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关于核酸检测哪种是不正确的方法

发布时间:2024-09-10 23:47:15

① 核酸检测能选择用哪种方式么

目前主要使用的方法有以下六种方法:
一、核酸序列依赖性扩增法
NASBA是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异性核苷酸序列等温扩增RNA的新技术。反应在 42 ℃进行 ,可在 2 h内将RNA模板扩增约 109倍。NASBA原理是提取病毒RNA,加入AMV逆转录酶、RNA酶H、T7RNA聚合酶和引物进行扩增。整个反应分非循环相和循环相:在非循环相中,引物I与模板RNA退火后在AMV逆转录酶的作用下合成cDNA,形成RNA:DNA杂合体,随即RNaseH降解RNA,引物Ⅱ与cDNA 退火, 在反转录酶作用下合成第2条DNA互补链。双链DNA可在T7RNA聚合酶的作用下,经其启动子序列起动而转录RNA,RNA又可在反转录酶的作用下反转录成DNA,进入循环相,对模板进行大量扩增。
二、转录介导的扩增技术
TMA技术原理与NASBA基本一致,略有不同之处是TMA利用的是MMLV逆转录酶及T7 RNA聚合酶两种酶,MMLV逆转录酶既有逆转录酶的活性又具有RNA酶H活性。反应在 41.5 ℃进行 ,可在 1 h内将RNA模板扩增约109倍。
三、连接酶酶促链式反应(LCR)
LCR是基于靶分子依赖的寡核苷酸探针相互连接的一种探针扩增技术,是继PCR后新发展的一种较有前景的体外扩增技术。它的原理就是由2段寡核苷酸单链DNA探针与目标序列杂交,当该2段DNA探针与没有发生突变的模板褪火后,如果2探针是紧邻的,中间没有核苷酸间隔,则可在连接酶作用下连接起 来,连接以后的新链又可以作为模板,引导下一周期的连接产生新的子链。若连接区段发生核苷酸的碱基突变,则连接反应不能发生,扩增反应终止。
四、多聚酶链反应检测法(PCR)
PCR技 术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性—退火—延伸三个基本反应步骤构成。
① 模板DNA的变性:模板DNA经加热至93 ℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。
② 模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55 ℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
③ 引物的延伸:DNA模板—引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成1条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链,重复循环变性—退火—延伸三过程,就可获得更多的 “半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成1个循环需2~4 min, 2~3 h就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。检测HIVRNA,需要先利用逆转录反应将RNA转录为cDNA,继而以cDNA为模板进行PCR扩增即可,这样的反应称为RT-PCR。
五、实时荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
本技术的原理是使用荧光基团标记探针,5′端标记荧光基团R,3′端标记淬灭基团Q,在没有PCR扩增时,由于荧光基团和淬灭基团空间距离很近,使荧光基团被淬灭,不发荧光;而当PCR扩增时,引物与荧光标记的特异性探针同时结合在模板上,荧光标记的探针与模板的结合位置位于上下游引物之间, 利用Taq酶的5′3′外切酶活性,将荧光探针水解,荧光基团被释放出来,由于在空间上与淬灭基团分开,则发出荧光。发出的荧光可以被荧光探头检测到, 一边扩增,一边检测,这样就实现了“实时”检测。该技术不仅实现了PCR从半定量到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性强、自动化程度高、有效解决了PCR污染问题等特点。
六、支链DNA检测法——bDNA
bDNA是定量检测血浆中的HIV1型RNA的一种方法。bDNA是指人工合成的带有侧链的DNA片段,在其每个侧链上都可以标记被激发的标记物。将HIV的RNA通过离心从病毒颗粒中释放出来,然后用捕获探针1将其捕获到微孔中。捕获探针2与病毒RNA的另一部分特异结合,又与预放大探针结合。后者再与放大探针即bDNA探针杂交。两套靶探针分别与病毒RNA的pol基因的不同区域特异结合。在微孔中形成HIVRNA寡核苷酸复合物。再加入1种化学发光底物孵育后可放大化学发光信号。通过发光强度来定量,因为发光强度与样品中HIVRNA含量成比例。bDNA不存在扩增物的交叉污染,这 较PCR是一大进步。bDNA有数十个覆盖整个基因组的探针,可以方便地检测HIV某些变异株,但灵敏度不及PCR,提高bDNA灵敏度是一大难点

② 核酸检测的方式都有什么

核酸检测主要有酸检测试剂、抗体检测两种方法,第一种方法通常是通过咽拭子进行PCR检测,基因扩增,然后再进行核酸检测。 而抗体检测是选择抽血,抽血的方法得出结果看,观察其抗体滴度是否升高,这种情况常常是指在抽血前常出现不能产生抗体的情况。

核酸检测是一种“进行时”检测,通过聚合酶链反应等方法检测病毒基因组中特定的核酸序列,从而判断被检测者此刻是否感染了病毒。

与核酸检测不同,新冠病毒抗体检测显示的是哪些人曾经被感染。抗体检测又被称为血清学检测,目的是检测血液样本中的抗体。人体感染病毒后,会产生IgM或IgG抗体。

被感染初期,人体会迅速产生IgM抗体,以抗感染;相比之下,产生IgG抗体的速度更慢,但IgG抗体保留时间更长。抗体检测就是检测血清中是否有这些特异性抗体,以确定被测试者是否曾被感染。

(2)关于核酸检测哪种是不正确的方法扩展阅读:

六种人不宜做核酸检测

一、釆样前30分钟,对于有吸烟、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸检测,以免影响检测的准确度。

二、进食太饱的人不宜做核酸检测,否则容易发生恶心呕吐,影响采用结果的准确性。

三、核酸检测前有口服抗病毒和抗感染的药物的,应推迟做核酸检测,避免影响检测结果。

四、若是进行鼻拭子采样的话,对于鼻咽部有病症的急性期,如出血、水肿等人群可以暂不予检测。

五、刚进行核酸检测时出现恶心呕吐的人,应暂缓做核酸检测,需等检测者缓解后再予以进行。

六、被采样者用手或其他物品触及拭子采样冠、棉签的前端的不宜进行,否则容易造成污染,影响检测结果,需更换进行重做。

③ 核酸采样摘口罩正确方法

核酸采样摘口罩正确方法

核酸采样摘口罩正确方法,网上流传的“核酸检测时把口罩往上推只露出嘴巴”的做法,是不可取的。如有触碰或污染口罩内面,请及时更换新的口罩。核酸采样摘口罩正确方法。

核酸采样摘口罩正确方法1

核酸采样时要注意,手不能碰及口罩外面,要用双手从耳朵后面取下口罩。然后屏住呼吸,不要对外呼气,避免呼出的气溶胶给周围环境带来污染,或给其他人造成一定的风险。

检测前在医务人员示意后取下口罩,采样结束后立即戴好,可备一个备用口罩,污染后方便随时更换。

去核酸检测前,建议准备备用口罩。

核酸检测排队时一定要正确佩戴口罩,采样时,当工作人员做好手卫生拿出采样棉签准备采样时,你才可以取下口罩,双手拉住口罩耳带不放,采样结束后立即戴好口罩并离开。当发现口罩被污染时,建议立即更换上备用口罩,换下的口罩扔进采样点设置的“废弃口罩专用桶”。

如果没有带备用口罩,回家后摘下的口罩建议不要二次使用,需密封或者消毒后丢到小区设置的“废弃口罩专用桶”或者放入塑料袋密封后丢弃至其他垃圾收集容器内。

用过的口罩不能随便丢!该怎么处理?

健康人群使用后的.口罩,按照生活垃圾分类的要求处理;

疑似病例或确诊患者佩戴的口罩,不可随意丢弃,应视作医疗废弃物,严格按照医疗废弃物有关流程处理。

核酸检测不能“啊”出声?疾控专家释疑

在核酸检测时,不能发“啊”的声音。这是因为当采样者为阳性患者时,喊“啊”可能会呼出大量的病毒,并在采样区域形成气溶胶,造成采样点环境污染,下一位市民参加核酸检测时,可能会无法避免地将病毒的气溶胶吸入呼吸道。

正确配合方式是与前后的人保持距离,前一位在采样的时候,不要凑近去看,当排到自己的时候要等工作人员把咽拭子拿出来,准备好了才可以张开嘴巴,但是不要对外呼气,屏住呼吸,尽量打开口腔,做出“啊”的口型,让工作人员能够看到您的扁桃体,以便采样顺利完成。

核酸采样摘口罩正确方法2

近日,网上流传做核酸检测时

“把口罩往上推只露出嘴巴”

这种做法是否可取?

江苏省疾控中心消毒与媒介生物防制所主任技师孙巍表示,网上流传的“核酸检测时把口罩往上推只露出嘴巴”的做法,是不可取的。

“首先核酸检测是必须暴露嘴巴的,嘴巴暴露后在密封不是很好的情况下,不规范包裹住鼻部,没有太大实际意义。其次在用手把口罩往上推的过程中,有可能造成手或者面部的皮肤接触到口罩的外部,让受到污染的口罩外部接触到自身皮肤,所以不建议在核酸检测中采取这种方式。”

专家建议,如果必须摘掉口罩,比如核酸检测时,摘口罩时应该抓住耳带解下口罩,手避免接触口罩外面。妥善保存摘下的口罩,避免污染口罩内面,检测结束后及时佩戴,如有触碰或污染口罩内面,请及时更换新的口罩。

孙巍提醒,正确佩戴口罩还要注意以下事项:不要为了说话、饮食方便,将口罩拉至下颌、脖颈等位置,也不要将口罩挂在手臂上,使口罩内层受到污染。

同时专家提醒,考虑到天气原因,普通公众可以在非密闭环境、非人员密集环境中选择质地相对轻薄的一次性使用医用口罩。要注意的是,普通的纱布口罩或者防晒口罩,是起不到防护作用的,要在正规渠道购买的符合标准的口罩。如果需要长时间佩戴口罩,佩戴前在鼻梁、颧骨、耳根等部位涂抹润肤霜,减少口罩和皮肤之间的摩擦,缓解面部勒痕。

核酸采样摘口罩正确方法3

核酸检测时口罩怎么摘

1、首先要多备一个新的医用防护口罩。

2、正确戴好口罩,戴口罩前需洗手消毒,然后将口罩平展,双手平拉推向面部,捏紧鼻夹使口罩紧贴面部,用左手按住口罩,右手将护绳绕在耳根部,再用右手按住口罩,左手将护绳绕向耳根部,最后双手向下拉口罩边沿使其盖至眼下和下巴。

3、摘口罩时不要接触口罩前面,即污染面,用手捏住口罩的系带并将其扔掉,健康人群佩戴过的口罩,按生活垃圾分类的要求处理即可。

做核酸检测摘下口罩的时候会不会感染

根据情况决定,如:

1、做核酸检测时,如果检测人员中没有新冠感染者,那么自然也就不存在感染新冠肺炎的可能。

2、按照做核酸检测的相关要求,与其他受检者以及医护工作人员等保持一米间隔距离,不交流,正确戴好口罩等,检测期间只是在检测时摘下口罩进行核酸取样的话,也不会感染新冠的可能。

3、如果做核酸检测时没有戴好口罩,如没有戴牢,鼻子留有空隙,期间还去下口罩和别人交谈,采样时发出“啊”的声音,如果自己是新冠感染者可能会造成交叉感染现象,自己不是新冠感染者,也可能因为受检人群中有新冠感染者而传染上新冠病毒。

4、做完核酸检测后拿出新的口罩更换。

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