血浆载脂蛋白的检测的方法是

⑴ 脂蛋白代谢的生物化学检验

脂蛋白代谢的生物化学检验

脂蛋白代谢的生物化学检验知识你了解吗?你知道应该如何对脂蛋白代谢进行化学检验吗?下面是我为大家带来的脂蛋白代谢的生物化学检验的知识，欢迎阅读。

一、血浆脂质测定

(一)总胆固醇(TC)

是血液中各脂蛋白所含胆固醇之总和，分为酯化型胆固醇(CE)和游离型胆固醇(FC)， 其中CE占60%～70%， FC占30%～40%，两种类型的比例在健康个体或个体之间是恒定的。

【测定方法】目前常规应用酶法测定，快速准确。

【参考范围】 2007年《中国成人血脂异常防治指南》规定成人TC水平：

①在5.18mmol/L(200mg/dl)以下为合适范围;②在5.18～6.19mmol/L(200～239mg/dl)范围属于边缘升高;③在6.22mmol/L(240mg/dl)以上为TC升高。

【临床意义】

1、TC浓度增高，冠心病等心血管疾病发生的危险性增高。影响TC水平的因素：

①年龄与性别：新生儿TC很低，哺乳后很快接近成人水平，之后常随年龄而上升，但到70岁后不再上升甚或有所下降。中青年期女性低于男性，女性绝经后TC水平较同年龄男性高。

②饮食习惯：长期高胆固醇、高饱和脂肪酸摄入可造成TC升高。

③种族：黑人的总胆固醇水平要高于白人。

④遗传因素。

2、TC并不是越低越好，研究显示：①TC水平降低时增加心衰时的死亡率，而增高时可增加生存率;②在冠心病中，低血总胆固醇会增加死亡率;③TC水平升高可能可以防止痴呆。

(二)总脂质

主要包括FC、CE、PL和TG等。所采用的测定方法不同，正常参考值有一定的差异

【测定方法】 脂质抽提法和直接测定法

【参考范围】成人4.0～7.5g/L;儿童3.0～6.0 g/L。

【临床意义】

1、升高：高脂血症、动脉粥样硬化、糖尿病、糖原贮积病、肾小球肾炎、肾病综合征、甲状腺功能减退、高血压等。

2、降低：甲状腺功能亢进症、急性肝炎、肝硬化、恶病质、吸收不良综合征等。

二、甘油三酯(TG)

构成脂肪组织，参与TC、CE合成及血栓形成。

【测定方法】 建议酶法(如GPO-PAP法)作为临床实验室测定血清TG的'常规方法。

【参考范围】目前《中国成人血脂异常防治指南》仍沿用1997年《血脂异常防治建议》的标准规定我国成人TG水平：①在1.7mmol/L(150mg/dl)以下为合适范围;②1.7～2.25mmol/L(150～199mg/dl)为边缘升高;③2.26mmol/L(200mg/dl)以上为升高。

【临床意义】

1.生理性改变： TG受生活条件和饮食方式、年龄、性别等因素影响。如高脂肪饮食后TG升高;运动不足、肥胖可使TG升高。成年后随年龄增大TG水平上升(中青年时，男性高于女性，50随后反之)。人群中血清TG水平呈明显的正偏态分布。

2.病理性改变： 轻至中度升高者，即2.26~5.63mmol/L(200~500 mg/dl)，患冠心病的风险增加。重度升高者，即≥5.63mmol/L(500mg/dl)时，常可伴发急性胰腺炎。

3.低TG血症：是指TG≤0.56mmol/L。原发性者见于无/低 β脂蛋白血症，为遗传性疾病;继发性者见于继发性脂质代谢异常，如消化道疾病(肝病、吸收不良综合征)内分泌疾病(甲亢、慢性肾上腺皮质功能不全)、癌症晚期、恶病质及药物的应用(如肝素等)。

三、血浆脂蛋白测定

(一)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)

高密度脂蛋白是血清中颗粒最小密度最大的一组脂蛋白,被视为人体内具有抗动脉粥样硬化的脂蛋白，同时大量的流行病资料表明，血清HDL-C水平与冠心病发病成负相关,因而HDL-C被称为“好的胆固醇”。

【测定方法】直接测定法。

【参考范围】

①合适范围为>1.04mmol/L(40mg/dl)，

②1.55mmol/L(60mg/dl)以上为升高，

③1.04mmol/L(40mg/dl)以下为降低。

【临床意义】随着HDL-C水平降低，缺血性心血管病发病危险增加，HDL-C<1.04mmol/L的人群与HDL-C≥1.55mmol/L的人群相比，缺血性心血管病危险增加50%。

(二)低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)

【原理】参考方法为超速离心法。

可供选择的方法：表面活性剂清除法(SUR法)，过氧化氢酶清除法(CAT法)，杯芳烃法(CAL法)，可溶性反应法(SOL法)和保护性试剂法(PRO法)

【参考范围】

①合适范围为<3.37mmol/L(130mg/dl)，

②边缘升高(危险阈值)为3.37~4.12mmol/L(130mg/dl~159mg/dl)，

③升高为>4.14mmol/L(160mg/dl)。

NCEP ATP Ⅲ：高脂血症患者血LDL-C的治疗目标值定为2.6mmol/L(100mg/dl)以下。

【临床意义】LDL-C水平与缺血性心血管病发生相对危险及绝对危险上升趋势及程度与TC相似。

LDL-C水平增高见于家族性高胆固醇血症(TC增高，LDL-C增高，伴有HDL-C减低)，Ⅱa型高脂蛋白血症(TC增高，LDL-C增高，TG正常或轻度增高)。

(三)脂蛋白(a)，即Lp(a)

【测定方法】 免疫浊度法和ELISA

【参考范围】 健康成人血清Lp(a)<300mg/L。

【临床意义】

1、生理性改变：一般认为Lp(a)对同一个体相当恒定，但个体间差异很大，波动范围在0～1.0mg/L。Lp(a)水平高低主要有遗传因素决定，基本不受性别、年龄、饮食、营养和环境影响;

2、病理性增高：缺血性心脑血管疾病 、心肌梗死、外科手术 、急性创伤、急性炎症 、糖尿病肾病等

3、病理性减低：肝脏疾病(慢性肝炎除外)

(四)血清载脂蛋白AⅠ和B100

【参考范围】

ApoAⅠ：1.00 g/L～1.50g/L。ApoB100：0.50 g/L～1.10g/L。

ApoAⅠ/ApoB100：1.0~2.0。

【临床意义】

1、血清ApoAⅠ主要存在于HDL中，一般情况下，它可反映HDL的水平，与HDL-C呈明显正相关，其临床意义与HDL-C基本相同。

2、ApoB100主要存在于LDL中，其含量主要代表LDL水平，与LDL-C成显着正相关，其临床意义与LDL-C基本相同。

3、临床上常将Apo AⅠ/Apo B100﹤1.0作为冠心病的危险指标。

此外，研究发现：

1、TC/HDL-C比值比非HDL-C更能预示冠心病的危险。

2、TG/HDL-C比值有效测量血脂异常、高血压和代谢综合征

3、TC/HDL-C、TG / HDL-C、Apo B / Apo A-I、LDL-C/HDL-C比值可能比单项血脂检测更具临床意义，而Apo B/Apo A-I可能是其中最具说服力的指标。

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⑵ 血脂检查的测定方法

医院中开展的血脂检查，主要是对血液（血浆）中所含脂类进行的一种定量测定方法。常用的检查项目一般包括以下几类：①总胆固醇（Tch或TC）和胆固醇酯（chE）测定 。
②三酰甘油（TG）测定。
③脂蛋白组分和亚组分测定。又可再分为高密度脂蛋白（HDL，亦称为高密度胆固醇，HDL-C），低密度脂蛋白（LDL，亦称为低密度胆固醇，LDL-C）和极低密度脂蛋白 (VLDL，亦称为极低密度胆固醇，VLD-C）三类。
④磷脂（PL），主要是磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和神经磷脂等测定。
⑤非脂化脂肪酸（又称游离脂肪酸，FFA）测定。
⑥微量的类固醇激素和脂溶性维生素测定。
⑦载脂蛋白测定。

⑶ 血脂各指标测定方法有哪些

在生化检查的时候，经常会查血脂四项，就是甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇。
一般甘油三酯的正常范围是小于1.7mmol/L，如果超过2.3mmol/L，就可能会带来身体的损害。高密度脂蛋白胆固醇是一个好的胆固醇，能够从外周把血管内皮上的胆固醇运回肝脏，所以称它为能清除外周胆固醇的胆固醇水平，所以它的水平增高，心血管疾病的风险是降低的，正常值一般是要在1.0mmol/L以上。
低密度脂蛋白胆固醇是肝脏合成的脂蛋白所携带的胆固醇，它把胆固醇运送到周围组织来供给它们使用，低密度脂蛋白胆固醇水平增高，心脑血管疾病的风险就会增加，所以低密度脂蛋白胆固醇有不同的正常范围。如果这个人没有心脑血管疾病的风险，一般认为低密度脂蛋白胆固醇的水平只要小于3.4mmol/L就是可以的。
但是如果本身是糖尿病、高血压，或者已经出现了颈动脉斑块形成，这部分患者的正常范围就可能是在2.6mmol/L以下了，需要在1.8~2.6mmol/L。如果更严重的一些患者，已经出现了血管病变，比如冠心病、下肢血管闭塞，或者颈动脉狭窄70%以上，这部分人群的正常范围就应当是在1.8mmol/L以下。因此不同人群有一个不同的正常范围，或者有不同的适宜范围，可能更合理一些。

⑷ 载脂蛋白E的检测方法

等电聚焦（IEF）
由于三种主要ApoE异构体E2、E3和E4的等电点（pⅠ）分别为5.89、6.02和6.68，E4比E3多一个正电荷，而E2比E3少一个正电荷。因此，可应用1EF检测这些异构体间电荷差异而确定不同ApoE表型。传统ApoE表型检测方法多采用超速离心法或化学沉淀法分离VLDL，脱脂后进行IEF，然后进行染色分析。这种方法需要血清量较多，昂贵、费时，又需要大型设备，不适合大规模研究。ApoE异构体之间染色程度之间差异及电泳过程中泳动距离的变异性也造成结果的不稳定性。 免疫印迹法（immunoblotting）
血清脱脂后，经IEF电泳将ApoE与其他蛋白质分离，然后将凝胶中蛋白质转移到硝酸纤维素（NC）膜上，用抗ApoE抗体作为一抗进行免疫印迹反应或采用直接的免疫固定法，即可灵敏而特异地显示出ApoE区带的位置，从而确定ApoE表型。此方法利用抗原-抗体的特异反应，排除了血清其他蛋白质的干扰，不需超速离心分离VLDL，血清用量少，是国内外实验室检测ApoE表型常用的方法之一。但此类方法亦存在一些缺点，如对于存在与普遍异构体具有相同电荷的罕见异构体标本，或在糖尿病等病理状态时，由于转录后修饰引起蛋白质变化的标本检测时，就会给出错误的结果。 双相电泳（two-dimensional electrophoresis）
第一相应用IEF电泳将等电点不同的蛋白质分离；第二相根据蛋白质分子量不同及浓度的差异，应用SDS-PAGE进行分离，由此确定ApoE表型。此技术能解决IEF遇到的一些转录后修饰的问题，临床标本用量也很少，并且可以同时进行定性和定量分析，但由于成本昂贵而且费时，有时也难以清晰地分辨表型，故临床上应用较少。