肠道菌群检测是通过对人体粪便的提取物检测肠道菌群状况,比例是否正常,存在哪些问题和风险。对于前述适应症疑似患者,治疗前均需进行肠道菌群进行多项常规生物指标检测,以初步判断患者肠道菌群状况。
在进行此基础上,进一步对疑似患者进行肠道菌群基因检测,并对结果进行详尽解读,以便给患者菌群移植治疗制定个性化精准菌群移植治疗方案。
⑵ 肠道菌群失调症辅助检查
肠道菌群失调症的辅助检查主要包括两种方法:菌群分析和结肠镜检查。
首先,菌群分析是主要的检查手段,分为定性和定量两种。定性分析通过常规微生物学检查,如葡萄球菌性肠炎粪便涂片革兰氏染色,可以观察到成堆的阳性葡萄球菌和中性多形核细胞,粪便培养则会显现大量葡萄球菌生长。白色念珠菌性肠炎则可通过病理材料涂片,经氢氧化钾处理后,显微镜下可见成簇的卵圆形白色念珠菌,革兰氏染色阳性,细胞内着色不均匀,细菌培养呈奶油色、光滑的细菌落,带有酵母气味。然而,仅在菌群交替症(三度比例失调)中,这种检查方法较为显着,对于其他失衡情况,定量分析更为关键。
定量检查则需要将粪便均质并稀释,培养后计算各类细胞菌落计数以确定细菌总数,这需要精细的操作和特定的培养基,如S培养基、伊红美蓝培养基、氯化钠琼脂和少鲍氏琼脂等。培养方法包括需氧和厌氧两种,后者通常采用生物厌氧法或厌氧缸法进行。
其次,结肠镜检查能直接观察肠道内部情况,表现为肠粘膜弥漫性充血、水肿,血管分支模糊或消失,有时可见糜烂溃疡和出血,甚至有黄色假膜附着。这些观察结果有助于评估肠道菌群失调的程度和可能的病理改变。
健康人的胃肠道内寄居着种类繁多的微生物,这些微生物称为肠道菌群。肠道菌群按一定的比例组合,各菌间互相制约,互相依存,在质和量上形成一种生态平衡,一旦机体内外环境发生变化,特点是长期应用广谱抗生素,敏感肠菌被抑制,未被抑制的细菌而乘机繁殖,从而引起菌群失调,其正常生理组合被破坏,而产生病理性组合,引起临床症状就称为肠道菌群失调症(alteration of intestinal flora)。本症的发生率约为2%~3%。
⑶ 肠道致病菌的分类及常用检测方法
根据可培养细菌的数量分类在肠道菌群中,可以培养到的细菌有400余种,依据其数量多少可以分为主要(优势)菌群(predominantmicroflora)和次要菌群(sub—dominantmicroflora)。
①主要(优势)菌群:指肠道菌群中数量大或种群密集度大的细菌,一般在10~10cfu/g以上,包括类杆菌属、优杆菌属、双歧杆菌属、瘤胃球菌属和梭菌属等专性厌氧菌,通常属于原籍菌群。优势菌群是对宿主发挥生理功能的菌群,在很大程度上影响着整个菌群的功能,决定着菌群对宿主的生理病理意义。
②次要菌群:数量在10~10cfu/g以下,主要为需氧菌或兼性厌氧菌,如大肠杆菌和链球菌等,流动性大,有潜在致病性,大部分属于外籍菌群或过路菌群。
检测方法:
1、采样及稀释
(1)按无菌操作法将检样25g(或25mL)放于含有225mL无菌水的三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用无菌均质器,以8000~10000r/min的速度离心1min,做成1:10的稀释液。
(2)用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1Ml,注入含有9mL无菌水的试管内,振摇混匀,做成1:100的稀释液,换用1支lmL灭菌吸管,按上述操作依次作l0倍系列稀释液。
(3)根据食品的卫生要求或对检验样品污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。
2、乳糖初发酵试验
即通常所说的假定试验。其目的在于检查样品中有无发酵乳糖产生气体的细菌。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双倍乳糖胆盐发酵管。
lmL及1mL以下者,用单倍乳糖胆盐发酵管。每一个稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
3、分离培养
将产气的发酵管分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板,置36±1℃温箱内培养18~24h,然后观察菌落形态并作革兰氏染色、镜检并作复发酵试验。
4、乳糖复发酵试验
即通常所说的证实试验,其目的在于证明经乳糖初发酵试验呈阳性反应的试管内分离到的革兰阴性无芽胞杆菌,确能发酵乳糖产生气体。
在上述选择性EMB培养基上,挑取可疑的大肠菌群菌落1~2个进行革兰染色,同时接种乳糖发酵管,置36±l℃温箱内培养24±2小时,观察产气情况。
凡乳搪发酵管产气,革兰染色为阴性反应的无芽胞杆菌,即报告为大肠菌群阳性;凡乳糖发酵管不产气或革兰染色为阳性,则报告为大肠菌群阴性。
(3)广东肠道菌群检测常用方法扩展阅读:
有益菌菌群的生理功能:
如果肠内有益菌菌群占优,肠内黏膜呈现粉红色,表示肠内环境相当良好。
1、吸收水分,粪便较软,较易排泄
在胃部分解消化的食物,经由小肠吸收营养后,成为粘稠状物体送至大肠。然后再经过18小时将水分及矿物质吸收,就变成容易排泄的粪便。肠道内环境良好时,粪便的软硬适中,排便会较为顺利。
2、缓和的蠕动,能顺利将粪便排出
借由肠的蠕动,将粪便缓慢的推送至肛门。如果蠕动过快或太慢,都将影响粪便的构成,导致便秘或者腹泻。而如果肠内干净,则蠕动的速度就相当的有规律,粪便可顺利排出。
3、有助维他命的合成
比菲德氏菌等好菌能维护肌肤的健康,并具有合成有助热量产生的维他命B1、B2及B6等,以及与止血、骨骼形成有关的维他命K等之功用。健康的肠道,好菌会不断繁殖,维他命的合成也可顺利进行。
4、迅速排出有害物质
健康的肠道并非完全没有坏菌的存在,有害物质多少会产生。当然还包括,吃进体内的食品化学添加物或是无法成为营养成分的物质。只要肠内环境良好,这些物质在开始危害身体前就被排出体外。
5、避免病原菌的侵害
比菲德氏菌等好菌可以刺激并提高身体的免疫机能,而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特质,所以像是含有好菌的乳酸饮料或健康食品等,都可抑制病原菌在肠内繁殖。
肠道有益菌菌群除了以上功能之外,对人体还有营养作用,如糖尿病、高血压、高血脂等。B族维生素和非必需氨基酸对人类的毛发具有重要的作用,当缺少这些营养元素,会导致头发脱落或毛发发黄、发叉,容易折断等现象。
⑷ 医院怎么检查肠道菌群
肠道菌群有两种检查方法。(一)菌群检查为主要检查方法,有定性分析和定量分析两种。(1)定性分析,与一般微生物检查方法相同,定性分析后,要进一步做定量检查。(2)定量检查,手续麻烦,一般实验室很少采用。(二)结肠镜检查:有散在的糜烂性溃疡及出血,有时可能会见黄色假膜附着。如果症状严重者建议去医院诊断及治疗。
肠道内种类繁多的细菌之间相互作用以维持肠道正常菌群的稳定性。肠道中需氧菌和兼性厌氧菌消耗氧气,有利于专性厌氧菌生长。专性厌氧菌过度繁殖反过来抑制需氧菌生长,进一步抑制厌氧菌自身繁殖。这些细菌还通过各种代谢产物互相影响,起到自身调节作用。有些学者将胃肠道菌群分为原籍菌(或称常住菌群或固定菌群)和外籍菌(或称过路菌群或游动菌群),正常菌群是以原籍菌为优势菌群,外籍菌参与组成,外籍菌在人体中数量少而且不稳定。当肠道内一些原籍菌由于失去制约而过度生长叫肠道菌群失调。