‘壹’ 梅毒血清学检查的方法有两种,有什么不同
引言:梅毒血清学检查一般分为特异性抗体检查以及非特异性抗体检查。特异性抗体检查一般是应用TPHA及TPPA两种方式,非特异性抗体检查一般是应用RPR及TRUST试验两种方式。两种方式有什么不同,我们来了解一下吧。
梅毒是梅毒螺旋杆菌感染,会引起的一个性传播疾病,大多数人没有症状。一期梅毒三周以后自愈,二期梅毒也会自愈,会出现三期梅毒,后果十分严重。梅毒要及早治疗,然后需要洁身自好。梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病。主要通过性途径传播,临床上可表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天性梅毒。一期梅毒主要表现生殖器附近单发或散发数个浅溃疡,或腹股沟淋巴结肿大,但相当一部分患者没有任何症状而直接进入下一期。二期梅毒的皮疹是个万能的模仿者,它可以与任何一种皮肤病相似,诊断需专科大夫的经验,当然此时仍有相当一部分人没有任何症状。三期梅毒未经治疗的梅毒病人会发生活动性晚期梅毒,除皮肤黏膜表现外,会侵犯关节、骨骼、眼、心血管、神经系统等任何一个脏器,严重危害患者健康。
‘贰’ 什么是梅毒螺旋体特异抗体检测
tpha法检测梅毒螺旋体抗体
一、概述:
梅毒螺旋体存在于病人的血液或脑脊液内,在特殊厌氧环境里可体外人工培养。当病人感染梅毒螺旋体后3-4周,可在血液中检出针对梅毒螺旋体特异性抗体,并在治疗后相当长时间内仍然可检出。在病人血清中可检出二种抗体,一种是针对非螺旋体抗原的抗体(即针对牛心肌磷脂的抗体,如rpr及国内一些eia和金标法均是检测此非特异性抗体),这种抗体在疾病活动期可检出,但在治疗后或疾病转入慢性期后会很快下降,而另一种是针对螺旋体抗原的特异性抗体,治疗后仍可在相当长的时间内检出,在疾病的慢性期也保持高滴度反应。omega tpha 试验是一种检测针对螺旋体抗原的抗体的特异的、灵敏的被动的血凝试验。omega tpha 试剂盒的质量标准已经中国药品生物制品检定所核定。
二、试验原理:
试验血球为用梅毒螺旋体特异性抗原包被经过醛化和鞣化的鸡红细胞,对照血球为没用上述抗原包被的经过醛化和鞣化的鸡红细胞,如果是阳性标本,当和致敏的鸡红细胞混合后,抗体和抗原的结合会引起致敏血球的凝集,在血凝板底部形成凝集块,如为阴性标本,则血细胞在孔底形成致密的沉淀。
三、试剂盒组成: 试验细胞悬液 8.5ml 阳性对照血清 2 ml 稀释液 2 0ml
对照细胞悬液 8.5ml 阴性对照血清 2 ml 细胞滴管 2 支
以上所有试剂均为工作浓度。试剂盒中的阴阳对照血清已经1:20稀释,可直接实验不必再稀释。阳性对照的效价为1:2560左右。
细胞滴管的滴量为每滴75ul,其中红色滴管用于致敏血细胞,白色滴管用于对照血细胞。
待检标本:应用血清标本,脑脊液标本。血清标本可贮于-20℃保存,但保存不应超过4至6星期。标本不应有溶血或含有脂肪。标本要防止混入唾液,否则会影响结果的正确性。
四、操作方法:
1.在反应板的第一排:每孔加25u(1滴)稀释液
在反应板的第二排:每孔加100ul(4滴)稀释液
在反应板的第三排和第四排:每孔加25ul(1滴)稀释液
2.取标本25ul,加在第一排的孔中。
3.对样品进行以下稀释:用25 ul移液器将加样后的第一排孔中的液体混匀后取出25 ul加入第二排的孔中,混匀后再取25 ul加入第三排的孔中,混匀后,从第三排孔中吸出25 ul丢弃,另从第二排孔中取25 ul加入第四排孔中,混匀后,再从第四排孔中吸25ul丢弃。
4.在第四排孔中加75 ul(1滴)试验细胞悬液,在第三排孔中加75 ul(1滴)对照细胞悬液。轻轻摇晃反应板后加盖静置45-60分钟后判读结果。
五、结果判断:
1.目测:凡出现细胞凝集为阳性反应,不出现凝集者阴性反应。
-/不凝集:细胞沉积在板孔中央呈边缘光滑的纽扣状;
±/可凝:细胞沉积在板孔中央呈边缘光滑的环状;
/凝集:细胞形成多边形成或不规则环状沉积。
2 -4 /强凝集:细胞形成边缘粗糙不规则形状或薄膜状覆盖到板孔底。
2.加入对照血细胞的反应孔不应出现凝集,如果出现凝集,说明存在抗血细胞抗体,应重复试验。重复试验时,应经1000rpm离心5分种,取上清液用稀释液按1:5稀释,再进行试验,如果加入试验细胞悬液仍出现凝集,可判为阳性结果。
3.仪器测定:可应用奥林帕斯的pk7200或改进后的雷勃mk3酶标仪。
六、储存4-8℃ ,切勿冷冻。注意运输和储存过程中切勿将试剂盒倒置
‘叁’ 梅毒抗体的检测方法
--国产艾康
采用胶体金免疫检潮技术和层析原理定性检测血渍l浆)样本中的梅毒螺旋体抗体。检测时样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原结合形成抗原抗体复合物?由于层析作用复台物沿纸条向前移动经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au—TP Ag—TP Ab—TP Ag”夹心物而凝聚显色。游离的胶体金标记梅毒抗原则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。 —进口爱卫
胶体金法(免疫层析法)人类免疫缺陷病毒(HⅣ 1/2)抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术建立的灵敏、特异、操作简便的一步法HⅣ 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HⅣ 1型和HⅣ 2型的特异性抗体,以辅助诊断HⅣ感染,其阳性结果需用免疫印迹法确认。唾液检测试纸全球认可度比较高的是美国克利普特公司的aware爱卫品牌。
‘肆’ 梅毒血清学检查的方法有两种,有哪些不同
梅毒血清学检查的方法有两种,有很多不同。疾病来源检测,梅毒螺旋体暗视野检查。通常用于一期梅毒伴硬下疳或二期梅毒伴尖锐湿疣检查皮疹渗出物。抗体检测,即梅毒血清检测。梅毒血清试验分为非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋体抗原血清试验。
螺旋体试验,如螺旋荧光抗体的摄取试验和梅毒颗粒的凝集试应试验和梅毒颗粒凝集试验在中国普遍使用。梅毒血清试验一般可分为特异性抗体试验和非特异性抗体试验。特异性抗体检测主要包括评岁纯郑估身体是否感染梅毒,这无法通过定性和定量检测用于筛选和评价疗效,但缺乏特异性。诊断需要进一步的螺旋体测试来确定他是否感染了梅毒。非特异性抗体检测主要是观察血液中梅毒滴度。可以确定患者以前和现在是否感染梅毒。
螺旋体试验的抗体滴定仪与患者的症状和体征可能无症状且潜伏多年。梅毒是唯一的传染源。它可以通过直接接触传播,如性交,感染的母亲也可以通过胎盘传播给胎儿。目前裤碰,梅毒检测的主要方法是病原学和血清学检测。血液和性别之间的主要发现是检测梅毒螺旋清学检测是检测血液或组织液中的梅毒抗体。根据这一不用于评估疗效的标准,对于大多数患者来说,无论他们是否接受治疗或疾病是否活跃,一旦螺旋体试验呈们将终生呈阳性。
‘伍’ 梅毒的检查方式是什么
1、显微镜检测: 通常使用暗视野显微镜,在显微镜下观察梅毒螺旋体,是一种病原体检测法,同样适合一期、二期梅毒患者。 2、梅毒血清学检测: 梅毒血清学检查对于诊断二期、三期梅毒,以及判定梅毒的发展和痊愈,判断药物的疗效都有十分重要的意义。 3、暗视野显微镜检: 暗视野显微镜检查是一种检查梅毒螺旋体的方法,它便于检查苍白螺旋体,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。 4、梅毒螺旋体IgM抗体检测: IgM抗体是一种免疫球蛋白,用它来诊断梅毒具有敏感性高,能早期诊断,能判定胎儿是否感染梅毒螺旋体等优点。 5、脑脊液检查: 晚期梅毒患者,当出现神经症状,经过驱梅治疗无效,应作脑脊液检查。这一检查对神经梅毒的诊断、治疗及预后的判断均有帮助。 6、分子生物学梅毒检查:
‘陆’ 2021天津医疗卫生检验学:梅毒检测方法
梅毒是由苍白(梅毒)螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病。主要通过性途径传播,临床上可表现为 一期梅毒 、 二期梅毒 、 三期梅毒 、 潜伏梅毒 和先天梅毒(胎传梅毒)等。梅毒在考试中的常考难点为梅毒的检测方法,目前,在医学上梅毒常用的检测方法主要分为两类,一类是病原学检测;另一类是血清学检测。
一、病原学检测法:以直接观察病原体为目的的检测,目前在临床上应用的较少,能够开展的医院也不多。病原学检测包括:①暗视野显微镜检查。②镀银染色检查。
二、血清学检测则又包括两大类:
(一)以非梅毒螺旋体抗原的血清试验:
①VDRL(性病研究实验室试验)。
②USR(不加热血清反应素试验)。
③RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)。
④TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)。
目前RPR和TRUST是我国主要采取的两种非梅毒螺旋体抗原血清检测方法。
(二)以梅毒螺旋体抗原的血清试验:
①FTA-ABS(密螺旋体荧光抗体吸收)
②TPPA/TPHA(梅毒密螺旋体凝集试验)
③TP-ELISA(酶联免疫吸附试验)
④CIA(发光法)
⑤GICA(胶体金免疫层析法)
⑥WB(蛋白印迹试验)
⑦PCR聚合酶链反应
⑧梅毒螺旋体IgM抗体检测
通过检查血液中的抗体来判断是否感染的检测,是目前在临床上广泛被采用的检验梅毒的手段。
(三)目前临床上检测梅毒较常用的检测方法有及其优缺点:
1.化学发光法ELISA:其敏感度及特异性较高,在操作中可以同一时间进行多份抗体检验,该方法较简单,常用来进行大批量的筛查。
缺点:结果阳性不能区分既往感染和现症感染。
2.TRUSTRPR:该方法操作简便、迅速,适用于大量标本检测。用于临床初筛试验、梅毒的病程和疗效观察。
缺点:TRUST在硬下疳出现后4周才能检出,对一期梅毒检出率较低,适合诊断二期梅毒。还易出现生物学假阳性反应;肉眼观察结果,判断主观。
3.TPPA:敏感性和特异性均较高,能够作为非梅毒螺旋体抗原血清学试验初筛阳性标本的确证试验。
缺点:手工操作,步骤繁琐,对操作人员要求较高。结果依赖肉眼判断且不宜保存,不适用于大批量筛查实验。
以上通过将梅毒检测方法分为两个方向,总结了在临床检测中的常用方法,考生可根据具体问题具体分析。
‘柒’ 梅毒用什么方法检测
一般初筛是检查RPR或TRUST,确证是检查TPPA或TPHA。最好这两种实验都查一下,双阴可以排除梅毒,双阳性可以诊断为梅毒,其他TPPA阴性,TRUST阳性是假阳性;TPPA阳性,TRUST阴性是既往感染过梅毒或TPPA假阳性。