抗原检测的方法

㈠ 乙肝表面抗原的测定方法

中国最常使用的测定表面抗原的方法是酶联免疫吸附试验（ELISA），其次是放射免疫试验（RIA）。
ELISA简单、方便、快速，进口试剂盒可测到的血清表面抗原最低浓度为0.2ng/ml，国产试剂盒目前能达到0.5ng/ml。

㈡ 检测乙肝表面抗原的方法都有什么具体一点点

国内最常使用的测定表面抗原的方法是酶联免疫吸附试验（ELISA），其次是放射免疫试验（RIA）。 ELISA简单、方便、快速，进口试剂盒可测到的血清表面抗原最低浓度为0.2ng/ml，国产试剂盒目前能达到0.5ng/ml。 乙肝表面抗原检查用于判断是否感染了乙肝病毒。 1.乙肝表面抗原阳性是感染乙肝病毒的指标，乙肝表面抗原本身具有抗原性，无传染性。 2.其他肝功能正常而仅仅乙肝表面抗原阳性者，称为乙肝病毒携带者。 3.乙肝表面抗原的滴度高低可判断患者的传染性，HBsAg的滴度越高，HBsAg及乙肝病毒DNA阳性的可能性越大，传染性也就越大。 4.大三阳：是指在乙肝两对半检测中，乙肝表面抗原（HBsAg）、E抗原（HBeAg）和核心抗体（HBcAb）检测均是阳性，提示乙肝病毒感染病毒复制活跃，有传染性，并不能提示病情是否严重。 5.小三阳：是指在乙肝两对半检测中，乙肝表面抗原（HBsAg）、E抗体（HBeAb）和核心抗体（HBcAb）检测均是阳性提示： （1）大多数情况下表示乙肝病毒复制减少，仍然有传染性。 （2）由大三阳转向小三阳并不意味着乙肝病毒复制完全停止。少数小三阳病人其血清HBV-DNA持续阳性，病毒复制活跃，病情较严重，病情进展迅速。

㈢ 为什么双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法

双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。那么，为什么双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法?
1、将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2、加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。 洗涤除去其他未结合物质。
3、加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合 的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4、 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。

㈣ 免疫学的检测方法

免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫。

㈤ 乙肝抗原抗体检测实验的主要步骤

① 取出包被好的板，加入待测血清，再加入酶标记抗体，置湿合37℃30-45min
② 取出以洗涤剂洗涤3次，每次3-5min
③ 加入显色液，置于37℃保温箱15-30min

㈥ 免疫检测最为灵敏的方法是

以下是几种常用的免疫学技术：1．免疫荧光技术 免疫荧光技术是利用荧光素标记的抗体（或抗原）检测组织、 细胞或血清 中的相应抗原（或抗体）的方法.由于荧光抗体具有安全、 灵敏的特点,因此已 广泛应用在免疫荧光检测和流式细胞计数领域.根据荧光素标记的方式不同,可 分为直标荧光抗体和间标荧光抗体.间标荧光抗体中一抗并不直接连接荧光素,而是先将一抗结合到蛋白,然后带有荧光素的二抗再结合至一抗.通过二抗的结 合,能将信号进行放大,因此能在一定程度上提高检测的灵敏度,但是随之带来 的高背景也降低了检测的特异性.近年来,随着荧光素和荧光检测技术的不断进 步,荧光检测的灵敏度已经接近同位素检测的水平,直接标记的荧光抗体逐渐取 代间接标记抗体.这些标记了荧光素的抗体直接结合至抗原,大大提高了检测的 特异性,使检测的结果更加准确可靠.荧光检测技术的发展,使得免疫荧光技术 在传染病诊断上有广泛的用途,如在细菌、病毒、 螺旋体感染的疾病,检查IgM 抗体,做为近期接触抗原的标志.利用单克隆荧光直接标记抗体鉴定淋巴细胞的 亚类.通过流式细胞仪,针对细胞表面不同抗原,可以同时使用多种不同的荧光 抗体,对同一细胞进行多标记染色.2．放射免疫检测 放射免疫检测技术是目前灵敏度最高的检测技术,利用放射性同素标记抗 原（或抗体）,与相应抗体（或抗原）结合后,通过测定抗原抗体结合物的放射 性检测结果.放射性同位素具有pg 级的灵敏度,且利用反复曝光的方法可对痕 量物质进行定量检测.但放射性同位素对人体的损伤也限制了该方法的使用.3．酶联免疫吸附试验（ELISA） 酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法.该方法是将二抗标记上 酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来,根据酶作用底物后的 显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng 水平.常见用于标记的酶有辣 根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶（AP）等.由于酶联免疫法无需特殊的仪器,检测简单,因此被广泛应用于疾病检测.常用的方法有间接法、 夹心法以及BAS －ELISA.间接法是先将待测的蛋白抱被在孔板内,然后依次加入一抗、标记了 酶的二抗和底物显色,通过仪器（例如酶标仪）定量检测抗原.这种方法操作简 单但由于高背景而特异性较差.目前已逐渐被夹心法取代.夹心法利用二种一抗 对目标抗原进行捕获和固定,在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性.近 年来,抗原的定量检测技术也不断推陈出新.近年来,在夹心法ELISA 的基础上,开发了多抗原检测试剂盒,能同时检测微量液相样本中多个抗原含量.这项技术 的应用大大缩短了诊断的时间,提高诊断的可靠性和及时性.4．免疫金胶体技术 胶体金技术经过30 多年的发展到现在已日趋成熟,该方法是将二抗标记上 胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应,最终将胶体金标记的二抗吸附于渗 滤膜上,此方法简单,快速,广泛应用于临床筛查.

㈦ 酶联免疫检测的几种方法及其原理

（1）酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）：是将抗原或抗体吸附在固相载体表面。使抗原抗体反应在固相载体表面进行。可用间接法、双抗体夹心法或竞争法测定抗原或抗体。
（2）夹心法（sandwich assay）:将已知的特异抗体包装在固相载体（塑料板凹孔或纸片上），加入待检标本，标本中的抗原即可与载体上的抗原结合，洗去未结合的材料后加入该抗原的酶标记抗体，洗去未结合的酶标抗体，加底物显色，用酶免疫检测仪测量颜色的光密度，可定量测定抗原。
间接法（indirecr ELISA）常用于检查特异抗体。先将已知特异抗原包被固相载体，加入待检标本（可能含有相应抗体），再加入酶标抗Ig的抗全（即第二抗体），经加底物显色后，根据颜色的光密度计算出标本中抗体的含量。
（3）BAS-ELISA：近年来对酶免设分析法的改进是使用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂，组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度。可用来检测多种抗原抗体系统如细菌、病毒、肿瘤细胞表面抗原等。一个亲合素（avidin）分子可以结合4个生物素分子（biotin）。结合非常稳定。亲合素和生物素都可与抗全、酶、荧光素等分子结合，而不影响后者的生物活性。一个抗体分子可偶联90个生物素分子，通过生物素又可连接多个亲合素。因此大提高检测的敏感度。目前应用生物-酶标亲合素系统（biotinavidin system- ELISA,BAS-ELISA），它是通过生物素标记抗体连接免疫反应系统，同时借助生物素化酶或酶标亲合素引入酶与底物反应系统。

㈧ ELISA技术中，最常用来检测抗原的方法是

正确答案:A
解析：ELISA技术中，最常用来检测抗原的方法是双抗体夹心法
。

㈨ 抗原或抗体的体外检测方法有哪些

抗原抗体检测有凝集反映、沉淀反应、放免技术、荧光技术、酶联免疫，化学发光、生物亲和，固相免疫、免疫组化等技术