细胞干鉴别方法

❶ 怎样验证一个细胞是干细胞

常用类胚体、畸胎瘤或嵌合体三种实验方法验证 。
以小鼠干细胞为例
类胚体实验：干细胞在悬浮培养时，培养基中不添加LIF（一种分化抑念银仿制剂），静下观察会发现细胞形成的球状细胞团并相互融合，中心由于缺少养分死亡搏腊形成空腔。
畸胎瘤实验：将干细胞注射到同品系小鼠的背部仔纤皮下，会形成有三个胚层的畸胎瘤。
嵌合体实验：将干细胞注射到同品系小鼠胚胎的囊胚腔中，出生后检测该小鼠的遗传物质会发现有些细胞是由注射的干细胞分化而来的。

❷ 表皮干细胞的鉴别

利用干细胞最显着的两个特征即慢周期性及自我更新能力来鉴定在体与离体干细胞是最基本且可靠的实验手段。由于干细胞的慢周期性，可采用标记滞留细胞的分析方法识别在体的静息干细胞。干细胞的自我更新能力在体外培养则表现为无限的增殖能力，形成细胞克隆，从而识别离体的干细胞。但这两种方法应用不方便，目前利用仔陪表皮干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的表皮干细胞鉴别方法[1]。
由于表皮干细胞及短暂扩充细胞表面高表达β1整合素，而有丝分裂后细胞及终末分化细胞不表达β1整合素，因而可以用β1整合素的抗体来鉴别表皮干细胞及短暂扩充细胞。虽然表皮干细胞β1整合素的表达量约为短暂扩充细胞的两慎戚搜倍，但一般的光镜下尚不能依靠β1整合素阳性强度的不同来区分干细胞和短暂扩充细胞。如果利用激光共聚焦显微镜，将组织切片进行1μm的断层扫描，即在单层细胞水平上观察，则可以分辩出干细胞与短暂扩充细胞表达β1整合素阳性强度的差异[5，10]。
近来，有实验结合干细胞表面的α6整合素及另一个与增殖有关的表面标志10G7，可以区分干细胞与短暂分化细胞。检测发现α6阳性而10G7阴性（α6bri10G7dim）的细胞处于静息状态，在体外培养中具有很强的增殖潜能，证实为干细胞：而α6与10G7均阳性（α6bri10G7bri）的细胞是短暂扩充细胞，体外培养证实其增殖能力有限；α6阴性的细胞其角蛋白K10则呈阳性表达，说明是有丝分裂后终末分化细胞。因而可以利用α6整宽历合素与10G7的单抗来区分干细胞、短暂扩充细胞和分化的表皮细胞[10]。
角蛋白（Keratins）是表皮细胞的结构蛋白，它们构成直径为10 nm的微丝，在细胞内形成广泛的网状结构。随着分化程度的不同，表皮细胞表达不同的角蛋白，因而角蛋白也可作为干细胞、定向祖细胞、分化细胞的鉴别手段。表皮干细胞表达角蛋白19（Keratin19,k19），定向祖细胞表达角蛋白5和14（Keratin5、Keratin14,K5、K14），而分化的终末细胞则表达角蛋白1和10（Keratin1、Keratin 10，K1、K10）。实验证实表皮基底层中K19与β1整合素表达均为阳性的细胞是标志滞留细胞，具有干细胞的慢周期性。一般认为毛囊的隆突部干细胞及胎儿、新生儿表皮基底层干细胞均表达K19，成人无毛发皮肤如手掌、脚掌部位基底层的干细胞K19表达阳性，但有毛发皮肤基底层中的表皮干细胞K19则表达为阴性[11，12]。又有实验发现毛囊隆突部表皮干细胞表达角蛋白15（Keratin15,K15），而且在干细胞的分化过程中，K15表达的减少较K19表达的减少更早，K15阴性而K19阳性的细胞可能是“早期”短暂扩充细胞，故K15可能较K19在鉴别毛囊的隆突部表皮干细胞更有意义[13]。

❸ 怎么鉴定一个细胞是干细胞

干细胞在形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。干细胞可分为胚芹册胎干细胞和成体干细胞。升首则干细胞具有自我更新复吵棚制的能力（Self-renewing），能够产生高度分化的功能细胞。