① 药材及成方制剂显微鉴别法
药材及成方制剂显微鉴别法"药材及成方制剂显微鉴别法
显微鉴别系指用显微镜对药材的切片、粉末、解离组织或表面制片及成方制剂中药味的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择有代表性的样品,根据各该药材鉴别项的规定制片。成方制剂根据不同剂型适当处理后制片。
一、横切片或纵切片:选取药材适当部位,软化后用徒手或滑走切片法,切成10~20μm的薄片
选用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其它试液处理后观察。必要时可包埋后切片。
二、粉末制片:取粉末少量,置载玻片上,摊平,选用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其它适当试液处理后观察。
三、表面制片:将样品湿润软化后
切取一部分或撕取其表皮
加适宜的试液观察。
四、解离组织片:如样品中薄壁组织占大部分,木化组织少或分散存在,可用氢氧化钾法;如果品坚硬,木化组织较多或集成较大群束,可用硝铬酸法或氯酸钾法。在解离前,应先将样品切成宽或厚约2mm的小条或片。
1.氢氧化钾法
置样品于试管中,加5%氢氧化钾溶液适量,加热至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去碱液,加水洗涤后,取出少量置载玻片上,用解剖针撕开,以稀甘油装置观察。
2.硝铬酸法
置样品于试管中
加硝铬酸试液适量,放置,至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤后,照1.法操作装置。
3.氯酸钾法
置样品于试管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸钾少量
缓缓加热,待产生的气泡渐少时,再及时加入氯酸钾少量,以维持气泡稳定地发生,至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤后,照1.法操作装置。
五、花粉粒与孢子制片:取花粉、花药(或小的花朵)或孢子囊群(干燥样品浸于冰醋酸中软化),用玻璃棒捣碎,过滤于离心管中,离心,取沉淀加新鲜配制的醋酐与硫酸(9︰1)的混合液1~3ml,置水浴上加热2~3分钟,离心,取沉淀,用水洗涤2次
加50%甘油与1%苯酚3~4滴
用品红甘油胶封藏观察。也可用水合氯醛试液装置观察。
六、细胞及细胞内含物等的测量:在显微镜下测量细胞及细胞内含物等的大小,可用目镜测微尺测量。先将目镜测微尺装入目镜内,用镜台测微尺标化。标化时,转动目镜,移动镜台测微尺,使两种量尺的刻度平行,左边的“0” 刻度重合,再找第二条重合刻度。根据两条重合刻度间两种量尺的小格数,计算出目镜测微尺每小格在该物镜条件下所相当的大小(μm)。测量时
以目镜测微尺测量目的物的小格数,乘以每一小格的大小(μm)。通常是在高倍物镜下进行,但欲测量较长的如纤维、非腺毛等的长度时
则以在低倍物镜下测量较为方便。记录最大值与最小值(μm)
可允许有少量略高或略低于药典规定的数值。
七、细胞壁性质的检定:
1.木质化细胞壁
加间苯三酚试液1~2滴,稍放置,加盐酸1滴
因木化程度不同
显红色或紫红色。
2.木栓化或角质化细胞壁
加苏丹Ⅲ试液,稍放置或微热,显橘红色至红色。
3.纤维素细胞壁
加氯化锌碘试液;或先加碘试液湿润后,稍放置
再加硫酸溶液(33→50);显蓝色或紫色。
4.硅质化细胞壁
加硫酸无变化。
八、细胞内含物性质的检定:
1.淀粉粒
(1)加碘试液,显蓝色或紫色。
(2)用甘油醋酸试液装置,置偏光显微镜下观察
未糊化的淀粉粒显偏光现象;已糊化的无偏光现象。
2.糊粉粒
(1)加碘试液,显棕色或黄棕色。
(2)加硝酸汞试液
显砖红色。材料中如含有多量脂肪油,宜先用乙醚或石油醚脱脂后进行试验。
3.脂肪油、挥发油或树脂(1)加苏丹Ⅲ试液,显橘红色、红色或紫红色。
(2)加90%乙醇,脂肪油不溶解(篦麻油及巴豆油例外),挥发油则溶解。
4.菊糖
加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸,显紫红色并很快溶解。
5.粘液
加钌红试液,显红色。
6.草酸钙结晶(1)加稀醋酸不溶解,加稀盐酸溶解而无气泡发生。
(2)加硫酸溶液(1→2),逐渐溶解,片刻后析出针状硫酸钙结晶。
7.碳酸钙(钟乳体)
加稀盐酸溶解,同时有气泡发生。
8.硅质
加硫酸不溶解。
九、鉴别由粉末药材制成的成方制剂时,散剂照上述粉末制片法制片;丸剂、片剂等,可取2~3丸(片)研细后,取少量样品,滴加规定的试液,搅拌均匀,使粘结的细胞、组织散离,再按粉末特征进行鉴别;蜜丸可直接挑取少量样品制片,或酌用热水脱蜜后制片观察。
附:显微试液配制法
三氯化铁试液
取三氯化铁1g,加水使溶解成100ml,即得。
水合氯醛试液
(见附录ⅩⅤ B)。
甘油醋酸试液
取甘油、醋酸及水各等份,混匀,即得。
苏丹Ⅲ试液
(见附录ⅩⅤ B)。
钌红试液
取10%醋酸钠溶液1~2ml,加钌红适量使呈酒红色,即得。
本液应临用新制。
间苯三酚试液
取间苯三酚1g,加90%乙醇100ml使溶解,滤过,即得。
本液应置棕色玻璃瓶内,在暗处保存。
组织解离液
(1)取硝酸10ml,加入100ml水中,混匀。 (2) 取铬酸10g,加水100ml使溶解。用时将二液等量混合,即得。
品红甘油胶
取动物胶1g,加水6ml,浸泡至溶化,再加甘油7ml,加热并轻轻搅拌至完全混匀,用纱布滤于培养皿内,加碱性品红溶液(碱性品红0.1g,加无水乙醇600ml及樟油80ml,溶解)适量,混匀,凝固后即得。
α-萘酚试液
取15%的α-萘酚乙醇溶液10.5ml
缓缓加硫酸6.5ml,混匀后再加乙醇40.5ml及水4ml,混匀,即得。
铜氨试液
取碳酸铜0.5g,加水适量,置乳体中研磨,再加浓氨溶液10ml使溶解,即得。
硝酸汞试液
取汞4.5g ,加发烟硝酸3ml,俟作用完毕,加等量水稀释,即得。
本液应置棕色玻璃塞瓶内,在暗处保存。
氯化锌碘试液
取碘化钾8g,加水8.5ml使溶解
再加无水氯化锌2.5g使溶解,加碘适量至饱和,即得。
本液应置棕色玻璃塞瓶内保存。"
② 如何用化学方法鉴别药材提取液中含有羟基蒽醌类成分
滴加碱水溶液。
药材饮片滴加碱水溶液,碱水成红色,说明药材中含蒽醌类成分。蒽醌化合物是决明子中主要的功效成分,有抗氧化,抑菌,抗突变等多种药理活性,在医药,保健品和食品添加剂等领域应用广泛。
中草药成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关。溶剂可分为水,亲本性有机溶剂及亲脂性有机溶剂,被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同。
③ 如何用化学方法鉴别枸杞用硫磺熏过
1、最简单的判断方式是看果蒂,正常的枸杞尖端蒂处多为白色,用硫磺熏蒸染过色的枸杞并没有这样的白点。
拓展资料
1、枸杞为何要用硫磺熏制
原理和贝母、菊花等中药材相似,因为熏制以后不但能够防虫,延长保质期,还能够提亮药材外观,使其看上去“卖相”更好。
2、被硫磺熏过的枸杞的危害
经过硫磺熏蒸后,二氧化硫会残留在枸杞中,人服用后,二氧化硫进入人体,经过化学反应生成亚硫酸盐,并由组织细胞中的亚硫酸氧化酶将其氧化为硫酸盐,通过正常解毒后最终随尿排出体外。因此,少量二氧化硫进入人体可以认为是安全无害的,但如果二氧化硫严重超标,则具有一定毒性。
硫磺里含有铅、砷等重金属,会对人的肝脏或肾脏造成严重的影响;硫磺燃烧后能产生二氧化硫,二氧化硫也是一种致癌化学物质。这些化学物质可残留在食品表面或渗透到食品内部,给人体带来很大的危害。
二氧化硫还很容易被湿润的黏膜吸收,进而对眼及呼吸道产生强烈的刺激作用,导致头昏、腹痛和腹泻,严重的会造成中毒。长期食用硫磺熏制过的食物会让人慢性中毒,甚至致癌。