L=K/M
L 为供试品的细菌内毒素限值，一般以 EU /ml、EU / mg 或 EU / U （活性 单位）表示； K 为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以 EU / ( kg · h ）表示，注 射剂 K = 5EU/(kg•h )
放射性药品注射剂 K=2.5EU / （kg· h ) ， 鞘内用注射剂 K = 0.2EU / （kg· h ) ； M 为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以 ml / ( kg · h ）、mg / ( kg · h ） 或 U / ( kg · h ）表示，人均体重按 60kg 计算，人体表面积按 1.62m2 计算。
注射时间若不足 1 小时，按 1 小时计算。供试品每平方米体表面积剂量乘以 0.027 即可转换为 每千克体重剂量（M）。
USP：非经肠道药品的内毒素限值，以剂量定义，等于K/M
除了鞘内给药以外的任何给药途径，K均为5 USP-EU/kg，鞘内给药时，K为0.2 USP-EU/kg，对于非鞘内给药放射性药品，内毒素限值的计算为175/V，V为以mL为单位的最大推荐剂量
对于鞘内给药的放射性药品，其内毒素限值为14/V，对于按以每平方体表面积计算的给药剂量（通常是抗肿瘤药品），计算公式为K/M，其中K=5EU/kg，M为（最大剂量/m2/小时×1.80m2)/70kg。
7、灵敏度复核实验
CP：当最大浓度2.0λ管为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管为阴性时，实验方为有效，按下式计算反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测定值（λc）：λc=lg-1(ΣX/4)
USP：|浓度最低的标准品溶液的所有重复管均为阴性，实验方为有效。
用下式计算终点浓度的对数值的平均值，然后再计算该平均值的反对数：终点浓度的几何平均值= antilog(Σe/f)
Σe是稀释系列的终点浓度的对数值之和，f为重复管数，反应终点浓度的几何平均值即为鲎试剂灵敏度的测定值。
8、凝胶法限量实验：
CP：溶液制备以添加了内毒素的溶液为“供试品溶液’。---USP：为“经稀释的供试品溶液。
CP：使用稀释倍数为MVD并且已经排除干扰的供试品液来制备溶液A和B。----USP；使用稀释倍数不超过MVD的稀释液来制备溶液A和B
CP：在复试中，溶液A需做4支平行管，当所有平行管都为阴性时，供试品溶液符合规定
------------USP：在复试中，如果溶液A的两支平行管均为阴性，供试品溶液符合规定
USP：如果供试品溶液以不超过MVD的某个稀释倍数稀释，检测结果为阳性时，可进一步稀释供试品溶液但不能超过MVD，再重新进行试验。------CP；无规定。