泌尿系结核最新检测方法

A. 尿检检查有什么项目

尿液一般检测包括：

1 一般性状的检测：尿量、气味、外观、比重、酸碱度等

2 化学检测：尿蛋白、尿糖、尿酮体、尿胆原、尿胆红素等。

3 尿沉渣显微镜检测：细胞、管型、结晶体等。

B. 叙述结核杆菌的检验程序

结核杆菌与麻风杆菌是分枝杆菌属中的主要病原菌。
结核杆菌菌体细长略带弯曲，有分枝生长趋势。菌体含脂量高，与其抗酸特性、抵抗力特性、致病性与免疫性等都有密切关系。该菌营养要求高，生长缓慢，形成“菜花状”菌落。

一、结核杆菌检验程序
结核病人病灶中查到结核杆菌，是病原学诊断的重要依据，根据感染部位不同，可采集病人的痰、尿、粪便、脑脊液、胸腹水、胃液等，按以下程序进行检验。

二、结核杆菌培养特性
1. 液体培养基（苏通氏培养基、小川培养基、血清酸性培养基等）结核杆菌生长表现：标本材料经前处理（即酸碱处理，可液化标本，也可杀死杂菌，还可浓缩集菌）后接种液体培养基，35℃培养1-2周，由于表面生物，可在培养基表面表成污灰、干燥、有皱褶的菌膜。
2. 固体培养基（改良罗氏培养基、丙酮酸钠培养基等）结核杆菌生长表现：标本材料经前处理后，接种固体培养基，37℃培养2-4周，在培养基表面可形成乳白或米黄色、不透明、粗糙颗粒状或节状堆聚的菌落，呈现“菜花状”。
3. 结核杆菌快速培养检测方法：无菌手续将前处理后的材料涂片，置液体培养基中，35℃恒温箱CO2培养箱内培养，3-5日后，每隔日取出一玻片，染色镜检，可快速获得结果。

三、齐~尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色法
【原理】
结核杆菌对苯胺染料不易着色，若加温或延长染色时间使其着色后，再用3%盐酸酒精处理也不易脱色，再经美兰复染，结核杆菌及其他分枝杆菌仍呈红色，而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。
【材料】
1. 结核病人痰液：采取清晨第一口粘痰，或浓缩集落菌法处理过的痰标本。
2. 抗酸染色液
3. 载物玻片、玻片夹、酒精灯、腊笔等。
【方法】
1. 无菌手续采取痰液涂片，自然干燥，火焰固定。
2. 用腊笔将涂面局部隔开，滴加石炭酸复红染液，酒精灯上加热至出现蒸气。切勿沸腾，亦不可使染液干涸。如有干涸的趋势，应及时补加染液。持续染色5-8分钟，待冷后流水漂去多余的染液。
3. 用3%盐酸酒精清脱色，脱至涂面无色为止，约1-3分钟，自来水冲洗。
4. 滴加吕氏美兰染液复杂30秒~1分钟，水洗。自然干燥或吸干后油镜检查。
【结果】
1. 结核杆菌呈现细长，略有弯曲的红色菌体，有的可表现出分枝特征，有的菌体表现有多数浓染颗粒。结核杆菌大多分散排列，亦可以见到有纵行条索状排列。
2. 涂片染色能查到结核杆菌者，一般需要每毫升痰液内含菌量至少应有500个以上，甚至需达到5万以上。故材料多进行浓缩集菌处理，以提高检出阳性率，也造成在染色标本片观察中，不一定每个视野都能看到结核杆菌。
3. 结核杆菌易发生变异，在陈旧培养基或临床治疗后标本材料中，结核杆菌往往菌体断裂，或形成非抗酸性革兰氏阳性的短杆状、球状颗粒，亦称Much颗粒。
4. 标本已经高压灭菌处理，不影响染色结果，也保证操作者的安全。

四、荧光染色法
此系用金胺荧光素染扩酸性细菌的方法，简便易行，但不具特异性。金胺染色法有多种、现列于后表，可选择使用，应用荧光显微镜检查结果。

五、结核杆菌毒力试验——动物试验法

【材料】
1. 动物：体重200~250克豚鼠2只
2. 结核杆菌培养物或结核病人检验材料（痰、尿、粪、腹水等材料经浓缩集菌）
3. 注射器及消毒用材料等。
【方法】
1. 选取结核菌素试验为阴性的豚鼠两只。
2. 吸取结核杆菌悬液或病人检材，注入豚鼠腹股沟皮下0.1ml
3. 注射后每周定期检查一次，观察豚鼠腹股沟淋巴结是否肿大，局部变硬，化脓及体重减轻、体温升高等症状。
4. 给豚鼠作结核菌素试验，是否出现阳性结果。
5. 6周后，将豚鼠进行解剖，观察淋巴结是否肿大，有无干酪性病变，肝、脾、肺等是否肿大，表面有无灰白色结节病灶，取可疑病灶进行涂片染色镜检和分离培养。若为阳性结果，可报告“动物接种后××天查到有结核菌感染”。如无症状及病变者，可报告为阴性。

六、结核杆菌浓缩集菌法（以处理痰标本为例）
【材料】
结核病人24小时痰液，细口瓶，0.02%酚红液、汽油，NaOH，无菌生理盐水等。
【方法】
(一)漂浮法：
1. 取24小时痰液15毫升，装入细口瓶内，加入2倍量0.5%NaOH摇匀，高压灭菌或煮沸20—30分钟杀菌。
2. 待冷后加入汽油2毫升（二甲苯也可以），用力振荡20—30分钟，用生理盐水加至液面与瓶口齐，静置半小时。
3. 取瓶口表面油状物涂于载物玻片上，微微加热，干后再加，如此重复5—6次，至厚度适宜，烘干待冷，抗酸染色，油镜头检查。

(二)沉淀法：
1. 取痰液1份或2倍量4%NaOH，高压无菌或煮沸20—30分钟后，加入0.02%酚红指示剂0.1毫升，剧烈振荡混匀，亦可置37℃水浴消化30分钟。
2. 矫正PH为7.0，3000转/分离心30分钟，弃去上清液。
3. 取沉淀物涂片染色镜检。若进行分离培养和动物接种，可免去高压灭菌或煮沸的程序。

附录：抗酸染液的配制
1. 石炭酸复红液：称取碱性复红4克，溶于95%酒精100毫升中成饱和液。再取饱和液10毫升与5%石炭酸溶液90毫升混匀即成。
2. 3%盐酸酒精：取浓盐酸3毫升，95%酒 97毫升混合。
3. 吕弗勒氏碱性美兰液：称取美兰2克，溶于95%酒精100毫升中，配成饱和液，取饱和液30毫升，再加入蒸馏水100毫升及10%氢氧化钾水溶液0.1毫升即成。

C. 泌尿生殖系统的X造影方法有哪些

静脉肾盂造影：适应于肾、输尿管疾患，如结核、肿瘤、畸形和积水；尿路结石；原因不明的血尿和脓尿；尿道狭窄不能插入导管或做膀胱镜检查者；了解腹膜后包块与泌尿系的关系；肾血管性高血压的筛选检查。

碘过敏；全身情况衰竭、急性传染病或高烧；急性泌尿系炎症及严重血尿、肾绞痛；妊娠期及产褥期；血尿素氮高于17.8毫摩尔/升，造影一般不显影为相对禁忌；骨髓性白血病有严重蛋白尿时；严重的甲状腺机能亢进，均禁用。

大剂量静脉滴注肾盂造影：适应于常规造影不满意，如肥胖、腹部有巨大肿块或不能禁水和加腹压者；梗阻性病变引起的氮质血症，在血尿素氮高达17.8毫摩尔/升(50毫克/分升)血浆时亦可显示尿路；输尿管疾病；肾造影断层摄影；加尿素廓清试验检查甄别是否有肾血管性高血压；肾功能衰竭不宜做静脉肾盂造影者。

碘过敏者；闭尿或多发性骨髓瘤；肝功能严重受损者禁用，糖尿病病人应改用生理盐水代替5%葡萄糖溶液做稀释液。

逆行性肾盂造影：适应于不适于做静脉肾盂造影者，如心、肝、肾功能差及碘过敏者；静脉法不显影的肾、输尿管疾患，如严重的肾结核、肾积水及先天性多囊肾等；多次静脉肾盂造影无法将肾盂、肾盏显影满意者；证实平片所示阴影与输尿管的关系；了解肾、输尿管与邻近器官的关系，观察有无受累情况。

尿道狭窄不能做膀胱镜检查者；急性下尿路感染及出血；严重的心血管疾患，均禁用。

膀胱造影：适应于膀胱疾患，如膀胱肿瘤、炎症、结石、憩室和发育畸形等；观察前置胎盘、盆腔肿瘤和前列腺病变与膀胱的关系；脐尿管未闭及输尿管囊肿。

膀胱及尿道急性炎症禁用。

尿道造影：适应于尿道先天性畸形；外伤后了解尿道所损伤部位及范围；前列腺病变；尿道周围炎及瘘管；尿道结石。

急性尿道炎及龟头炎；尿道出血；碘过敏，均禁用。

肾动脉造影：适应于肾性高血压，包括肾血管性和实质性病变；肾先天畸形，如肾发育不全、异位肾和马蹄肾；肾脏肿块，需鉴别性质者；部分肾切除术前需了解肾血管分布情况者；肾外伤和肾移植术后需了解肾循环情况者；原因不明的血尿、尿路造影阴性者。

碘过敏或过敏体质；出血性疾病；肝肾动脉严重受损；急性感染和传染病；心脏衰竭；严重肾病、血液尿素氮明显增高者，均禁用。

子宫输卵管造影：适应于不孕症，可了解系原发或继发，造影能显示输卵管梗阻或不通畅，还可使轻度输卵管炎引起的粘连再通；生殖道畸形；输卵管慢性炎症、积水及结核，鉴别输卵管积水与小的卵巢囊肿；子宫不正常出血，寻找出血原因，了解宫腔粘膜情况；子宫肿瘤异物和卵巢肿瘤及其他盆腔内肿瘤；观察绝育术后输卵管情况，多用于输卵管结扎后考虑进行再通术者。

各种急性或亚急性内生殖器炎症及盆腔炎症；月经期或经后4天以内不宜造影，以免感染或造影剂逆行进入血循环；严重心肺疾患或全身疾患，发热体温在37.5℃以上时不宜造影；碘过敏者；刮宫术后或内生殖器出血期间，造影可引起感染或油栓；妊娠期不宜造影，以免流产或造成胎儿放射性损伤。

D. 膀胱结核的检查项目有哪些

尿液检查：尿常规可见较多脓细胞、红细胞。炎症性痉挛时，脓尿及血尿的程度与尿频基本一致，而膀胱挛缩时尿频虽显着，但尿内炎性细胞并不多。尿液检查找抗酸杆菌常阳性，聚合酶链反应(PCR)技术可提高检查阳性率且快速。
1.膀胱镜检查见膀胱黏膜充血、水肿;结核结节或溃疡形成;并可见膀胱容量变小，活检可证实为结核。
2.膀胱造影炎症性痉挛在注入造影剂时感疼痛，膀胱形状可正常，或呈折叠状且有膀胱颈部痉挛;而膀胱挛缩患者注入造影剂时不痛，仅有胀感，膀胱甚小呈圆形，边缘不光滑，不呈折叠状，重者膀胱颈部张开，后尿道扩张。必要时可用鞍麻作鉴别：炎症性痉挛在鞍麻后膀胱容量可扩大，而膀胱挛缩则仍不能扩大。
3.结核性膀胱自发破裂时有突发腹痛，腹穿可见黄色尿液，膀胱造影有助于诊断。
4.晚期有贫血、水肿、肾功能不全等表现，IVU检查可见肾输尿管结核表现及膀胱容量变小。
5.CT检查近年来，CT检查已被广泛应用于泌尿生殖系结核的诊断，其优点是对钙化、肾脏的功能性异常和肾周扩张较为敏感，还能显示实质瘢痕和表现为低密度的干酪样坏死灶。晚期肾脏病变均可显示肾积水，肾萎缩和肾钙化。
6.几种新的诊断方法
(1)放射性核素检查对肾结核的诊断也有一定价值。Kozia用间接放射性核素药物造影法观察结核患者血管状况，以决定治疗方案及判断治疗效果。
(2)Mochalova报道了一种诊断肾结核的新方法：先在患者皮下注射结核菌素50U，24h及72h分别测定肾脏的特异性酶——转脒基酶，若其活性增加2倍或2倍以上，即可诊断为肾结核。
(3)对结核诊断的研究正着重于血清学检测方法，如抗PPD-IgG的检测，Slatkin等也充分肯定了该方法的诊断价值，但各种血清学检测手段都有一定的假阳性率及假阴性率。即使被公认为比较敏感的酶联法和放免法的检测，其阳性率亦仅为70%～80%，特异性为97.5%，正确性为75%左右。
(4)目前较先进的诊断方法当推基因诊断技术，包括核酸探针、转印指纹和聚合酶链反应。最大优点是高敏感、高特异性和快速，还能检出低活力的结核杆菌和一些非杆菌异型结核杆菌。该技术尚处于初级研究阶段，有待于进一步完善与推广。

E. 细菌学有哪些检验方法

直接涂片检查：取混匀新鲜尿涂片，健康人的尿涂片无细菌。若每个油镜视野下可见1条或以上的细菌，提示为菌尿。并可行革兰氏染色，初步确定尿路感染细菌是阳性球菌或阴性杆菌。细菌培养：目前多采用定量接种环法，培养24h，计数菌落。阴性杆菌分裂快，菌落数>l〇5cfo/ml，提示菌尿，菌落数104〜105cfo/ml为可疑。阳性球菌分裂慢，菌落数>103cfU/ml为菌尿。结核菌检查：尿结核菌检查是确定有无泌尿系结核的重要方法，尿沉渣涂片抗酸染色较简单，阳性率为50%〜70%;清晨第1次尿送检则阳性率高。尿结核菌培养阳性率可达90%，但结核菌生长缓慢。使用改良罗氏培养基，一般需4〜8周始能报告结果。近年常用聚合酶链反应（PCR)方法，使含微量结核菌DNA扩增，40条结核菌即可有阳性结果，此法特异性强，2d可有结果，但时有假阳性或假阴性的情况。菌尿的辅助检查亚硝酸盐试验：革兰阴性杆菌如大肠、副大肠杆菌能将尿中的硝酸盐还原为亚硝酸盐，而球菌和结核菌无还原硝酸盐的能力，因此亚硝酸盐试验阳性，提示革兰阴性杆菌的感染。氯化三苯四氮唑试验（TTC试验）；大部分革兰阴性活杆菌能将无色TTC还原为红色的三苯甲替，而球菌及变形杆菌则呈阴性。故可用以初步判定是哪一类细菌感染。尿抗体包裹细菌（ACB):肾盂肾炎为肾实质感染，在细菌抗原作用下，机体可产生相应抗体，抗体将致病菌包裹，在荧光镜下观察用荧光素标记的抗人体蛋白抗体处理的尿细菌，若表面有荧光抗体包裹则大多属肾盂肾炎，膀胱炎为黏膜浅表感染，故细菌表面无荧光抗体包裹。用ACB法有助于上、下尿路感染的定位诊断。但在前列腺炎患者，其ACB试验亦呈阳性，应注意鉴别。其他：另外还有过氧化物酶试验、葡萄糖氧化酶试验、鲎试验及尿氧压测定均可帮助诊断尿路感染，但目前临床上应用较少。