检测蛋白质脂肪的方法

㈠ 如何检测生物组织中的糖类，脂肪，和蛋白质

一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应.
1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀.即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）.
3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应.（蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应.）
4.淀粉遇碘变蓝色.
三．实验材料
1．做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨.（因为组织的颜色较浅,易于观察.）
2．做脂肪的鉴定实验.应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3-4小时（也可用蓖麻种子）.
3．做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清.
四、实验试剂
斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水.
五、方法步骤：
（一） 可溶性糖的鉴定
1.制备组织样液.
苹果或梨组织液必须临时制备，因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖.
2.注入2mL组织样液.
3.注入1mL新制的斐林试剂,振荡.
（现配现用、先混后加）
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、
乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测.
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加热：试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀）
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者.
也可用酒精灯对试管直接加热.
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤；
缩短实验时间.
（二）脂肪的鉴定
取材、切片、制片：花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水.

干种子要浸泡3-4小时,新花生的浸泡时间可缩短.
浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形.切片要尽可能薄些,便于观察.
染色：在子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ（染色3分钟）或苏丹Ⅳ染液（染色1分钟）.
染色时间不宜过长.
漂洗：用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察.同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴.
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片.
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡.
镜检：先低后高（高倍镜用法：移物换器时针反）,低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒.
装片不宜久放.
时间一长,油滴会溶解在乙醇中.
三、蛋白质的鉴定
制备组织样液.（浸泡、去皮研磨、过滤.）黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间.加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀；再加入双缩脲试剂B液3-4滴,摇匀,溶液变紫色.
A液和B液也要分开配制,储存.鉴定时先加A液后加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提
供一个碱性的环境.A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效.
否则CuSO4蓝色会遮盖反应的真实颜色.可用蛋清代替豆浆.蛋清要先稀释.
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净.
附：淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化.碘液不要滴太多，以免影响颜色观察

㈡ 高一生物学习“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”总结三个实验所用的试剂及用量和实验现象、原理

Ⅰ、斐林试剂(检验还原糖)

①配制方法：

步骤：1、将36.4gCuSO4.5H2O溶于200mL水中；

2、用0.5mL浓硫酸酸化，再用水稀释到500mL待用；

3、取173g酒石酸钾钠KNaC4H4O6.4H2O，71gNaOH固体溶于400mL水中；

4、再稀释到500mL，使用时取等体积两溶液混合。

②试剂应用：

检验还原糖

步骤：1、向试管内注入2mL待测组织样液。

2、向试管内注入1mL斐林试剂（甲乙液混合均匀后再注入）。

3、将试管放入盛有50~60℃温水的大烧杯中加热约2min。

4、观察试管中出现的颜色变化。（若能够生成砖红色的沉淀，便可以判

断还原糖的存在，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀）

Ⅱ、班氏试剂(检验还原糖)

①配制方法：

步骤：1、400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠；

2、50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜制成CuSO4溶液；

3、把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠溶液-Na2CO3中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。

②试剂应用：

检验还原糖

原理：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH-，与柠檬酸钠-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，生成Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。

Ⅲ、双缩脲试剂(检验蛋白质)

①配制方法：双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的水溶液；双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01g/mL的水溶液组合而成。

②试剂应用：

检验蛋白质

步骤：1、将双缩脲试剂A加入组织样液，振荡均匀（必须营造碱性环境）。

2、加入双缩脲试剂B，摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。

原理：具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

Ⅳ、苏丹溶液(检验脂肪)

①配制方法：

步骤：1、苏丹III或苏丹IV粉0.1g;

2、取95%酒精10ml;

3、过滤后再加入10ml甘油

②试剂应用：

检测脂肪

原理：苏丹Ⅲ可将脂肪染成橘黄色，苏丹Ⅳ将脂肪染成红色。

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㈢ 求高一生物 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 的实验报告

实验目的：检测生物组织中的糖类，脂肪，蛋白质的存在。
实验原理：糖类，脂肪，蛋白质遇特定溶液变色。
实验步骤：准备足够分量的生物组织样液。
实验1（糖类)
（1）向试管内注入2ML待测组织样液。
（2）向试管内注入1ML斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后再注入）
（3）将试管放在盛有50-65度温水的大烧杯中加热约2MIN。待一段时间后观察其现象
实验2（脂肪）
（1）向试管内注入2ML待测组织样液。
（2）向试管内滴加3滴苏丹Ⅳ溶液。
（3）待一段时间后观察其现象。
实验3（蛋白质）
（1）向试管内注入2ML待测组织样液。
（2）向试管内注入双缩脲试剂A液1ml。摇匀。
（3）向试管内注入双缩脲试剂B液4滴。摇匀。
（4）待一段时间后观察其现象。
实验现象：
实验1.试管中溶液形成砖红色沉淀
实验2.试管中溶液被染成红色。
实验3.试管中荣产生紫色反应。
结论:
实验1 待测溶液中含有糖类。
实验2 待测溶液中含有脂肪。
实验3 待测溶液中含有蛋白质。

以上就是整个实验的报告，自己写的，希望给个辛苦分啊.......