1. 荧光物含量测定方法的定量测定
荧光分析法的定量测定方法较多,可分为直接测定法和间接测定法两类。
a.直接测定法:
利用荧光分析法对被分析物质进行浓度测定,最简单的便是直接测定法。某些物质只要本身能发荧光,只须将含这类物质的样品作适当的前处理或分离除去干扰物质,即可通过测量它的荧光强度来测定其浓度。具体方法有两种。
1. 直接比较法:配制标准溶液的荧光强度Fx,已知标准溶液的浓度Cs,便可求得样品中待测荧光物质的含量。
如果空白溶液的荧光强度调不到零,则必须从Fs和Fx值中扣除空白溶液的荧光强度F0,然后进行计算。
2. 标准曲线法:将已知含量的标准品经过和样品同样处理后,配成一系列标准溶液,测定其荧光强度,以荧光强度对荧光物质含量绘制标准曲线。再测定样品溶液的荧光强度,由标准曲线便可求出样品中待测荧光物质的含量。
为了使各次所绘制的标准曲线能重合一致,每次应以同一标准溶液对仪器进行校正。如果该溶液在紫外光照射下不够稳定,则必须改用另一种稳定而荧光峰相近的标准溶液来进行校正。例如,测定维生素B1时,可用硫酸奎宁溶液作为基准校正仪器。
b、间接测定法:
有许多物质,它们本身不能发荧光,或者荧光量子产率很低,仅能显现非常微弱的荧光,无法直接测定,这时可采用间接测定方法。
间接测定方法有以下几种:
1.化学转化法:通过化学反应将非荧光物质变为适合于测定的荧光物质。例如金属与螯合剂反应生成具有荧光的螯合物。有机化合物可通过光化学反应、氧化还原、偶联、缩合反等应,使它们转化为荧光物质。
2.荧光猝灭法:这种方法是利用本身不发荧光的被分析物质能使某种荧光化合物的荧光猝灭的性质,通过测量荧光化合物荧光强度的下降,间接地测定该物质的浓度。
3.敏化发光法:对于很低浓度的分析物质,如果采用一般的荧s光测定方法,其荧光信号太弱而无法检测,可使用一种物质(敏化剂)以吸收激发光,然后将激发光能传递给发荧光的分析物质,从而提高被分析物质测定的灵敏度。
2. 正确检测荧光剂的方法
荧光剂(又称增白剂、光学增白剂、荧光增白剂)检测,这里提供一个简单低成本的方法,可以使用365nm的紫外线小电筒照射(也可以是紫外线验钞机),如有发蓝紫色荧光(一般为蓝、紫,也有绿、红,和原来的颜色对比发生变化,明显鲜艳了很多并发亮,多照照几个其他物品对比就知道了),则是含有荧光剂。这种电筒在TB上有卖,搜索(荧光剂检测),不贵一般10-30多块钱左右,还是比较实用的,纺织物、塑料制品、护肤品、纸张等(有的食品有特殊的荧光反应除外,比如大米的脂肪会有荧光反应)含有荧光剂都能照射出来。以后就注意检测一下,特别是宝宝用的,或是贴身用品、护肤品。如果是三无产品确实有含荧光剂的风险。在日常生活中,接触荧光剂的机会很多。只要不超过一定标准(上述方法只能检测出是否含有荧光剂,不能检查出是否超标),会给我们生活带来不少好处。如果过量的与它接触,会对人体造成伤害。提示:紫外线在不照射荧光物质下,是看不到的(如果有少量白光那是灯珠发出的部分可见光,并不是紫外线),如果反光能看到,说明被照射物体发生了荧光反应。紫外线对人体有害,避免直射人体和长时间使用。不懂的可以继续问,望采纳,谢谢。
3. 荧光检测方法
荧光检测是一种自然发光反应,通过荧光素酶与 ATP进行反应,可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣,在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量,并以数字形式予以表示,在1975年首先被应用到食品工业中,在1985年在化妆品制造业中得到应用。
荧光定量:采用国际主流的荧光定量PCR技术,迅速提升技术水平。
结果稳定:检测结果CV值与进口全自动PCR仪接近,具有自检功能,避免错误数据的输出。
封闭操作:全部检测过程均为闭管操作,于反应管处检测荧光,有效防止污染,解决PCR技术中最棘手之难题。
准确定量:满足临床对量化的需求,定量荡围宽,可涵盖大部分病原微生物,自动曲线拟合。
灵敏度高:利用光谱信号灵敏性的优势,有效提高检测灵敏度。
安全:全程无毒检测。
操作简便:省去后处理的烦琐过程。
直接打印:直接打印结果,无须记录大量数据。
升级版:FS1000有与电脑连接的数传输口,可以连接电脑,根据用户需要提供先进分析软件,全面分析实验数据。(电脑和打印机选配件)
故障率低:维护非常简单。
节约资源:可利用现用PCR扩增仪,最大限度节约资源。
4. 荧光pcr法是什么
一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。
技术原理
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中。
在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
5. 荧光标记法是什么
荧光物标记法,神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。
例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。
相关信息:
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。
荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简便等优点,使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。
6. 如何检测荧光剂
1、紫光灯照射。
2、验钞机检测。
3、手机检测。
4、滤纸。
5、专业的检测机构检测。
7. 如何测定一种有机化合物是否具有荧光性质
如果化合物有紫外吸收,应该有荧光性质。
常温物质经紫外线或X射线照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光即荧光。。
荧光光谱有两个主要优点:第一是灵敏度高.由于荧光辐射的波长比激发光波长长,因此测量到的荧光频率与入射光的频率不同.另外,由于荧光光谱是发射光谱,可以在与入射光成直角的方向上检测,这样,荧光不受来自激发光的本底的干扰,灵敏度大大高于紫外-可见吸收光谱,测量用的样品量很少,且测量方法简便.第二,荧光光谱能提供较多的信息,例如激发谱,发射谱,峰位,峰强度,荧光寿命。