脂肪的检测方法

‘壹’ 脂肪检测的原理是什么实验操作流程

脂肪检测方法可用索式提取法：

一、索式提取法（经典方法）

1、原理：

样品经前处理后，放入圆筒滤纸内，将滤纸筒置于索式提取管中，利用乙醚或石油醚在水浴中加热回流，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（粗脂肪）
采用这种方法测出游离态脂，此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。

2、 适用范围与特点

索氏提取法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不宜吸湿结块的样品的测定。此法只能测定游离态脂肪，而结合态脂肪无法测出，要想测出结合态脂肪需在一定条件下水解后变成为游离态的脂肪方能测出。

另外此法是经典方法，对大多数样品结果比较可靠，但需要周期长，溶剂量大。

二、实验操作流程

1、滤纸筒的制备

将滤纸剪成长方形8×375px ，卷成圆筒，直径为150px，将圆筒底部封好，最好放一些脱脂棉，避免向外漏样。

2、称取样品，将样品烘干磨细，称取一定量与纸筒封好上口，最好用测定水的样品。

3、索式抽提器的准备

索氏抽提器由三部分组成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重。其它要干燥。

4、抽提

将装好样的纸筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量从提取管加入，加入的量为提取瓶体积的2/3 接上冷凝装置，在恒温水浴中抽提，水浴温度大约为55℃左右，可用滤纸检验，理论值抽提6-8小时，实际值3-4小时，但也根据样品性质来决定。
5、回收乙醚

当乙醚在提取管内即将虹吸时立即取下提取管，将其下口放到乙醚回收瓶内，使之倾斜，然后将提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。

6、计算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和样品重（g）W1——瓶子重量（g） W——样品重量（g）

或：脂肪%=（抽提后滤纸与样品重量—抽提前滤纸重量）/样品重量 × 100

滤纸筒应事先放入烧杯与100-105℃烘箱烘至恒重。

(1)脂肪的检测方法扩展阅读：

索式提取法注意事项

（1）样品应干燥后研细，装样品的滤纸筒一定要紧密，不能往外漏样品，否则重做。

（2）放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管，否则乙醚不易穿透样品，使脂肪不能全部提出，造成误差。

（3） 碰到含多糖及糊精的样品要先以冷水处理，等其干燥后连同滤纸一起放入提取器内。

（4） 提取时水浴温度不能过高，一般使乙醚刚开始沸腾即可（约45℃左右），回流速度以8-12次/时为宜。

（5） 所用乙醚必需是无水乙醚，如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出，造成误差。

（6） 若用干样品测定脂肪，可按下式计算原来样品脂肪的含量

脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W

A— 100克样品中水分的含量（g）

(7) 冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样不仅可以防止空气中水分进入，而且还可以避免乙醚挥发在空气中。这样可防止实验室微小环境空气的污染，如无此装置，塞一团干脱脂棉球亦可。

（8）如果没有无水乙醚可以自己制备，制备方法如下：在100ml乙醚中，加入无水石膏50克，振摇数次，静止10小时以上，蒸馏，收集35℃以下的蒸馏液，即可应用。

（9）将提取瓶放在烘箱内干燥时，瓶口向一侧倾斜45度防止挥发物乙醚易与空气形成对流，这样干燥迅速。

（10）如果没有乙醚或无水乙醇时，可以用石油醚提取，石油醚沸点30-60℃为好。

（11）使用挥发乙醚或石油醚时，切忌直接用火源加热，应用电热套、电水浴、电灯泡等。

（12） 这里恒重的概念有区别，它表示最初达到的最低重量，即溶剂和水分完全挥发时的恒重，此后若在继续加热，则因油脂氧化等原因会导致重量增加。

（13） 在干燥器中的冷却时间一般要一致。

‘贰’ 国标规定脂肪的测定方法有哪几种

有四种，一是索氏提取法，二是酸水解法，三是碱水解法，四是盖勃氏法

‘叁’ 检验脂肪的方法

测定身体内脂肪重量的方法很多，现在简单地介绍几种。

1、重水法 用重水法可以测出被测人全身的含水量。已知人体除脂肪部分(LBM)的含水率是72%，由全身的含水量和LBM的含水率就可以计算出被测人的除脂肪重量，进而求出身体内的脂肪重量。

2、放射性同位素40K法 人体除脂肪部分(LBM)中天然钾(K)的含量是一定的。天然钾(K)由稳定性同位素39K和41K及放射性同位素40K组成。天然钾(K)中放射性同位素40K的百分含量也是一定的。一克天然钾(K)中的放射性同位素40K每分钟发生二十八次?-衰变。用全身记数器测定被测人体内每分钟发生?-衰变时放出的?粒子数，就可以计算出被测人的除脂肪体重。然后，求出身体内的脂肪重量。

以上两种方法测量身体的脂肪重量时，都需要相当复杂而精密的仪器。

3、水中测量法 水中测量是一种比较精确而又比较简单的方法。就是使被测的人的身体浸在水中，测量身体在水中的浮力，然后，算出被测人的体积。假定人体脂肪的比重是0.9千克/立方分米。身体的除脂肪部分(LBA)的比重是1.095千克/立方分米，就可以算出身体内除脂肪部分的重量和脂肪的重量。

水中测量法的具体做法是:做一个具有管状框架的椅子，将这样的椅子挂在大称的称钩上。被测者坐在椅子上，使管状框架的椅子和被测人的身体全部浸在水中。人体内骨骼和肌肉的重量越大，被测人的身体就越往下沉，在水里的体重越重。人体内的脂肪越多，越有向上浮的倾向，在水中的重量越轻。

4、测量皮肤褶厚度的方法 测量皮肤褶的厚度可以粗略地推算出身体脂肪的百分数。皮肤褶厚度可以反映皮下脂肪的含量，但不能反映隐藏在肌肉里的脂肪。这种方法比较简单。

测量皮肤褶方法如下: 用拇指和食指捏起皮肤，不要把肌肉包括在内。用测量仪器或卡尺(也可用普通尺子)测量双折皮肤的厚度，以间接算出身体脂肪的百分数。

测量皮肤褶的部位在肩胛骨下角处、腹部、上臂外侧三角肌等三个部位。肩胛骨下角处在背部左肩下和右肩下。测量腹部皮肤褶时，要提捏上腹左前方和右前方的皮肤褶。测量出这三个部位的皮肤褶厚度以后，参考身体脂肪百分数推算表，就可以推算出自己的身体脂肪百分数。

在正常情况下，身体脂肪随年龄增长而增加，从20岁到60岁之间，每增长10岁，脂肪百分数增加百分之一。健康女子的身体脂肪率以22%为限，男子以15%为限，优秀运动员则更低呢。

‘肆’ 脂肪的检验方法是什么

常规的脂肪检测，需要到医院做脂肪肝的检查，可以做肝脏的超声，脂肪肝的患者往往脂肪都是增多的，通过肝脏的超声可以判断是轻度脂肪肝，重度脂肪肝还是中度脂肪肝，重度脂肪肝的人往往体内脂肪是很多的。

‘伍’ 脂肪可用什么试剂来检测检测过程是什么

用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液

步骤:

1:首先取一粒浸泡过的花生种子，右手持刀片，将子叶削去一片，形成一个平面。

2、用滴管在花生子叶薄片上滴上几滴苏丹3染液，染色两到三分钟。

3、用吸水纸吸去薄片周围多余的染液，滴上1到2滴酒精溶液，洗去浮色。

4、制成临时装片。

5、用高倍镜观察。

注意事项:

①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰，有的地方模糊。

②酒精的作用是：洗去浮色

③使用显微镜观察
④使用不同的染色剂染色时间不同

‘陆’ 脂肪可用什么试剂来检测检测过程是什么

用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液

步骤:

1:首先取一粒浸泡过的花生种子，右手持刀片，将子叶削去一片，形成一个平面。

2、用滴管在花生子叶薄片上滴上几滴苏丹3染液，染色两到三分钟。

3、用吸水纸吸去薄片周围多余的染液，滴上1到2滴酒精溶液，洗去浮色。

4、制成临时装片。

5、用高倍镜观察。

注意事项:

①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰，有的地方模糊。

②酒精的作用是：洗去浮色

③使用显微镜观察
④使用不同的染色剂染色时间不同

‘柒’ 脂肪的鉴别方法是

脂肪可以被苏丹3染成橘黄色或被苏丹4染成红色。可以根据这些化学试剂所产生的颜色反应，鉴定生物组织的脂肪的存在。

脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯，其中甘油的分子比较简单，而脂肪酸的种类和长短却不相同。脂肪酸分三大类：饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸。

(7)脂肪的检测方法扩展阅读：

脂肪的生物合成包括三个方面：饱和脂肪酸的从头合成，脂肪酸碳链的延长和不饱和脂肪酸的生成。脂肪酸从头合成的场所是细胞液，需要CO2和柠檬酸的参与，C2供体是糖代谢产生的乙酰CoA。反应有二个酶系参与，分别是乙酰CoA羧化酶系和脂肪酸合成酶系。

首先，乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下生成，然后在脂肪酸合成酶系的催化下，以ACP作酰基载体，乙酰CoA为C2受体，丙二酸单酰CoA为C2供体，经过缩合、还原、脱水、再还原几个反应步骤，先生成含4个碳原子的丁酰ACP，每次延伸循环消耗一分子丙二酸单酰CoA、两分子NADPH，直至生成软脂酰ACP。

产物再活化成软脂酰CoA，参与脂肪合成或在微粒体系统或线粒体系统延长成C18、C20和少量碳链更长的脂肪酸。在真核细胞内，饱和脂肪酸在O2的参与和专一的去饱和酶系统催化下，进一步生成各种不饱和脂肪酸。高等动物不能合成亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸，必须依赖食物供给。

‘捌’ 高中生物如何对脂肪进行检测

1、材料的选取：
含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
2、步骤：
制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央。
染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)。
制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)。
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)。

‘玖’ 高中生物脂肪的检测为什么有两种方法

本质上来说两种方法都是一种，只是形式有所不同。课本按观察方法划分，前者直接打碎滴加的是肉眼直接观察法，用于观察判断脂肪是否存在，属于宏观上的。后者切片在显微镜下观察是不破坏细胞结构，能够看清细胞中脂肪存在形态的方法，属于微观上的。课本上还说了可以采用两种试剂，苏丹三和苏丹四，两种试剂各自独立，染色过程相同，唯一区别是着色，苏丹三呈黄色，苏丹四呈橘红色。（颜色记得不是很清楚，回答严格按课本词汇即可。）