疟疾检测方法

❶ 对于寄生虫病的诊断，大家有多少了解的，请选择一种你们比较熟悉的，说一说

举例我国新五大寄生虫中的血吸虫和疟原虫

血吸虫：

1 .病原学诊断

（1）粪检 直接涂片法（对急性期病人）、尼龙筛集卵法、加藤厚涂片透明法（Kato’s thick smear）、集卵毛蚴孵化法+沉渣镜检

（2）肠镜活组织检查虫卵 慢性和晚期病人肠壁增 厚、虫卵排出受阻，粪便中不易查获虫卵。

2.免疫学诊断：免疫学方法诊断血吸虫病，具有重要的辅助诊断价值

⑴皮内试验（intradermal test，idt）：一般皮内试验与粪检虫卵阳性的符合率为90%左右，易出现假阳性或假阴性反应，与其他吸虫病可产生较高的交叉反应；并且病人治愈后多年仍可为阳性反应。此法简便、快速、通常用于现场筛选可疑病例

⑵检测抗体 （迄今为止，防治现场和临床常以查特异性抗体为主。）方法有：

1）特有的方法：环卵沉淀试验、尾蚴膜反应

2）最常用的方法：快速ELISA法，常规ELISA的改良，快速、敏感。已广泛应用于临床、现场多年

3）最简便方法：快速简便的试纸条法（Dip-stick)，可用于家庭自我检测。

在国外，已广泛用于S.m诊断。国内对血吸虫病诊断研制成功。

⑶检测循环抗原：

抗体检测不能区分现症感染和既往感染，也不易于评价疗效。循环抗原是生活虫体排放至宿体内的大分子微粒，主要是虫体排泄、分泌或表皮脱落物中具有抗原特性，又可为血清免疫学试验所检出。cag的检测有其自身的优越性，能反映活动性感染，可以评价疗效和估计虫荷。

3类游离循环抗原，即肠相关抗原（gaa）、膜相关抗原（maa）和可溶性虫卵抗原（sea）。在检测方法上，采用检测不同靶cag的探针，包括抗血吸虫抗原不同表位──单克隆抗体、组合单克隆抗体以及多克隆抗体等。方法：斑点ELISA（dot-elisa），双抗体夹心ELISA

疟原虫：

1. 病原检查

（1）血膜染色镜检：取外周血制作厚、薄血膜-姬氏或瑞氏染剂染色-镜检

（2） 选择适宜的采血时间：恶性疟在发作前半小时至发作时；间日疟在发作后数小时至10余小时

2.免疫学诊断

（1）循环抗体检测：主要用于疟疾的流行病学调查、防治效果 评估及输血对象的筛选。

方法： 间接荧光抗体试验 、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）

（2）循环抗原检测：是否有活动感染。方法: 放射免疫试验、抑制法ELISA、夹心法ELISA

3.分子生物学技术：

（1）聚合酶链反应（PCR）具有敏感性高、操作简便、套式PCR系统

（2）核酸探针：用于恶性疟原虫的检测，具有敏感性高（0.0001％的原虫密度）

（3）环介导等温扩增（LAMP）

❷ 疟疾的诊断

1.流行病学
有在疟疾流行区居住或旅行史，近年有疟疾发作史或近期曾接受过输血的发热患者都应被怀疑。
2.临床表现
典型的周期性寒战、发热、出汗可初步诊断。不规律发热，而伴脾、肝肿大及贫血，应想到疟疾的可能。凶险型多发生在流行期中，多急起，高热寒战，昏迷与抽搐等。流行区婴幼儿突然高热、寒战、昏迷，也应考虑本病。
3.实验室检查
主要是查找疟原虫，通常找到即可确诊。血片找疟原虫应当在寒战发作时采血，此时原虫数多、易找。需要时应多次重复查找。并一定要做厚血片寻找。如临床高度怀疑而血片多次阴性可做骨髓穿刺涂片查找疟原虫。
4.分子生物学技术诊断法
（1）聚合酶链反应（PCR）检测检测的灵敏性和特异性均较高。PCR检测方法已在原来的基础上发展成多种方法，如巢式PCR、反转录酶PCR、PCR-ELISA等。除可以直接检测血样中的疟原虫外，还可以检测滤纸干血滴上的疟原虫。已从检测恶性疟原虫发展到检测间日疟原虫。
（2）DNA探针检测DNA探针检测具有良好的特异性和稳定性。
5.治疗性诊断
临床表现很象疟疾，但经多次检查未找到疟原虫。可试用杀灭红内期原虫的药物（如氯喹），治疗48小时发热控制者，可能为疟疾。但注意耐氯喹虫株。