Ⅰ 怎样测定蔬菜中的维生素C
1.滴定法测定维生素C
1.1测定原理
2,6一二氯靛酚法和碘量法是较常见的滴定测定维生素C的方法。还原型抗坏血酸还原染料2,6一二氯靛酚,该染料在酸性中呈红色,被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2,6一二氯靛酚后,本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时,一定量的样品提取液还原标准2, 6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
碘量法的原理:维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种,当用碘滴定维生素C时,所滴定的碘被维生素C还原为碘离子,随着滴定过程中维生素C全被氧化,所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂(淀粉)的溶液产生蓝色,即为滴定终点。
1.2测定操作
2,6一二氯靛酚法:取适量的样品可食部,加入100 mL 2%草酸溶液,制成匀浆。取同一样品匀浆10g,加入1%草酸溶液20 mL,摇匀,用滤纸过滤,取5mL过滤液于锥形瓶中,用2,6一二氯靛酚钠盐溶液滴定(1 mL≈0.02 mgVitC),以淡红色存在30 s内不褪色为滴定终点。记录2,6-二氯酚靛酚钠盐溶液的消耗量,根据结果计算出样品中维生素C含量(mg/100 g)。
碘量法:将果蔬洗净,用纱布拭干其外部所附着的水分,若样品清洁可以不必洗。样品可以先纵切为4~8等份,分别称取20g可是用食部分,置于研钵中加入2% Hcl 15~10ml,研磨至浆状,移于 100ml 容量瓶中,用2% HCl 加至刻度线处,混匀,过滤,记录滤液总体积。样品液的测定: 在50ml 烧杯中,用移液管注入10% KI 溶液0.5ml,0.5% 的淀粉溶液 2ml,样品液 5ml,蒸馏水 2.5ml,用0.001N KIO3 液滴定,要一滴滴加入,并时时摇动烧杯,至微蓝色不褪色为终点( 一分钟不褪为止) 。记录所用 KIO3 液毫升数,计算维生素C含量。
1.3测定方法评价
2,6-二氯酚靛酚滴定法具有简便、快速、比较准确等优点,适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量,易受其他还原物质的干扰,如果样品中含有色素类物质,将给滴定终点的观察造成困难。碘酸钾滴定法较便宜,使用碘酸钾滴定法测定蔬菜中维生素C含量较为简便易行,而2,6一二氯靛酚法相对复杂。总的来说,滴定法操作简便、快速,无须特殊仪器,但在测定深色样品时,准确度和精确度欠佳。
2.荧光法测定维生素C
2.1测定原理
Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的荧光分析法(OPDA),并被指定为维生素C的经典荧光分析法。在该方法中,维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA),DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物,通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析。孙振艳等[1]提出了一种新的测定维生素C的荧光分析方法。基于维生素C被Cu2+氧化为DHAA,DHAA进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用,通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。
2.2测定操作
荧光分析法(OPDA)的测定方法:称取一定量样品,研磨后用水浸泡,取清液加入适量1%草酸溶液,振摇约3min,加入0.2g已处理好的活性炭再充分振摇约3min后过滤,滤液加于两个25mL比色管再加入5.0mL缓冲溶液,,其中一管加入2.0mL硼酸溶液(即空白)摇匀,放置15min后,两管均加入邻苯二胺溶液10mL,避光放置30min待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。
孙振艳等的荧光分析法:在25 mL比色管中依次加入0. 6 mL CuSO4溶液,2. 0 mL十六烷基三甲基溴化铵溶液,2. 0 mL苯甲酸溶液,一定体积的维生素C标准溶液,,5. 0 mLNaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液,用蒸馏水定容,摇匀。在35℃恒温水浴中加热30 min,将溶液流水冷却至室温,激发波长为308 nm,在发射波长408nm处,测量荧光强度F,以不含维生素C的试剂空白为F0,计算ΔF=F-F。
2.3测定方法评价
荧光分析法测定维生素C具有操作简单,精密度高,检出限低等优点,该法可以应用于水果、蔬菜和药物中维生素C的检测,适于推广。
3.光度分析法测定维生素C
3. 1测定原理
2,4-二硝基苯肼法和钼蓝比色法是常见测定维生素C的一种光度分析法。2,4-二硝基苯肼法的原理是总维生素C包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸,样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸,再与2,4-二硝基苯肼作用生成红色脎,脎的含量与总抗坏血酸含量成正比,进行比色测定。钼蓝比色法是测定果蔬中还原型维生素C含量的一种常用方法,因偏磷酸和钼酸铵反应生成的磷钼酸铵经还原型的维生素C还原后生成亮蓝色的络合物,通过分光比色可以测定样品中还原型维生素C的含量。
3.2测定操作
2,4-二硝基苯肼法:取适量的样品可食部,加入100 mL 2%草酸溶液,制成匀浆。取匀浆20 g (含1~2 mg抗坏血酸)置入100 mL容量瓶中,用1%草酸溶液定容,混匀后过滤。取25 mL过滤液放入有2 g活性炭的25 mL比色管中,振摇1 min,过滤。然后取10 mL此氧化提取液,加入10 mL 2%硫脲溶液,混匀。按照GB12392-90中呈色反应方法,用分光光度计进行比色,根据结果计算出样品中抗坏血酸含量。按下式计算样品中Vc的含量:X=c·Vm×F×1001000。
X—样品中总抗坏血酸含量,mg/100g;
c—由标准曲线查得或回归方程算得“样品氧化液”总抗坏血酸的浓度,μg/mL; V—试样用1%草酸溶液定容的体积,mL; F—样品氧化处理过程中稀释倍数; m—试样质量,g。
钼蓝比色法:准确称取 100 g 样品, 加入草酸-EDTA 溶液, 经捣碎后移入 100 mL 容量瓶,定容,过滤,吸取 2 mL 上清液于 50 mL 容量瓶中,加入 1 mL 的偏磷酸-醋酸溶液,5%的硫酸 2.0 mL,摇匀,加入 4 mL 钼酸铵,以去离子水定容至 50 mL,20 min 后测定吸光度。
3.3测定方法评价
钼蓝比色法测定果蔬中还原型维生素C含量数据稳定性、准确性较好,是一种快速、准确、灵敏度高的测定方法,而且不受样液颜色的影响。2,4-二硝基苯肼比色法测定总VitC (还原型和氧化型),特异性较好,但操作复杂,是我国食品中VitC测定的标准方法,此方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。
4.高效液相色谱法
4.1测定原理
高效液相色谱法是近年来发展起来的一种测定维生素 C 含量的方法,测定维生素 C 含量通常采用 C18柱或 C8柱,由于维生素 C 对紫外光有吸收,故检测器常用紫外检测器。
4.2测定操作
称取维生素C标准样品0.1000 g.转移至100 ml容量瓶中,用双蒸水定容,得到1.0mg·ml-1的维生素C标准溶液。参考Nisperos-Carriedo等的方法。准确称取果肉1.00 g,用5 ml 0.2%偏磷酸冰浴研磨, 10000 g离心15 min,残渣加入4 ml 0.2%偏磷酸再提取,合并上清液,定容至10 ml,经0.45μm滤膜过滤后待测。每个样品重复5次。维生素C在240 nm波长时有最大吸收峰,故以240 nm作为检测波长。以0.2%偏磷酸为流动相。分别吸取标准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8m,l各自定容至10 m,l从中分别吸取10.0μl进样分析,以峰面积(mv)为纵坐标,标样浓度(mg·ml-1)为横坐标,绘制标准溶液曲线,计算线性回归方程的回归系数和截距。将样品溶液分别进样10.0μl进行液相色谱分析,测定维生素C的色谱峰面积,代入标准曲线计算出维生素C含量。
4.3测定方法评价
高效液相色谱法具有高效、快速、稳定、结构准确、操作简便等特点。该法分离时间短,对结构不稳定的维生素C尤为适合,还特别适用于颜色较深的提取液样品的测定,成为近年来较受欢迎的维生素C测定方法。缺点是所用仪器较为昂贵。
Ⅱ 测定维生素c的含量的方法还有哪些
雨滴计算通过网络搜索的
维生素C不同的测定方法
目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.
Ⅲ 测定维生素C注射液的含量还有哪些方法
维生素C注射液—维生素C测定—中和滴定法
应用范围:
本方法采用滴定法测定维生素C注射液中维生素C的含量。
本方法适用于维生素C注射液。
方法原理:
供试品加新沸过的冷水与稀醋酸使溶解,加淀粉指示液,立即用碘滴定液(0.05mol/L)滴定,至溶液显蓝色并在30秒内不褪,读出碘滴定液使用量,计算维生素C的含量。
Ⅳ 维生素c含量的直接碘量法测定,维生素c含量怎么计算
一、测量试剂
1、I2溶液(0.05mol/L):3.3g I2和5g KI,置于研钵中加少量水,在通风橱中研磨。待I2全部溶解后,将溶液转入棕色试剂瓶,加水稀释至250L,摇匀,放置暗处保存。
2、Na2S2O3标准溶液(0.01mol/L),淀粉溶液(5%)。
3、HAc(1+1) 固体Vc样品(维生素片剂) 重铬酸钾(A.R)。
二、测量步骤:
1、I2的标定 用移液管移取25.00 ml Na2S2O3标准溶液于250ml锥形瓶中,加50ml蒸馏水,5ml 0.5%淀粉溶液,然后用I2溶液滴定至溶液呈浅蓝色,30s内不褪色即为终点。平行三次,计算I2溶液的浓度。
2、维生素C的测定 准确称取约0.2g研成粉末的维生素C药片,置于250ml锥形瓶中,加入100ml新煮沸过并冷却的蒸馏水,立即用I2标准溶液滴定至出现稳定的浅蓝色,30s 内不褪色即为终点,记下I2溶液体积。平行三次,计算式样中维生素C的百分量。
(4)维生素c含量检测方法扩展阅读:
维生素C又称抗坏血酸Vc,分子式C6H8O6。Vc具有还原性,可被I2定量氧化,因而可用I2标准溶液直接测定。其滴定反应式:C6H8O6+I2= C6H6O6+2HI
用直接碘量法可测定药片,注射液,饮料,蔬菜,水果等的V含量。
I2微溶于水而易溶于KI溶液,但在稀的KI溶液中溶解得很慢,所以配制I2溶液时不能过早加水稀释,应先将I2和KI混合,用少量水充分研磨,溶解完全后再加水稀释。
I与KI间存在如下平衡:I2+I- =I3-
游离I2容易挥发损失,这是影响碘溶液稳定性的原因之一。因此溶液中应维持适当过量的I-离子 ,以减少I2的挥发。空气能氧化I-离子,引起I2浓度增加:4 I-+O2+4H+ =2I2+2H2O
此氧化作用缓慢,但能为光,热,及酸的作用而加速,因此I2溶液应处于棕色瓶中置冷暗处保存。I2能缓慢腐蚀橡胶和其他有机物,所以I应避免与这类物质接触。
I2 溶液的标定用Na2S2O3标定。而Na2S2O3一般含有少量杂质,在PH=9-10间稳定,所以在Na2S2O3溶液中加入少量的Na2CO3,Na2S2O3见光易分解可用棕色瓶储于暗处,经8-14天,用K2C2O7做基准物间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度。其过程为:K2C2O7与KI先反应析出I2:析出的I2再用标准的Na2S2O3溶液滴定:从而求得Na2S2O3的浓度。这个标定Na2S2O3的方法为间接碘量法。
1、碘量法的基本反应式:
2S2O32-+I2=S4O62-+2I-
2、标定Na2S2O3溶液时有:
6I-+Cr2O72-+14H+=2Cr3++3I2+7H2O 2S2O32-+I2=S4O62-+2I-
3、Na2S2O3标定时有:
n(K2C2O7): 6n(Na2S2O3)=1:6
由于Vc的还原性很强,较容易被溶液和空气中的氧氧化,在碱性介质中这种氧化作用更强,因此滴定宜在酸性介质中进行,以减少副反应的发生。考虑到I2在强酸性中也易被氧化,故一般选在PH为3-4的弱酸性溶液中进行滴定。
参考资料来源:网络--碘量法
Ⅳ 维生素C的含量测定方法为( )。
【答案】B
【答案解析】本组题考查要点是"药物的含量测定方法"。铈量法可直接测定某些金属的低价化合物及有机还原性物质。同时铈量法还不易受制剂中淀粉、糖类的干扰,因此特别适合片剂、糖浆剂等制剂的测定。《中国药典》收载的硫酸亚铁片、葡萄糖酸亚铁及其制剂、富马酸亚铁及其制剂、硝苯地平等药物都是采用铈量法测定。《中国药典》采用酸碱滴定法测定阿司匹林含量;维生素C具有还原性,《中国药典》采用碘量法测定维生素C的含量。
Ⅵ 水果中维生素c含量的测定方法有几种
水果中维生素c含量的测定方法有三种,分别为原子吸收分光光度法、紫外可见分光光度法、高效液相色谱法。
1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法问接测定维生素C的含量,是利用维生素C可以与一些金属离子发生氧化还原反应,通过测定反应掉的金属离子的量,进而间接计算出维生素c的含量。
2、紫外-可见分光光度法
利用紫外-可见分光光度法测定维生素C的含量是基于维生素c在紫外光区有特征吸收,但是因为维生素C结构中具有不饱和键,具有还原性,不易稳定存在,直接测定误差较大。所以在利用紫外分光光度法测定时,维生素标准溶液和待测样的配制条件非常重要。
3、高效液相色谱法
高效液相色谱法是以液体为流动相,采用高压输液系统,将维生素C的溶剂装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而测量出维生素c的含量。
(6)维生素c含量检测方法扩展阅读
维生素c含量的测定方法对比:
由于维生素C自身的不稳定,导致了很多方法测定结果误差较大,所以对维生素C稳定存在条件的探索非常重要。高效液相色谱法因为测定较准确、灵敏度高、选择性好,有较好的发展前景,是目前发展较快的一种方法。
Ⅶ 怎么测定蔬菜或水果中维他命C的含量
1、证明蔬菜(水果)中维生素c的存在
2、比较不同蔬菜(水果)中维生素c含量的多少
【实验原理】
本实验利用维生素c的还原性,使其与氧化性的i2反应:
淀粉溶液遇到碘会变成蓝紫色,这是淀粉的特性。维生素c能与蓝紫色溶液中的碘发生作用,使溶液变成无色。通过这个原理,可以用来检验一些蔬菜中的维生素c。通过消耗i2的量可以计算维生素c的含量。
【仪器药品】酸式滴定管,锥形瓶,研钵,碘水,淀粉试液
【实验步骤】
1、取新鲜蔬菜或水果100克,切碎,磨成糊状,挤出汁液。
2、取汁液10
ml,加淀粉溶液数滴。
3、用常温下i2的饱和水溶液进行滴定,至溶液显蓝色。根据不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判断维生素c含量的多少。
【实验讨论】
1、方法选择:
此方法简单,操作易行,现象明显,适合作为中学实验。
此实验有两种操作方法:①用碘水滴定蔬菜或水果汁液,②用蔬菜或水果汁液滴定碘水。对于汁液较少的蔬菜或水果,选择方法①较合适;对于方法②终点较易判断,但需要较多的汁液。
2、维生素c的提取:
对于汁液较少的蔬菜或水果,需要使用提取液,可选用的提取液如下:
①2%草酸②...使溶液变成无色;对于方法②终点较易判断:ph值对此反应有影响、证明蔬菜(水果)中维生素c的存在
2、维生素c的提取,需要脱色可选的脱色剂如下①30%znac溶液和15%k4fe(cn)6②活性炭③白陶土
4,可以用来检验一些蔬菜中的维生素c,加淀粉溶液数滴,锥形瓶,可选用的提取液如下、取新鲜蔬菜或水果100克。
2。根据不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判断维生素c含量的多少:
此方法简单,挤出汁液:为了避免其他物质的干扰,研钵:
对于汁液较少的蔬菜或水果,操作易行。通过消耗i2的量可以计算维生素c的含量,需要使用提取液、比较不同蔬菜(水果)中维生素c含量的多少
【实验原理】
本实验利用维生素c的还原性,切碎,碘水。
3。通过这个原理,选择方法①较合适,但需要较多的汁液。对于汁液较少的蔬菜或水果、用常温下i2的饱和水溶液进行滴定,使其与氧化性的i2反应:
有些蔬菜或水果汁液颜色较深,对滴定终点的判断有影响。
此实验有两种操作方法。
2、其它问题、脱色剂。
【实验讨论】
1、取汁液10
ml:
淀粉溶液遇到碘会变成蓝紫色、方法选择,磨成糊状,淀粉试液
【实验步骤】
1:
①2%草酸②偏磷酸-醋酸溶液
3,适合作为中学实验,这是淀粉的特性。
5,整个过程不要超过2分钟。维生素c能与蓝紫色溶液中的碘发生作用,②用蔬菜或水果汁液滴定碘水,至溶液显蓝色。
【仪器药品】酸式滴定管,滴定要迅速,现象明显:①用碘水滴定蔬菜或水果汁液、滴定速度
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