㈠ 国标法如何测定食醋中氨基酸态氮
由中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研制，北京智林科技公司出品的“食品安全快速检测箱”、“常见急性食物中毒快检箱”，外型小巧、庄重大方、携带方便。箱内储物盒，不但容量大、且可随意组合。检测箱内的检测项目，都是针对社会关注的焦点、难点及食物链中容易发生问题的关键性环节。在这些方法中，除微生物法外，项目的平均检测时间不到10分钟，最长的也可在30分钟内出结果，非常适合现场使用。
食品安全快速检测箱由外箱、公共试剂盒、检测试剂盒、辅助仪器组成。检测箱外色为黑色和银灰色，上盖内侧有规范的装具袋，装备有常用的器材，如多功能剪刀、移液管、量筒等。检验箱采用耐酸碱、耐冲击、耐挤压材料，设计合理便于携带及现场操作。食品安全快速检测箱的外型设计得体、大小适宜、携带方便。箱内储物盒的设计不但容量大、且可随意组合。检测项目针对社会关注的食品安全热点、难点及食物链中容易发生问题的关键性环节。检测设备是目前国内较为先进或较为恰当的。
检测方法来源：一是将国标法、AOAC法或经典的教科书方法所用的诸多试剂事先做成试剂盒、试剂包或试纸卡，尽量减少现场试剂的配置。将方法中所用的仪器、器皿等研制成为或精心选购一些小巧和便于携带的设备。二是将实验室中最新的科研成果转化成为能适于现场使用的检测设备和方法。所采用的一些快速检测方法正在制订我国国家标准，如蔬菜中亚硝酸盐快速检测方法等，还有已成为了国家标准方法，如大肠菌群的检测方法、农药残留快速检测方法等。
目前,食品安全快速检测箱中有40多个理化快速检测项目，随着社会需求和技术的发展在不断增加。操作方法力求简单、易用，给操作者带来方便，为食品安全的监管、质控、以及食物中毒现场快速筛查提供科学有效的手段 。
一、食品安全快速检测箱 配置简介
食品安全快速检测箱分为：精简配置，中档配置，高档配置，微生物部分。可成套装备，也可根据需要选择配置。
1. 精简配置 （两个箱体,38个检测项目）
1.1基本配置
产品名称
产品规格
产品名称
产品规格
仿皮或铝合金箱体
1个
300ml塑料储液瓶各
1个
微型电子天平
1台
滤纸
1盒
计算器
1个
漏斗
2个
储物盒
5个
农药提取罐
10个
试管架
1个
一次性滴管
10支
多功能剪刀
1把
药勺
3个
比色管
5支
pH试纸
1包
大小试管各
5支
微型水浴锅
1个
5ml移液管移液球各
1个
说明书
1份
100ml塑料储液瓶
1个
1.2检测项目配置
产品名称
产品规格
产品名称
产品规格
食品中心温度计
一支
电导仪
1支
酒醇速测箱
1套
农药残留速测卡
2盒（40份用量）
亚硝酸盐速测管
40份用量
二氧化硫速测盒
约100份用量
甲醛定性速测包
100份用量
甲醛定性速测管
15份用量
苏丹红检测试剂盒
50份用量
注水肉检测试纸
60份用量
奶粉蛋白快速检测盒 50份用量
瘦肉精快速检测卡
10份用量
砷、汞检测试剂
约50份用量
氰化物检测试剂
约20份用量
氰化物检测装置
1套
食用油中大麻油速测鉴别试剂
约10份用量
食用油脂酸价、过氧化值速测卡
10份用量
食用油中巴豆油速测鉴别试剂
约10份用量
食用油中桐油速测鉴别试剂
约50份用量
食用油中矿物油速测鉴别试剂
约10份用量
假冒伪劣味精速测液
约20份用量
食醋中游离矿酸速测试纸
40份用量
食醋中总酸快速测定试液包
约25份用量
酱油中总酸与氨基酸态氮速测试液包
约25份用量
消毒液有效氯和双氧水速测试纸
1盒
碘盐含碘量速测液
（约500份用量）
食品安全快速检测技术（书）
1册
理化检验数据统计软件
1张
食品安全检测技术讲座（光盘）
1张
2. 中档配置 （三个箱体,41个检测项目）
在精简配置基础上增加：
农药残留速测仪(箱)1台
手动可调式移液器1.0～5.0ml（芬兰中国基地产品）1支
精密酸度计(带校准试剂)1支,手持式室内外电子温湿度计1台
车载电源转换器1个
游离性余氯速测盒1盒。
3. 高档配置 （四个箱体,45个检测项目）
在中档配置基础上增加：
食品和环境专用远红外线测温仪
消毒间紫外线辅照强度计
肉类水分快速测定仪
便携式超声波提取、溶解、清洗器
微型离心机各1个（台）
食品粉碎机1台
双通道计时定时器1个
卫生指标检砷管1套
仿皮箱体改为真皮箱体
增加1个铝合金箱体
二、部分检测项目简介
（一）急性食物中毒物质的快速筛选和测定
1. 农药测定：速测卡法（国标法），定性兼半定量。主要用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速定性，阳性结果为超标，超标符合率在80%左右。选用为速测卡而设计的速测仪后，15分钟内可测试10份样品。本方法还适用于食物中毒物质的快速筛选定性。
2. 鼠药测定：试剂包法（实验室科研成果），定性检测。30分钟内可完成毒鼠强（0.1μg/ml）、氟乙酰胺（50μg/ml）、敌鼠钠盐（45μg/ml）和安妥（20μg/ml）四种鼠药的定性。主要用于预防性监测和中毒物的筛选、定性鉴别。（括号内为检出限）。
3. 亚硝酸盐测定：速测管法（国标基础上的速测方法），定性兼半定量检测。可用作卫生指标检测、投毒监测和食物中毒物质的快速筛选、定性定量。最低检出量为0.025mg/L。现场使用，15分钟出结果。
4. 甲醇测定：酒醇速测仪（专利方法），不需试剂，定量测定,10分钟内出结果。主要用于配制酒中甲醇（≥1% V/V）的测定，尤其适用于可引起甲醇急性中毒酒样的现场快速测定。甲醇速测盒，适用于蒸馏酒中国家标准规定含量的现场快速测定，也适用于经过重新蒸馏的配制酒中甲醇含量的快速测定。
5. 砷、汞测定：工具盒法（经典传统方法），主要用于预防以三氧化二砷（砒霜）为代表的剧毒砷化物和以氯化汞为代表的剧毒汞化物混入、掺入食品的监测和中毒物的筛选、定性鉴别。检出限砷为1μg/g，汞为20μg/g，基本定性30分钟内出结果。
6. 氰化物的快速定性：苦味酸试纸法（国标法），主要用于预防剧毒氰化物混入、掺入食品的监测和中毒物的筛选、定性鉴别。现场检测20分钟出结果。10克样品中，苦味酸试纸对氰化物的检出限为0.15mg，相当于15mg/kg。
7. 食用油脂酸价和过氧化值测定：速测卡法（专利方法），半定量检测，酸价测试范围0～5.0 mg KOH/g，过氧化值测试范围0～50meq/Kg，2分钟内出结果。主要用于食用油脂卫生指标的监测，判定食用油脂是否新鲜和酸败程度。
8. 非食用油测定：试剂包法（国标法和经典方法），定性检测。5~20分钟内出结果。主要用于被矿物油（0.1%）、桐油（0.5%）、巴豆油（2.5%）等污染了的食用油的定性鉴别，以及这几种非食用油引起的中毒物的筛选定性。（括号内为检出限）。
9. 瘦肉精（盐酸克伦特罗）快速定性：胶体金标记法（专利方法），定性检测。20分钟出结果。
（二）慢性伤害物质的快速检测
1. 甲醛测定：试剂包或速测管法（实验室科研成果），定性检测。适用于水发产品和需要防腐的加工食品中人为加入甲醛或吊白块的测定。检出限10μg/ml。3分钟内出结果。
2.. 食醋中游离矿酸和感官的快速检测: 纸片法（国标法），定性，最低检出量为5μg，5分钟内出结果。
3.. 食品中漂白剂（二氧化硫）的快速测定：滴瓶法，国家标准分析方法改进后的现场快速检测方法。主要用于食品中滥用漂白剂的快速测定，以及人为加入吊白块的鉴别测定。检出限0.0016g/kg。检测时间（以白糖样品计）5分钟。
4. 游离性余氯测定：试剂盒法（国标基础上的快速方法），半定量，检出限0.05mg/，5分钟内出结果。适用于餐（饮）具消毒后残留余氯的测定、管网末梢饮用水中游离性余氯的测定、以及人工游泳池水中余氯的测定。
5. 苏丹红的快速检测：采用国家标准分析方法GB/T5009.35-2003中的纸层析法，并加以改进。在排除含有食用色素的情况下，检测非食用色素，并将苏丹红1、2、3、4号快检测出来。最低检出量为目视可见的苏丹红色素。同时也可检测其他一些非食用色素。
6.硼酸和硼砂的快速检测：采用国家药典方法并加以改进使其适合于现场使用。适用于粮食中掺入硼酸或硼砂作为杀虫防腐剂现象的检测。现场检测，10分钟内完成。
（三）伪劣食品的快速检测
1. 碘盐含碘量测定：一滴法（实验室方法），半定量，主要用于碘盐中碘含量测定和真假碘盐的鉴别。测试范围0～40 mg / kg 。1分钟内出结果。
2. 食醋中总酸含量的快速测定：滴瓶计数法（国标基础上的快速方法）。主要用于产品质量和假冒伪劣产品的现场检测。5分钟内出结果，方法误差±0.3%。
3. 酱油中总酸与氨基酸态氮含量的快速测定：滴瓶计数法（国标基础上的快速方法）。主要用于产品质量和假冒伪劣产品的现场检测。10分钟内出结果，本方法总酸测定误差±0.45%，氨基酸态氮测定误差±0.078%。
4. 假冒伪劣味精的快速检测：滴瓶计数法（国标基础上的快速方法）。现场检测5分钟内出结果，本方法误差±2.6%。
5. 注水肉的快速鉴别：肉类水分快速分析仪（专利方法）和注水肉监测试纸法，5分钟内可出结果。
6. 瓶装饮用纯净水的快速鉴别：电导率测定（国标法），2分钟内可出结果。
7. 掺杂使假伪劣木耳检测：吸水量和pH值检测（实验室方法）。30分钟可出结果。
8. 食品酸碱度测定：试纸法和酸度计法，测量范围0～14 Ph，准确度：试纸法±1pH，酸度计法±0.2pH， 1分种内出结果。主要用于检测食品酸碱度是否在规定的范围。
9.蜂蜜浓度和含水量的快速检测：蜂蜜比重计法。采用国家行业标准GH012-82方法并加以改进使其适合于现场使用。20分钟内出结果。适用于劣质蜂蜜和掺假蜂蜜的快速检测。
10.蜂蜜酸度的快速检测：滴瓶计数法。是在国家行业标准GH012-82方法基础上加以改进使其适合于现场使用。5分钟内出结果。适用于劣质蜂蜜和掺假蜂蜜的快速检测。
11.伪劣木耳的快速检测：吸水量和pH值检测。适于掺杂使假伪劣木耳的快速检测。30分钟可出结果。
（四）食品加工贮藏安全度的快速测定
1. 食品中心温度测定：中心温度计，范围 -50~150℃，分辨率0.1℃，精度 ±1℃。5分钟内出结果。主要用于《餐饮行业卫生管理办法》中规定的食品中心温度的监测。
2. 食品表面、环境温度测定：远红外测温仪（美国产品），范围 -30~200℃，分辨率0.5℃，精度 ±1℃，1秒种内出结果。主要用于HACCP要求的食品生产、贮藏、运输、销售等环节温度的测定。
3.消毒间紫外线辅照强度的测定：便携式辅照计（部颁标准方法），10分钟内即可完成卫生部消毒卫生规范中规定的检测项目。
4. 有效氯测定：速测卡法（实验室方法），半定量，测量范围10~300 mg/L。1分钟内出结果。主要用于监测含氯消毒液中有效氯的含量，保证消毒效果。
（五）微生物的快速检测
1. 餐饮具大肠菌群测定：纸片法（国标法），现场3分钟采样完毕，恒温箱24小时培养得出结果。主要用于监测餐饮具卫生状况。
2. 食品中大肠菌群测定：测试片法，适用于牛乳、冷饮和调味品中大肠菌群的快速测定。15～24小时出结果，而传统方法需要近一周的时间。
3. 食品中菌落总数测定：测试片法，18～24小时出结果，传统方法需要48小时。
4. 食品中霉菌、酵母菌数测定：纸片法，48小时出结果，传统方法需要近一周的时间。
5. 食品中金黄色葡萄球菌测定：测试片法，26小时出结果。
三、辅助设备简介
1． 微型电子天平
手掌大小的体积、携带方便。去皮清零显示，便于操作，0.1~200g的量程，可满足现场采样和试剂称量。
2． 微型超声波提取、溶解、清洗器
体积小巧，便于携带。一、可用于提取蔬菜中的农药残留，省时、省力、效果好。二、可加快难溶固体样品或固体试剂的溶解速度。三可使实验用器皿清洗的速度加快，清洗后的器皿清洁度高
3． 微型恒温水浴锅
可用于鼠药氟乙酰胺测定中排除氨的干扰，可提高试管反应结果的稳定性，还可将恒温水浴锅中的电热板部分用于砷、汞检测，可替代传统的酒精灯、酒精和三角架，携带更为方便。
4． 微型离心机
体积小巧，携带方便。可缩短某些样品需要提取、分离（沉淀）的操作时间，减少杂质干扰，拓宽检测食品种类的范围。
5. 手动可调式移液器 （芬兰）
100~1000 ul的量程，操作简单，使用方便，非常适合现场使用。
6．电导仪
既是鉴别真假饮用纯净水的仪器，又是确定实验用水是否可用的设备。笔式电导仪携带方便，掌式电导仪耐用。
7.样品粉碎仪
便携式，用于将样品粉碎均匀
㈡ 检测氮含量的方法！
一、材料：各种干燥、过筛（60～80目）的植物样品。
二、仪器设备：消化管；微量凯氏定氮蒸馏装；三角烧瓶；微量滴定管；量筒；容量瓶；烧杯；移液管等。
三、植物样品中氮元素含量检测实验：
1、样品提取分离：准确称取烘至恒重的样品0.1000g～0.5000g（依样品含氮量而定，含氮1～3mg宜），置10ml离心管中，加入5ml5％三氯乙酸，90℃水浴中浸提15min，不时搅拌。
取出后用少量蒸馏水冲洗玻棒，待溶液冷却后，4000rpm离心15min，上清液弃去。并用5％三氯乙酸洗沉淀2～3次，离心，弃去上清液，最后用蒸馏水将沉淀无损地洗入铺有滤纸的漏斗上，去掉滤液后，将沉淀和滤纸在50℃下烘干，用于蛋白氮的测定。
2、样品的消化：取4支消化管编号。1号管直接放入称好的材料用于测定总氮，2号管放入上述烘干的滤纸和沉淀，用于蛋白氮的测定，3号管放入同样滤纸一张、4号管不加任何样品作为空白对照，注意将样品放入消化管底部。
向各消化管加浓硫酸5ml，混合催化剂0.3g～0.5g，将样品浸泡数h或放置过夜后，在管口盖一小漏斗，放在远红外消煮炉上加热消化。开始时温度可稍低，以防止内容物上升至管口。泡沫多时，可从小漏斗加入2～3滴无水乙醇。
到管口出现白色雾状物时，泡沫已不再产生；此时可逐渐升温，使内容物达到微沸。直到消化液变为清澈透明为止。
消化过程中，若在消化管上部发现有黑色颗粒时，应小心地转动消化管，用消化液将它冲洗下来，以保证样品消化完全。消化过程约需2～3h。
3、定容消化完毕待溶液冷却后，沿管壁仔细加入10ml左右无氨蒸馏水，以冲洗管壁，再将消化液小心转入100ml容量瓶中。以无氨水少量多次冲洗消化管，洗涤液并入容量瓶。冷却后用无氨水定容至刻度，混匀备用。
4、蒸馏及滴定以下几步进行：
A、仪器的洗涤：先经一般洗涤后，还要用水蒸气洗涤。可按下列方法进行蒸气洗涤。先在蒸气发生器中加入2／3体积的蒸馏水（事先加入几滴浓硫酸，使其酸化，加入甲基红指示剂，并加入少许沸石或毛细玻璃管以防止爆沸）。
打开漏斗下的夹子，用电炉或酒精炉加热至沸腾，使水蒸气通入仪器的各个部分，以达到清洗的目的。在冷凝管下端放置一个三角瓶接收冷凝水。然后关紧漏斗下的夹子，继续用蒸气洗涤5min。
冲洗完毕，夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接橡胶管，蒸馏瓶中的废液由于减压而倒吸进入收集器，打开收集器下端的活塞排除废液。
如此清洗2～3次，再在冷凝管下端换放一个盛有硼酸－指示剂混合液的三角瓶，使冷凝管下口完全浸没在液面以下0.5cm处，蒸馏1～2min，观察三瓶内的溶液是否变色。
如不变色，表示蒸馏装置内部已洗干净。移去三角瓶，再蒸馏1～2min，用蒸馏水冲洗冷凝管下口，关闭电炉，仪器即可供测定样品使用。
B、标准硫酸铵测定为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术，并检验实验的准确性，找出系统误差，常用已知浓度的标准硫酸铵测试三次。
在三角瓶中加入20ml硼酸－指示剂混合液，将此三角瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸入溶液中。注意在加样前务必打开收集器活塞，以免三角瓶内液体倒吸。准确吸取2ml硫酸铵标准溶液，加到漏斗中。
四、结果计算：
样品中总氮量（％）＝0.010×(V3—V0)×100×14/(W×1000×10)×100×氮的回收率样品中蛋白氮含量（％）＝0.0100×(V1－V2－V0)×100×14/(W×5×1000)×100×氮的回收率。
回收率（％）＝0.0100×(V－V0)×14/(2.0×0.6×100)×100。
一、药剂空白高的问题：
造成药剂空白高主要原因是过硫酸钾纯度不够。空白高于0.030，就需要提纯过硫酸钾。提纯方法就是二次结晶过硫酸钾：
1、（可以同时做两份）在1L的大烧杯中加入约800mL水，50摄氏度的水浴锅上加热（水浴锅的温度要用温度计检测下是不是正常，以免超过60摄氏度。过硫酸钾在60摄氏度以上会分解）。
我的经验是先加入90克过硫酸钾，用一滤纸盖在上面（避免污染），溶解速度慢，可以边做别的事边提纯，有空就去搅拌几下，全部溶解之后（速度较慢）。
用勺子逐渐向烧杯中加入过硫酸钾，一次不要加太多，溶了再加，直至不管怎样搅拌，隔了近一小时多都不能溶解为止（刚好有一丁点儿不能溶解），这个过程挺漫长。
2.把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却，用一干净的塑料袋包住烧杯口，并用皮筋扎紧，再放进冰箱里（调到低温度），放置一晚上，重结晶。建议同时用一个1L的广口瓶放一瓶无氨水在冰箱里冷藏（用于冲洗用）。
3.重结晶一夜后，第二天早上拿出来立即倒掉上清液，重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底，但其实结构很松散，用钢勺什么的弄两下就离散开了，然后再清洗：用冰好的无氨水清洗几遍，尽量不要让下面的结晶流失。
4.二次结晶：清洗后的烧杯里只剩下下面的结晶，向烧杯中加入约400ML的无氨水，搅拌溶解，这次跟次结晶不同的是向烧杯中慢慢地加入无氨水，一开始可以一次稍多点水（看结晶的多少），剩下不多时要等久些，加的水也要少，直到有一丁点儿结晶不能溶解为止。
5.然后重复第2步骤（二次结晶）、第3步骤（清洗）。
6.清洗后倒掉上清液，把结晶移入一250ML的烧杯中，然后放入50摄氏度烘箱烘干即可（烘箱里的温度要用温度计检测是否正常）。烘干箱里不要放入其它物品，以免再次污染。
烘干时间较长，（我的烘了二天三夜）可以晚上放烘干箱里烘，白天放在50度水浴锅上蒸干一定。完全烘干后的药品跟原来的药品一样松散干燥，搅动会发出清脆的声音。
7．烘干后的药品从烘箱里拿出要放在干燥器里冷却一小时以上。冷却后用干净的聚乙烯瓶装好盖紧。
8.实验过程中加碱性过硫酸钾的时候一定要避免加在瓶口处。
二、总氮取水体积：
因为碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮取水样量为10ML时，测定范围为0.20mg/l7.00mg/l。总氮高于7 mg/l时要适当减少取水样量。
如果取5ML水样再稀释至10ML进行测定的话，高检出限是14 mg/l。当总氮高于14 mg/l时取水量就要再减少进行测定。我一般是取2ML水样进行测定。
出水总氮低时可以取5ML水样进行测定。吸取水样时要取静止一定时间后的上清液。
三、要用新鲜的无氨水：
整个总氮的测定过程中所用的无氨水，包括加药前稀释至10ML用的无氨水，消解后加的无氨水，以及测定吸光值时参比样用的无氨水，都必须使用同一瓶水。以免不同无氨水不同带来的误差。
四、密封事项：
比色管盖子用生料带缠好，这样密封性更好，防止氨氮跑出。
生料带对药剂没影响不会影响结果。但缠在盖子上的生料带要保持完好无损，以免碎屑掉入比色管内，影响吸光值，从而影响化验结果。比色管盖子一定要塞紧，然后用纱布和绳子扎紧。扎好后把纱布边沿往下拔，使纱布紧密包住盖子。
五、灭菌锅的温度灭菌锅的温度设定为125度，消解时间设定为1小时。
六、趁热拿出消解结束后，待灭菌锅压力降为0后，马上打开放气阀放气，放气后马上打开灭菌锅盖，立即拿出装比色管的烧杯，把总氮的比色管（压住总氮比色管的盖子）趁热多次摇匀，放回烧杯中，自然冷却。
七、加入1+1盐酸后，10分钟之后测定吸光值（只要是10分钟后就行，时间长些不要紧，但要避免污染。）。分光光度计要预热30分钟以上，测定总氮的吸光值时，要先测220波长的吸光值，全部测完了再测275波长的吸光值。
㈢ 调味料中氨基酸态氮检测具体步骤急！！！
电位甲醛滴定法【酱油卫生标准的分析方法Method for analysis of hygienic standard of soybean sauce】（第一法甲醛值法）
（一）原理
氨基酸有氨基及羧基两性基团，它们相互作用形成中性内盐，利用氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出来酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定后定量，根据酸度计指示pH值，控制终点。
R—CH—COOH——→R—C—C=O
∣ ∣ ∣
NH2 H3N—O
R—CH—COOH+HCHO——→R—CH—COOH
∣ ∣
NH2 NH—CH2OH
R—CH—COOH +NaOH=R—CH—COONa
∣ ∣
NH—CH2OH NH—CH2OH
（二）试剂
1、甲醛（36%）：应不含有聚合物。
2、氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]
（三）仪器
1、pHS—25型酸度计：包括标准缓冲溶液和KCL饱和溶液；
2、20mL移液管；3、10mL微量滴定管；4、100mL容量瓶；
5、250mL烧杯；
（四）测定方法
1、吸取5.0mL试样，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，备用。
2、吸取上述稀释液20.00mL置于200mL烧杯中，加水60mL水，插入电极，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)=0.050mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2，记录消耗氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升数，（可计算总酸含量）。
3、向上述溶液中准确加入10.0mL甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]继续滴定至pH9.2，记录加入甲醛后滴定所消耗氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升数。
4、取80mL水，先用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2，再加入10.0mL甲醛溶液，混匀,再用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]滴定至pH9.2，记录加入甲醛后滴定所消耗氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升数。
（五）结果计算
试样中氨基酸态氮的含量为：
式中：X—试样中氨基酸态氮的含量，g/100Ml；
V1—测定用试样稀释液加入甲醛后消耗标准碱液的体积，mL；
V2—测定空白试验加入甲醛后消耗标准碱液的体积，mL；
C—氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L；
0.014—与1.00 mL氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=1.000mol/L]相当的氮的质量，g；
（六）注意事项
1、加入甲醛后放置时间不宜过长，应立即滴定，以免甲醛聚合，影响测定结果。
2、由于铵离子能与甲醛作用，样品中若含有铵盐，将会使测定结果偏高。
3、计算结果保留两位有效数字。精密度:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
㈣ 枸杞米酒氨基酸态氮检验方法
氨基酸具有酸性的一COOH基和碱性的一NH2基。它们相互作用而使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液 时一NH。基与甲醛结合搜镇桥，从而使其碱性消失。这样就可以用强碱标准溶液来滴定一COOH基，并用间接的方法测定氨基酸总量。
2。试剂
①40％中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂用氢氧化钠40％甲醛中和至淡蓝色。
②0．1％百里酚酞乙醇溶液。
③0．1％中性红50％乙醇溶液。
④O．1mol·L-1氢氧化钠标准溶液，标定后使用。
3．操作步骤
移取含氨基酸约20～30 mg的样品溶液2份，分别置于250 mL锥形瓶中，各加50 mL蒸馏水，其中1份加人3滴中性红指示剂，用O．1mol·L-1氢氧化钠标准溶液滴定至由红变为琥珀色为终点；另1份加入3滴百里酚酞指示剂及中性世猛甲醛20 mL，摇匀，静置1 min，用O．1mol·L-1，氢氧化钠标准溶液滴定至淡蓝色为终点。分别记录两次所消耗的碱液体积。
4．计算
氨基酸态氮(％)= [c*( V2-V1)*0.014/m]*100
式中：c——氢氧化钠标准溶液的浓度，mol·L-1；
V1——用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，mL；
V2——用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，mL；
m一测定用样品溶液相当于样品的质量，g；
0.014——氮的毫摩尔质量，g·(mmol) -1。
5. 说明
①此法适用于测定食品中的游离氨基酸。
②固体样品应先进行粉碎，准确称样后用水萃取，然后测定萃取液；液体试样如酱油、饮料等可直接吸取试样进行测定。萃取可在50℃水浴中进行30 min。
③若样品颜色较深，可加适量活性炭脱色后再测定。
二、酸度滴定法
本法适用于以粮和豆饼、麸皮为原料发酵生产的酱和酱油的测定。
1．原理
根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性。用氢氧化钠标准溶液滴定，以酸度计定终点。 —COOH被完全中和时，pH值约为8．5～9．5。本法准确快速，可用于各类样品游离氨基酸含量测定。
2．仪器
①酸度计。
②磁力搅拌器。
③微量滴定管(10 mL)。
3．试剂
①36％甲醛溶液。
②O．05mol·L-1氢氧化钠标准溶液，标定后使用。
4．操作步骤
① 确吸取5．O mL液体样品，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。
②吸取20．0 mL上述样品稀释液于200 mL烧杯中，加水60 mL，开动磁力搅拌器，用O．05 mol·L-1NaOH标准溶液滴定至酸度计指示为pH=8．2(记下消耗氢氧化钠溶液的体积，可用于计算总酸含量)。
③加入10．O mL甲醛溶液，混匀。再用0．05 mol·L-1叫NaOH标准溶液继旅带续滴定至pH=9．2，记录消耗标准溶液的体积(V1)。
取80 mL水，在同样条件下做试剂空白试验，记录消耗标准溶液的体积(V0)。
5．计算
X= [c*( V1-V0)*0.014/5*（V/100）]*100
式中：X——样品中氨基酸态氮的质量分数，％；
V1——样品稀释液在加入甲醛后滴定至终点(pH=9．2)所消耗氢氧化钠标准溶液的体积；
V0——空白试验加入甲醛后滴定至终点所消耗氢氧化钠标准溶液的体积；
V——滴定时吸取样品稀释液体积，mL；
c——氢氧化钠标准溶液浓度，mol·L-1。
5——测定用液体样品毫升数。
6．说明
①加入甲醛后应立即滴定，不宜放置时间过长，以免甲醛聚合，影响测定结果。
②样品中若含有铵盐，由于铵离子也能与甲醛作用，将使测定结果偏高。
③对于浑浊和色深样液可不必经处理而直接测定
㈤ 我国《生活饮用水标准检验法》水中硝酸盐氮的测定方法有几种
有三种，分别是酚二磺酸分光光度法；硝酸根电极法； 紫外分光光度法 。